绿色荧光蛋白标记兔BMSCs体外成骨的定量能谱分析

目的观察绿色荧光蛋白( GFP)标记的兔骨髓间充质干细胞( BMSCs)成骨诱导后形态学改变和体外骨生成中矿化钙结节的形成,并结合扫描电镜和X射线能谱分析技术( SEM/EDS)对矿化钙结节元素进行定量能谱分析。方法
　　用携带GFP基因的腺病毒转染兔BMSCs进行示踪标记,并诱导细胞向成骨方向分化,通过倒置荧光显微镜、钙结节茜素红染色观察成骨诱导后细胞形态改变和矿化钙结节的形成,结合SEM/EDS技术观测矿化钙结节的表面微观结构及其元素构成。结果腺病毒介导GFP基因( Ad-GFP )转染兔 BMSCs后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,经成骨诱导后细胞形态向成骨方向分化,并形成不透光的矿化钙结节,钙结节茜素红染色见红色矿化结节,SEM下见矿化钙结节散布于细胞中,细胞重叠生长,分泌基质旺盛。 EDS分析显示矿化钙结节主要组成元素与正常骨组织相同,其钙磷比(Ca/P)为1.55,接近正常骨组织钙磷比1.49。结论 Ad-GFP能成功转染并标记兔BMSCs,成骨诱导后BMSCs向成骨方向分化,具备较好的骨生成能力,BMSCs体外矿质化成骨过程与体内基本相同。     

3种酸蚀、粘接方法粘接托槽后釉质粘接剂界面的超微形态观察

目的研究不同粘接材料、不同酸蚀方法粘接正畸金属托槽后釉质粘接剂界面纵切面的超微形态。方法选择正畸拔除的健康前磨牙72颗,随机分成3组,每组24颗。A组用体积分数37%的磷酸酸蚀30 s,京津釉质粘接剂粘接金属托槽;B组用体积分数37%的磷酸酸蚀30 s,Transbond光固化粘接剂粘接托槽;C组用自酸蚀处理液加压涂抹3 s,Transbond光固化粘接剂粘接托槽。高倍立体显微镜及扫描电镜观察3组牙釉质粘接剂界面纵切面的形态。结果 A组界面紧密而均匀,粘接剂固化后形成的颗粒较大,颗粒之间间隙明显。B组界面紧密均匀,粘接剂固化后的颗粒较小而均匀,颗粒间结合紧密。C组界面疏松不均匀,树脂突少而细,有时可见较明显的裂隙。结论不同酸蚀、粘接方法牙釉质粘接剂界面的结合情况不同,磷酸酸蚀组釉质表面与粘接剂间形成的树脂突较均匀而密合,而自酸蚀组多处存在较大的裂隙,提示酸蚀方法可能是影响微渗漏的主要原因。     

牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性的研究

采用胶原酶消化人牙周膜组织,获得牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cells,PDLSCs),经体外鉴定、扩增后构建PDLSCs细胞膜片,并通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜(SEM)对PDLSCs细胞膜片形态学进行检测。此外,细胞膜片厚度及膜片中细胞密度也被检测。结果:PDLSCs成功被分离、培养、鉴定,并且PDLSCs体外培养2周后,获得白色膜状PDLSCs细胞膜片。倒置显微镜下观察显示,细胞复层生长,细胞呈典型的纺锤状。体式显微镜下观察显示,     

C57BL/6J小鼠胚胎腭突体外培养模型的建立

目的:建立近交系C57BL/6J小鼠胚胎腭突体外培养模型,为研究胚胎腭突发育提供条件。方法:无菌条件下,在体视显微镜下取怀孕13.5 d(GD13.5)的胚胎腭突,进行培养。分别于培养6、24、48 h后取出固定,行组织切片苏木精-伊红(HE)染色和扫描电镜(SEM)观察,每个时间点分别12对。结果:细胞核染色显示,6 h时,两侧腭突未融合;24 h时,两侧腭突开始融合,但是中间仍有部分腭中嵴上皮(MEE)细胞残留;48 h时,两侧腭突完全融合,中间的MEE完全消失。扫描电镜显示,6 h时,两侧腭突之间有一定裂隙;24 h时,两侧腭突已接触但能观察到腭中缝(MES);48 h时,两侧腭突已完全融合,MES消失。结论:本方法为研究腭裂发病机制提供了一个良好的体外模型。     

SEM-EDS解析药物对玻璃注射剂瓶内表面的侵蚀程度

目的 研究碱性药物对直接接触的低硼硅玻璃注射剂瓶内表面的侵蚀情况,考察药品包装材料与药物的相容性。方法 采用扫描电镜观察灌装注射用帕瑞昔布钠的低硼硅玻璃注射剂瓶内表面,并结合X射线能谱仪确证侵蚀部位。结果 通过对低硼硅玻璃注射剂瓶内表面的扫描电镜图的研究,显示阳性对照样品能较好区分不同的侵蚀程度,加速试验的各时期样品均未发生明显侵蚀现象。结论 扫描电镜结合X射线能谱仪能直观显示低硼硅玻璃注射剂瓶内表面结构被接触药物侵蚀的程度,可作为药包材和药物相容性的评价依据。     

