STUDIES ON VARIANT CYSTEINE-RICH SURFACE PROTEINS IN SWISS ISOLATES OF GIARDIA LAMBLIA

从羊、牛和人各自分离出的贾第虫株都具有一个大的膜蛋白。用生物素和放射性碘标记后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示此膜蛋白分子量的大小，在不同种群之间有着明显的差异。［３５Ｓ］半胱氨酸代谢标记及电泳分析表明每个克隆化虫株都有一个主要蛋白，此蛋白的大小与表面标记技术展示的表面蛋白相似。贾第虫株富含半胱氨酸表面蛋白（ＣＲＩＳＰｓ）具有变异能力。虫株在连续体外克隆化培养几代后，在克隆化的群体中自发的出现了一些新的ＣＲＩＳＰｓ，用抗Ｏ２－４Ａ１虫株表面抗原的特异性抗血清对此虫株进行攻毒反应，结果发现在Ｏ２－４Ａ１的培养液中，这一克隆却存活下来。对重新克隆存活下来的滋养体进行半胱氨酸代谢标记，发现大量新的变异子，而不同克隆的ＣＲＩＳＰ其分子量存在着明显的差异。本文研究提示来自不同宿主的贾第虫株都存在着富含半胱氨酸表面蛋白（ＣＲＩＳＰ）。ＣＲＩＳＰｓ的变异不仅限于从人分离的贾第虫株，而在各类贾第虫株之间是一种普遍现象。     

胆红素对大鼠急性肺损伤形成过程中氧自由基以及caspase-3表达的影响

目的： 探讨胆红素对抗急性肺损伤（ALI）形成的可能机制。方法: 健康雌性Wistar大鼠(190-210 g) 30只，随机分为生理盐水对照组、脂多糖（LPS）致ALI模型组、胆红素干预组。检测肺组织匀浆中羟自由基（OH^-）、过氧化氢(H₂O₂)和超氧阴离子自由基（O₂^·）含量以及肺组织中caspase-3表达的变化。结果: ①ALI模型组肺组织匀浆OH^-、H₂O₂、O₂^·含量及肺组织中caspase-3表达显著高于生理盐水对照组（均P<0.05）。②胆红素干预组肺组织匀浆OH^-、H₂O₂、O₂^·及肺组织中caspase-3表达明显高于ALI正常大鼠（均P<0.05），但少于ALI模型组（均P<0.05）。结论: ①胆红素能在一定程度上减少肺内凋亡细胞数量。②胆红素能减少ALI大鼠肺组织OH^-、H₂O₂、O₂^·水平。③ Caspase-3表达的变化有促脂多糖性肺损伤细胞凋亡作用。     

冠心病患者不对称二甲基精氨酸和同型半胱氨酸对一氧化氮合酶和一氧化氮的影响

目的探讨冠心病患者不对称二甲基精氨酸(ADMA)和同型半胱氨酸(Hcy)对一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)的影响。方法冠心病患者60例和健康体检者30例,测定其ADMA、Hcy、NOS和NO以及血糖、血脂等。结果冠心病组和对照组的ADMA分别为(1.30±0.58)μmol/L和(0.57±0.18)μmol/L、Hcy分别为(31.53±13.26)μmol/L和(20.98±6.39)μmol/L、NOS分别为(5.06±1.82)μ/mg蛋白和(7.03±1.37)μ/mg蛋白、NO分别为(2.56±0.95)nmol/L和(4.21±1.12)nmol/L,两组之间的差异显著(P<0.01)。经相关分析,NOS和NO分别与ADMA和Hcy呈负相关(P<0.05)。结论冠心病患者ADMA和Hcy显著增高,NOS活性降低和NO水平下降与ADMA和Hcy增高有关。     

