一些病毒感染对宿主肥胖的影响

近年来,人类社会中肥胖者在不断增多。导致肥胖的病因很多,感染因素是一个易被忽视的病因,其中一些病毒感染对宿主肥胖具有明显的影响。本文就一些病毒对宿主肥胖的影响作一个概述。     

成年大鼠胰岛的体外基因转染

目的 探讨携带外源基因的慢病毒在体外有效感染胰岛及外源基因在胰岛中的表达，为通过移植前向胰岛细胞转入特定的免疫调节分子基因诱导胰岛移植物耐受奠定基础。方法 将目的基因CTLA4Ig导入慢病毒载体pWPTS，构建成pWPTS-CTLA4Ig载体。用磷酸钙沉淀法将pWPTS-EGFP、pWPTS-CTLA4Ig分别和其辅助载体pMD2．G、pCMVΔ8．92共转染293T细胞，收获病毒上清液，测定病毒滴度后感染新分离的胰岛。通过Western Blot测定胰岛培养上清液中CTLA4Ig蛋白的表达。结果 ①成功构建了携带CTLA4Ig基因的慢病毒载体pWPTS-CTLA4Ig；②包装产生的慢病毒Lenti-EGFP、Lenti-CTLA4Ig在体外可以感染胰岛，其中在Lenti-EGFP慢病毒感染的胰岛观察到了绿色荧光，及在Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛培养上清液中检测到了CTLA4Ig蛋白的表达。结论 慢病毒在体外可以有效感染大鼠胰岛，且携带的外源基因可以在胰岛细胞中稳定表达，其中Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛为进行胰岛移植并诱导体内特异的胰岛移植物耐受奠定了基础。     

从人分离出两株甲型流感H9N2亚型毒株内部基因特性的研究

目的 了解2株从人分离出的H9N2亚型毒株内部基因特性，并弄清其来源。方法 用RT-PCR扩增目的基因，用P^CEM-T Vector(美国Promega公司)，4℃过夜连接，重组质粒转入dH5a细菌，筛选阳性菌落，酶切鉴定，送六合通公司自动测序。然后进行进化树分析。结果 2株测定毒株内部基因均为G9基因系，它们相互间除PA基因有差异外，其余5个基因均相同。结论 2株测定毒株的基因组均为G9基因系，它们是由携带不同基因特性H9N2毒株的禽群分别直接感染人，而不是来自同一禽的H9N2亚型流感病毒。     

建立一种用重组蛋白检测抗口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法

目的研究以重组蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒（FMDV）感染后的动物血清中特异性抗体的可能性,为建立一种非病毒颗粒的ELISA检测试剂盒提供实验依据。方法利用自行构建表达的O型口蹄疫病毒VP1表位肽重组蛋白（VP1epi）作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳工作浓度和包被方法,优化各项实验条件,并以FMDV感染后的豚鼠血清作为标准阳性血清确定ELISA方法的特异性和灵敏度。结果FMDV感染后的阳性豚鼠血清可以很好地识别VP1epi重组蛋白,用此蛋白包被检测抗FMDV抗体的灵敏度可达1∶3200,并证明所检测的抗体是FMDV特异性的。结论VP1epi重组蛋白可以替代FMDV颗粒用于建立检测抗FMDV抗体的ELISA试剂盒。     

病毒性肝炎多重感染因素分析

为了解病毒性肝炎多重感染的危险因素,我们采用1∶1病例对照的研究方法,对广州市9所综合性大医院141对病毒性肝炎多重感染的患者进行问卷调查,资料单因素用EP16分析,多因素用Logistic回归方法分析.结果表明,家庭肝炎史(OR=9.57,p<0.005),手术史(OR=10.95,p<0.05),注射史(OR=3.99,p<0.001),输液史(OR=11.95,p<0.005),是病毒性肝炎多重感染的危险因素,而饭前便后洗手的习惯(OR=0.27,p<0.05),乙肝疫苗接种史(OR=0.064,p<0.001)是保护因素.提示广州市病毒性肝炎多重感染的主要途径是血液传播,而良好的卫生习惯有助于减少肝炎多重感染的机会.     