新疆北部骆驼源细粒棘球绦虫成虫扫描电镜观察

从新疆北部地区感染囊型包虫病的骆驼肝，肺包囊中收取细粒棘球蚴原头节，实验感染家犬后，分别于第３５天和第４５天收集成虫进行扫描电镜观察。骆驼源细粒棘球绦虫成虫的外部形态特点；整个虫体表面被覆着微毛，与其他来源的成虫相比其微毛相对浓密柔细，成熟体节的生殖孔有两种不同的形态；有雄茎伸出的生殖孔凹陷不明显，孔周区没有感觉乳头出现，在雄茎表面密布丝状微绒毛，没有雄茎伸出的生殖孔凹陷明显，孔周区有许多大小不等     

新疆牛源细粒棘球绦虫成虫发育的扫描电镜观察

本报告为用新疆阿勒泰地区牛体内采集的原头节人工感染家犬,在感染后第15、25、35天分别剖杀犬,收集虫体进行扫描电镜观察的结果。成虫体节发育在15天时为1节,25天为2节,35天为3～4节并已达到性成熟。成虫体表均被一层微毛覆盖,不同部位体表微毛的形态不同。在吻突顶部,微毛呈绒线状,纤细柔软,较稀疏,随着发育逐渐变长、变浓密,末端卷曲。吻突基部和吸盘区的微毛呈绒线状,但较顶突微毛粗短。体节部位微毛在不同发育时间形态不同,呈现圆锥形绒线状,锯齿形鳞片状。成熟虫体体表微毛呈圆锥形绒线状,较坚硬,有规律排列。性成熟虫体生殖孔为圆形,有的虫体可见伸出的雄茎,雄茎表面也被有纤细的微毛。生殖孔周围体表微毛较密短,呈地毯样,间有大小不等的乳头状突起,可能为感觉乳头。     

单克隆抗体影响利什曼原虫侵入吞噬细胞的扫描电镜观察

用扫描电镜观察在体外培养条件下利什曼原虫与小鼠腹腔吞噬细胞的相互关系。实验证明,前鞭毛体在抗杜氏利什曼单克隆抗体处理后,形态发生很大变异,部分原虫呈溶解现象,部分原虫仍可粘附于吞噬细胞外,但单克隆抗体经 56℃灭活后,则原虫形态无改变,且粘附在吞噬细胞周围,有些原虫的鞭毛及虫体前端已进入细胞内,认为其机制可能与前鞭毛体外膜上的配基与吞噬细胞受体的结合有关。     

不同参数的Er：YAG激光离体牙窝洞预备的形态学观察

目的：观察Er：YAG激光对离体人牙进行窝洞预备后的形态学改变,比较不同的能量设置及不同的水气比作用下的预备效果。方法：将10个无龋的离体磨牙随机分为5组（n＝2）,分别用不同Er：YAG激光参数进行窝洞预备。扫描电镜下观察牙釉质和牙本质的形态学改变。结果：经Er：YAG激光照射后,牙釉质呈现出一个粗糙不平的表面,牙本质层清洁,小管开放。在总功率相近的情况下,当水冷却降到50％或切割牙釉质时脉冲能量增加到700 mJ、切割牙本质时脉冲能量增加到400 mJ时,牙釉质及牙本质表面可发生部分熔融改变。结论：Er：YAG激光使用合适的参数进行牙体硬组织的切割安全有效,但在功率相近的情况下,水冷却不足或能量过大（牙釉质＞700 mJ,牙本质＞400 mJ）可损伤牙体组织。     

In-ceram氧化锆基全瓷冠的适合性评价

目的评价3种In-ceFan3氧化锆基全瓷冠的边缘和内部间隙。方法制作In-Ceram YZ全瓷冠、In-ce-rainZirconia全瓷冠和Wolceram全瓷冠各12个,采用树脂粘接剂粘固于人工预备的离体上颌前磨牙上,经过温度循环试验后．沿近远中向和颊舌向片切试件,用扫描电镜观察并测量全瓷冠组织面与牙体组织之间的间隙,3组试件的数据用SPSS12．0软件进行统计学分析。结果3种全瓷冠的间隙宽度中,均是边缘间隙宽度最小,[牙合]面间隙宽度最大。In-CeramYZ全瓷冠的边缘间隙宽度为（19．86±1．81）μm,肩台间隙宽度为（92．66±0．64）μm,[牙合]面间隙宽度为（128．06±1．38）μm,在3种全瓷冠中最小;Wolceram全瓷冠的边缘间隙宽度为（29．43±0．84）μm,肩台间隙宽度为（117．89±1．73）μm。轴壁间隙宽度为（112．50±1．71）μm．[牙合]面间隙宽度（168．11±1．33）μm．在3种全瓷冠中最大。结论3种In-Ceram氧化锆基全瓷冠的间隙宽度均在临床可接受范围内,其中In-CeramYZ和In-CeramZirconia全瓷冠的边缘和内部间隙较Wolceram全瓷冠小。