淫羊藿总黄酮(EF)对老龄大鼠Th1、Th2、Th3细胞的调节作用

目的：探讨淫羊藿总黄酮（EF）对衰老大鼠脾淋巴细胞Th1、Th2、Th3各类细胞因子的调节作用.方法：采用流式细胞仪,监测比较老龄大鼠脾脏淋巴细胞凋亡率;采用Th1、Th2、Th3 cDNA芯片,分别检测正常青年组（YC）、老龄大鼠组（OM）、EF组、NF-KB阻断剂组（PDTC）、PDTC＋EF组的Th1、Th2、Th3,各类细胞因子信号差异表达.结果：①老龄大鼠普遍存在淋巴细胞过度凋亡现象,EF可显著抑制这种过度凋亡状态.②YC组,Th1、Th2、Th3类细胞因子之间处于平衡状态（P＞0.05）;OM组Th1、Th2、Th3类细胞因子表达比YC组增高,呈Th2、Th3类细胞因子优势应答（P＜0.05）.③EF组Th1、Th2、Th3类细胞因子均较OM组明显降低（P＜0.05）,其趋势与YC组近似,并且Th1、Th2、Th3类细胞恢复平衡.④NFKB通路抑制后（PDTC组）,Th1、Th2、Th3类细胞因子平衡失调,Th2优势更加明显（P＜0.05）;而PDTC＋EF组,Th1、Th2、Th3各组表达值则较PDTC组下调,其组内Th1和Th2也重新达到一种相对平衡状态.结论：老龄大鼠脾淋巴细胞过度凋亡,Th1、Th2、Th3类细胞因子分泌增高,Th2、Th3类细胞因子优势应答;EF可以抑制淋巴细胞过度凋亡,校正老龄大鼠Th1、Th2、Th3类细胞因子之间的比例失衡,重塑Th1-Th2-Th3细胞免疫调节网络的良性平衡.     

HLAⅠ、Ⅱ类抗原的组织配型基因芯片的建立及应用

目的应用基因芯片技术进行北方汉族人群HLAⅠ、Ⅱ类抗原中分辨度分型研究,建立稳定的HLA检测芯片。方法采用寡核苷酸芯片分型方法,选择了中国人群基因频率较高的等位基因,同时考虑遗传的连锁不平衡,根据HLA-A、HLA-B、HLA-DR、HLA-DQB、HLA-DQA不同基因亚型的独特序列,完成了探针的设计与筛选,共设计了213条探针(HLA-A 56条,HLA-B 66条,HLA-DQA 22条,HLA-DQB 38条,HLA-DR 31条)制成基因分型芯片。采用带荧光标记的引物,用合适的PCR方法扩增HLAⅠ、Ⅱ类抗原上的多态性区域,产物与芯片上探针杂交。杂交结果经荧光扫描并用特定软件分析判断,以此确定样品基因型。结果所有样本的HLAⅠ、Ⅱ类抗原基因分型均获成功。此中分辨度探针可分出598个Ⅰ类抗原等位基因,511个Ⅰ类抗原等位基因,可检出Ⅰ类抗原特异性57个,Ⅱ类抗原特异性30个。结论基因芯片用于HLAⅠ、Ⅱ类抗原分型可行。其分辨率高、特异性强,可用于HLA基因分型、骨髓移植、器官移植的HLA配型、与HLA有密切关系的遗传性疾病的人群筛查。     

组织芯片与基因芯片在肿瘤研究中的联合应用

组织芯片是指固定在载玻片上的组织微点阵,可同时进行分析大量同一实验指标(DNA、RNA及蛋白质)的研究;基因芯片是指固相载体上的高密度DNA微点阵,可检测异常组织与正常组织差异表达基因。组织芯片与基因芯片配合使用在寻找肿瘤基因中有很好的互补作用。利用基因芯片检测出差异表达的侯选肿瘤基因,然后,利用组织芯片迅速筛选鉴定肿瘤基因。从而大大简化和加快从基础研究到临床应用的进程。     

Kkay小鼠Ⅱ型糖尿病相关基因的表达谱研究

目的：研究KkayⅡ型糖尿病小鼠与正常小鼠肝脏差异表达的基因,为人类Ⅱ型糖尿病及其慢性并发症的防治提供依据。方法：以包含8192条小鼠的cDNA基因表达谱芯片研究Kkay Ⅱ型糖尿病小鼠肝脏的基因表达谱。结果：共筛选出差异表达基因154条,包括全长基因68条,表达序列标识（EST）86条;其中40条基因表达增加,114条表达降低。结论：Ⅱ型糖尿病发病机制复杂,不仅有糖、脂肪及蛋白质等物质的代谢紊乱,更重要的是由此可能导致了许多功能蛋白质的异常。     