妊娠晚期孕妇血浆叶酸和同型半胱氨酸含量的临床意义

目的　了解妊娠晚期孕妇血浆叶酸 (FA)、同型半胱氨酸 (Hcy)含量与新生儿体重、孕妇分娩前血红蛋白含量的关系。方法　采用放免法检测 6 7例正常晚孕妇女和 15例正常非孕妇女 (对照组 )血浆FA含量 ,用荧光标记免疫检测法测定血浆Hcy的含量。结果　正常晚孕组血浆叶酸含量 (11 36± 5 38nmol/L) ,明显低于正常对照组 (2 7 77±7 75nmol/L ,P <0 0 5 ) ;正常晚孕组血浆同型半胱氨酸含量 (7 89± 3 2 7μmol/L)明显高于正常对照组 (6 6 3± 1 0 7μmol/L ,P <0 0 5 ) ;两组血浆FA与Hcy含量间均呈负相关 ,新生儿体重与Hcy含量间呈负相关 (P <0 0 5 ) ,与FA含量呈正相关趋势 ,但无统计学意义 (P >0 0 5 )。孕妇分娩前血红蛋白含量与Hcy含量间呈负相关趋势 ,与FA含量呈正相关趋势 ,但无统计学意义 (P >0 0 5 )。孕周与Hcy含量间呈正相关 (P <0 0 5 ) ,与FA含量呈负相关 (P <0 0 1)。结论　测定妊娠晚期孕妇血浆FA和Hcy含量有重要的优生学意义。     

Nrf2在支气管哮喘豚鼠炎症细胞中调控谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达

目的:探讨核因子相关因子-2(Nri2)调控.谷氨酰半胱氨酸合成酶(在支气管哮喘豚鼠肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞中的表达.方法:38只健康雄性豚鼠随机分为对照组(A组)、哮喘组(B组)和地塞米松治疗组(C组),卵蛋白致敏法复制哮喘模型,检测3组豚鼠肺组织匀浆中丙二醛(MDA)浓度,收集BALF,行细胞计数和分类.离心,细胞涂片行免疫细胞化学和原位杂交,检测Nrl2、Bachl、蛋白和mRNA.结果:(1)B组嗜酸性粒细胞数(EOS)比例高于A组和C组;(2)肺组织中MDA浓度B组高于A组和C组;(3)原位杂交A组A值高于B组和c组;Nrt2、Bachl原位杂交A值3组差异无显著;(4)免疫细胞化学B组A值低于A组;Nrf2细胞核内阳性率B组低于A组和c组;Bachl细胞核内阳性率B组高于A组和c组;(5)CSmRNA表达(A值)与Nri2核内阳性率呈正相关,与Bachl核内阳性率呈负相关;B组BALF中表达(A值)与EOS比例呈负相关.结论:支气管哮喘豚鼠体内存在氧化/抗氧化失衡,炎症反应使在豚鼠支气管哮喘炎症细胞中的表达降低,地塞米松可以通过调节NrF2／Bachl核转位而增加表达.     

NF-κB在大鼠急性肺损伤模型肺组织中的表达及N-乙酰半胱氨酸的影响

目的 :检测NF κB在LPS诱导的急性肺损伤 (ALI)肺组织中的表达 ,以及N 乙酰半胱氨酸 (NAC)对ALI的抑制作用。方法 :采用免疫组化染色 (ABC法 )和Westernblot,检测NF κB在急性肺损伤大鼠气道和肺组织中的表达 ,以及NAC干预后活性NF κB表达的变化。结果 :正常对照组大鼠气道黏膜上皮和肺间质中 ,仅见少量散在的NF κB核阳性细胞 ;而LPS诱导ALI后 ,气道黏膜、肺间质、肺泡腔及血管内皮细胞中NF κB核阳性的细胞明显增多 (P <0 .0 1)。NF κB核阳性反应细胞主要为气道黏膜上皮细胞、浸润的炎症细胞、肺泡上皮细胞和血管内皮细胞。NAC治疗组NF κB核阳性细胞较LPS诱导的ALI组及对照组均明显减少 (P <0 .0 1)。Westernblot的结果显示 ,LPS诱导的ALI后不同时间点 ,NF κB的表达不同 ,于急性肺损伤 3h达高峰。各时间点NF κB的表达均较正常对照组高。结论 :LPS诱发的大鼠急性肺损伤的气道和肺组织内NF κB的表达增加 ,肺组织内的多数细胞参与了NF κB的激活。NAC可通过抑制NF κB的激活减轻急性肺损伤的炎症程度     

一氧化氮抗柯萨奇病毒作用的研究进展

柯萨奇病毒是人类病毒性心肌炎的主要病原体.目前临床对柯萨奇病毒感染尚无特异、有效的治疗措施.近年来,研究证明一氧化氮可以灭活柯萨奇病毒的2A和3C蛋白酶,从而抑制病毒的装配成熟,为抗柯萨奇病毒开辟了新的生物治疗的思路.     

