应用酵母双向杂交系统筛选和鉴定P75NGFR作用的蛋白

目的：探讨Ｐ７５ＮＧＦＲ介导神经细胞凋亡的分子机制。方法;以转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的大鼠小脑神经细胞株Ｒ２Ｌ２为细胞模型,应用酵母双向杂交系统（ｔｗｏ－ｈｙｂｒｉｄ ｓｙｓｔｅｍ）筛选和鉴定Ｐ７５ＮＧＦＲ胞内区Ｐ７５ＩＣＤ作用的蛋白。结果：和Ｐ７５ＮＧＦＲ作用的蛋白由一个６００ｂｐ大小的ＣＤＮＡ片段编码。结论：该工作将有助于探讨Ｐ７５ＮＧＦＲ介导细胞凋亡的分子机制和信号,为勃勃系统退行性病变的病因、     

人类Cyr61基因的组织表达谱分析

预测ＨｕｍＣｙｒ６１基因的变异剪接转录本,并通过分析在不同组织中的表达谱进行验证,以便初步探讨ＨｕｍＣｙｒ６１基因的功能。方法应用计算机辅助的电子杂交步移策略,通过对比查询数据反返回的ＥＳＴｓ序列和先前克隆的ＨｕｍＣｙｒ６１ｃＤＮＡ序列,预测了ＨｕｍＣｙｒ６１基因的变异剪接转录本。将ＨｕｍＣｙｒ６１基因片段制备探针后与含有人体８个组织ｍＲＮＡ的ＭＴＮＩ膜杂交,进行表达谱分析。结果计算机预测ＨｕｍＣ     

高血压心肌肥厚机制的研究进展

心肌肥厚是高血压最 常见的并发症之一,临床上大多数表现为左心肥厚(LVH),其发病机制至今尚不清楚。研究表明,LVH不仅是高血压发病的独立危险因素,且成为心血管疾病的重要危险因子。本文扼要地介绍了心肌肥厚分子机制研究中一些新的方法,如用差减杂交法分离心肌肥厚相关基因和用酵母双杂交系统调取与心肌肥厚发生有关的信号分子。这方面的研究将成为揭示高血压发病机制的重要研究内容,并将为心血管病的防治提供有益的线索。     

异核苷掺入寡核苷酸的合成及其与互补序列的结合研究

目的合成异核苷掺入寡核苷酸并考察它们与互补序列的结合能力.方法采用DNA固相合成仪合成寡核苷酸,通过热变性实验考察双链的稳定性.结果合成了四条单异核苷掺入的寡核苷酸,热变性实验结果发现异核苷的引入降低了双链的稳定性,当异核苷处于寡核苷酸链的中央时,这种影响更为明显.异核苷6′-OH处于游离和烯丙基保护状态时的结果没有显著差异.结论寡核苷酸中的异核苷使链发生扭曲,从而导致双链稳定性降低.     

白果槲寄生亚种的分子遗传学鉴定

白果槲寄生Viscum album L．的代谢物，特别是粘毒素的性质、含量及提取物的生物活性与不同亚种有关，提示它们具有遗传特异性和宿主特异性，因而很难根据其形态学和解剖学特征来鉴别。为确定这种特异性是否严谨及在亚种间的杂交是否很少发生，作者以叶绿体trnH(GUG)-trnK(UUU)和核     

杂交贝母非生物碱成分的结构研究

杂交贝母是以利川贝母 Fritillaria lichuanensisP.Li et.C.P.Yang为父本 ,湖北贝母 F.hupehensisHisiao et K. C. Hsia为母本杂交而成 ,进行有性繁殖 ,且具结实率高 ,所结种子饱满 ,发芽率高 ,病虫害少 ,成本低等特点。为评价杂交贝母的药用价值 ,扩大贝母资源提供依据 ,本实验对杂交贝母化学成分进行了提取、分离和鉴定 ,从其非生物碱部位中分离得到 6种成分 ,经与标准品 TLC对照比较及光谱分析 ,鉴定为胡萝卜苷 ( ) ,ent- kauran- 1 6β,1 4- diol( ) ,β-谷甾醇 ( ) ,cholest- 5 - en- 3β- oxyl hexadecanoate( ) ,硬脂酸 ( …     

正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库的构建及差异基因的初步筛选

目的构建人正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库.方法采用抑制削减杂交技术,以正常肝组织及有肝癌背景的肝硬化组织作为对比材料.分离出mRNA,经反转录后,通过两轮杂交、两次PCR和T/A克隆构建了两种组织间差异表达基因的cDNA削减文库.结果挑取70个克隆进行酶切和PCR鉴定,显示65个克隆有250～2000 bp插入片段.结论用SSH和T/A克隆技术成功构建了正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库.该文库的建立为进一步筛选、鉴定出肝癌发生过程中的相关调控基因奠定了基础,也有助于阐明肝硬化在肝癌发生过程中所起的作用.     

人脑胶质瘤恶性进展相关基因表达谱中葡萄糖代谢相关基因的分析

目的　研究胶质瘤糖代谢增强时哪些基因从中发生显著变化。方法　根据已经建立的胶质瘤恶性进展相关基因表达谱 ,用生物信息学分析方法和 Gene Bank检索的资料分析其中葡萄糖代谢相关基因的变化。结果　在胶质瘤恶性进展中 ,与葡萄糖代谢相关的差异表达基因有 HK1、PFK、Py K、Tra、citratc synthase、isocitrate dehy-drogenase、L DH-A、L DH-B、Glut5、L-xylulose reductase共 10条。结论　上述的 10条基因涉及到多个代谢途径 ,可为进一步研究胶质瘤细胞葡萄糖代谢的分子机制提供线索 ,其中在磷酸戊糖途径中起关键作用的 Tra基因可以作为治疗靶点作深入研究