活动性狼疮肾炎患者外周血单个核细胞基因谱的表达

目的:利用cDNA基因芯片技术检测活动性狼疮肾炎患者与健康人外周血单个核细胞基因表达的差异,探讨其在狼疮肾炎发病中的意义。方法:提取活动性的狼疮肾炎患者的外周血单个核细胞和健康人外周血单个核细胞的mRNA,分别用标有荧光素的dCTP反转录制备cDNA探针,将探针与含有8000点cDNA的CSC-GE-80芯片杂交后扫描荧光强度,上述方法在3组患者中重复3次,从而筛选出恒定的差异性表达的基因。结果:发现活动性狼疮肾炎患者外周血单个核细胞有75个基因表达异常,其中表达上调的基因有42个,下调的基因有33个。结论:多个基因的变化与活动性狼疮的发病相关,其中defensinα₁、S100A8、S100A9基因的上调可能参与了狼疮肾炎的炎症过程。     

cDNA芯片筛查Ⅰb期子宫颈鳞癌转移相关基因

子宫颈癌居全球女性恶性肿瘤的第二位，居我国女性恶性肿瘤之首位。淋巴转移是影响宫颈癌预后的独立因素，但宫颈癌的临床分期中不包括淋巴转移这个因素。因此，本研究采用基因芯片技术研究宫颈癌转移相关基因，希望能在术前鉴别出有淋巴转移的患，以指导宫颈癌的个体化治疗，改善预后。     

基因芯片技术在肿瘤研究中的进展

目的:肿瘤的发生发展是多基因、多阶段的复杂过程,目前对肿瘤的研究仅局限于某一个或几个基因和它们之间简单的调控关系,由于试验技术的限制,无法全面认识肿瘤发生发展过程中各基因复杂的相互调控关系。基因芯片技术可同时检测少则几十,多则几万个基因的差异表达状态,并分析它们之间的相互作用关系,为全面了解肿瘤发生、发展提供了一件实验利器。     

广西柳州地区G-6PD基因突变与新生儿黄疸关系的初步探讨

目的　了解广西柳州地区葡萄糖 6磷酸脱氢酶 (G 6PD)缺陷症的基因突变类型。探讨G 6PD缺陷基因突变与新生儿疸的关系。方法　采用基因芯片技术 ,对 4 4例广西柳州地区籍因新生儿黄疸住院的G 6PD缺陷儿进行检测 ,并对其临床表现进行分析。结果　 4 4例 (5 1条X染色体 )患儿中检出G1388A 2 0例 (2 2 / 5 1,基因发生频率 4 3 1% ) ,G1376T 9例 (11/ 5 1,2 1 6 % ) ,A95G 6例 (8/ 5 1,15 7% ) ,G392T 5例 (6 / 5 1,11 8% ) ,C10 2 4T 1例 (1/ 5 1,2 0 % ) ,未定型 3例。G1388A基因型患儿黄疸持续时间与G392T基因型比较差异有显著性(P <0 0 1) ;G1388A基因型的血红蛋白分别与G1376A、A95G的血红蛋白比较差异有显著性 (均P <0 0 5 ) ;各基因型患儿黄疸出现时间、血总胆红素值及间接胆红素值比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论　G1388A、G1376T、A95G突变型是广西柳州地区最常见的G 6PD突变型。G1388A基因型患儿黄疸持续时间较长、黄疸程度及贫血程度比较重 ;1388位的突变可能与重型新生儿黄疸相关。     

基因芯片在妇科肿瘤中的应用进展

基因芯片是近几年才发展起来的一项新型的生物技术,具有大规模、高通量、高速度、高自动化的优点,为科研和临床提供了强有力的研究工具.目前国内基因芯片的开发、研制和应用还处于刚刚起步阶段.现就基因芯片在妇科肿瘤基因突变检测、基因表达谱的研究、肿瘤的基因分型及妇科肿瘤的早期诊断、防治和疗效预测等方面的应用进展作一简要综述.     

基因芯片在乳腺癌转移及预后研究中的应用

乳腺癌影响着10％的西方国家女性的健康．而且是西方国家女性死亡的主要原因之一。在中周，由于生活水平的提高和环境污染的加剧．过去10年间、乳腺癌发病率上升27％．而且40％确诊患者在5年内死亡。虽然乳腺癌治疗方案不断改进，但远处转移和对化疗药物耐受使乳腺癌患者的总生存期