兔饮食所致高同型半胱氨酸血症血管内皮功能的实验研究

目的：观察高同型半胱氨酸血症对血管内皮功能的影响。 方法： 建立兔高同型半胱氨酸血症模型。将18只新西兰兔随机分为：正常对照组（control组）6只、高蛋氨酸饮食组（M组）12只；于实验第4周始，将M组再随机分为两组，M+0组6只，继续饲高蛋氨酸饮食；M+F组6只，在高蛋氨酸饮食基础上，再加以叶酸、VitB12，继续观察3周；6周时统一处死动物，取腹主动脉，制备主动脉血管环，比较M+0组与M+F组及C组主动脉血管对Ach的最大舒张反应。同时，对3组高同型半胱氨酸血症形成过程中0周、3周、6周时血清中Hcy、ET-1、Ang-II、NO2ˉ/NO3ˉ、NOS各指标及处死动物时局部血管组织中ET-1、Ang-II、NO2ˉ/NO3ˉ、NOS指标进行检测并进行比较。 结果： （1）M+0组主动脉血管对Ach的最大舒张反应性(Emax=26.73±4.51)低于M+F组（Emax=47.84±5.62, P<0.05）及control组（Emax=56.42±7.82， P＜0.05）；(2) 3周时，M+0组及M+F组血清中Hcy、ET-1、Ang-II各指标均明显高于对照组及0周时（P＜0.05）；NO2ˉ/NO3ˉ、NOS明显低于对照组及0周时（P＜0.05）；(3)6 周时，M+0组上述指标继续升高；M+F组血清中Hcy低于 M+0组（P＜0.05）;NO2-/NO3-、NOS高于M+0组（P＜0.05）;ET-1、Ang-II各指标与M+F组无明显差异（P>0.05）。 结论： 高同型半胱氨酸血症对血管内皮最大舒张功能具有明显的抑制作用；其机制可能是通过影响局部血管组织内皮细胞 ET-1、Ang-II、NO的分泌而发挥作用的；早期以叶酸、VitB12干预治疗对血管内皮功能具有一定的拮抗作用。     

同型半胱氨酸诱导PC12细胞凋亡的研究

目的：研究同型半胱氨酸（Hcy）在生理浓度铜离子（10 μmol/L Cu²⁺）作用下能否诱导PC12细胞凋亡及对bcl-2、bax基因表达的影响。 方法: 将细胞随机分成对照组和处理组，采用MTT法检测细胞活力；倒置相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡；半定量RT-PCR分析bcl-2和bax mRNA的表达水平。 结果: 0.125-1.0 mmol/L Hcy在Cu²⁺的作用下可以导致PC12细胞凋亡，具有明显的剂量-效应关系；bcl-2 mRNA表达降低，bax mRNA表达升高，且效应与Hcy浓度相关。 结论: 高浓度Hcy在生理浓度Cu²⁺作用下可诱导PC12细胞凋亡，且凋亡作用与Hcy浓度相关。其机制可能是通过调节bcl-2和bax mRNA的比值起作用的。     

精-甘-天冬-丝氨酸4肽对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨精-甘-天冬-丝氨酸(RGDS) 4肽对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSCs)增殖、凋亡及caspase-3表达的影响。方法: 应用体外HSCs培养技术, 采用[³H]-胸腺嘧啶核苷([³H]-TdR)掺入法测定HSCs增殖;膜联蛋白(Annexin-V)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术、TUNEL、扫描电镜及透射电镜等方法测定HSCs凋亡;采用甲苯胺兰染色方法测定细胞粘附率;应用流式细胞方法测定caspase-3蛋白表达。结果: ①25 mg·L^-1、50mg·L^-1、100mg·L^-1浓度RGDS 4肽剂量、时间依赖性抑制HSCs增殖, P＜0.01。②RGDS 4肽对HSCs凋亡的诱导作用亦呈剂量和时间依赖关系, P＜0.01。扫描电镜、透射电镜观察, RGDS 4肽组出现典型的凋亡征象。③RGDS 4肽作用于HSCs 2 h, 25 mg·L^-1、50mg·L^-1、100mg·L^-1组粘附抑制率分别是8.82%、29.41%、45.59%, 而RGES 4肽组的粘附抑制率仅为4.41%, P＜0.01。④RGDS 4肽处理组caspase-3表达明显高于FN、RGES 4肽组。结论: RGDS 4肽剂量和时间依赖性抑制HSCs增殖并诱导其凋亡。RGDS 4肽抑制增殖及诱导凋亡效应, 依赖于caspase-3, 也与其抗粘附作用有关。