EB病毒BHRF1基因的克隆及其表达产物抑制细胞凋？…

目的 ＥＢ病毒ＢＨＲＦ１基因克隆，其表达产物抑制ＣＨＯ细胞凋亡功能的研究。方法 以Ｂ９５－８细胞株ＥＢＶ ＤＮＡ为模板设计一对引物，采用ＰＣＲ技术扩增ＢＨＲＦ１基因，用目的基因内的两个单酶切点ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ进行酶切鉴定。用引物上所引入的两个酶切位点ＮｃｏⅠ、ＳｃｌⅠ酶切目的基因后定向连接到ｐＢＶ２２１载体上，转入宿主菌ＤＨ５α经质粒抽提，单、双酶切鉴定，从所获克隆中筛选重组质粒克隆。温控诱导     

病毒性肝炎微循环和血液流变学的临床观察

本文报导病毒性肝炎80例（CAH、AH、LC和CPH各20例）的甲襞微循环和血液流变学变化。血液流变学异常程度，依次为CAH、AH、LC和CPH，并与肝功能损害密切相关，甲襞微循环异常总积分则以CAH和LC最明显，而其管襻形态、血流流态、襻周状态各型之间亦相异。结合文献，讨论病毒性肝炎的血液流变学和微循环检查的临床重要性，两者有相辅相成的价值。     

新疆南疆地区嗜人T淋巴细胞病毒I型血清流行病学调查

通过血清流行病学调查，了解人嗜Ｔ淋巴细胞病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－１）在新疆南部（南疆）少数民族地区的流行情况，自南疆喀什，和田，阿图什地区采集正常人群中不同年龄组，不同民族的血清标本２６４２份，其中维吾尔族（维族）１０８２份，汉族１０８９份，柯尔克孜族（柯族）４７１份。用免疫荧光法（ＩＦＡ）检测上述血清中ＨＴＬＶ－１ＩｇＧ抗体，结果维族抗体阳性者为０．７４％（８／１０８２）汉族为０（０／１０８９）柯族     

表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D的重组痘苗病毒活疫苗株的建立

我们以前曾报道，表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白Ｄ（ＨＳＶ－２ｇＤ）的重组痘苗病毒（实验疫苗株）能保护被免疫小鼠抵抗致死量ＨＳＶ－２病毒的攻击。在此工作基础上，严格按人用疫苗研究要求的实验条件，成功地建立了表达ＨＳＶ－２ｇＤ的重组痘苗病毒活疫苗株。首先将经聚合酶链反应（ＰＣＲ）修饰的ＨＳＶ－２ｇＤ基因插入痘苗表达质粒ｐＪＳＢ１１７５，置于痘苗病毒Ｐ７５Ｋ早／晚期启动子控制下。将此重组质粒用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法转染已受野型ＴＫ＋痘苗病毒天坛７６１株感染的人胚肺二倍体细胞。经同位素探针（３２Ｐ－ＨＳＶ－２ｇＤ）原位杂交法和３轮蚀斑纯化，筛选出基因组内整合有ＨＳＶ－２ｇＤ基因的重组痘苗病毒。斑点和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实，ＨＳＶ－２ｇＤ基因已插入痘苗病毒基因组内预期的ＴＫ区段，间接免疫荧光检测显示，重组病毒感染细胞后能有效地表达ＨＳＶ－２ｇＤ蛋白。     

单克隆抗体对HFRS病毒50K结构蛋白的分析

采用18株抗HFRS病毒McAb,以Western-blotting技术对纯化的该病毒50K结构蛋白进行了分析。结果有7株McAb可与该蛋白反应,这7株McAb的特性(包括感染细胞膜抗原免疫荧光染色模式、中和活性及HI活性等)各不相同,提示它们所针对的抗原决定簇的特性也不同。用ELISA阻断试验等证明,上述7株McAb中,有5株所针对的抗原决定簇之间有部分相同或重叠,并提示这些具有不同特性的抗原决定簇确实位于同一结构蛋白上。分析结果表明,该50K结构蛋白的特性及结构均较复杂,值得进一步研究。