同型半胱氨酸诱导PC12细胞凋亡的研究

目的：研究同型半胱氨酸（Hcy）在生理浓度铜离子（10 μmol/L Cu²⁺）作用下能否诱导PC12细胞凋亡及对bcl-2、bax基因表达的影响。 方法: 将细胞随机分成对照组和处理组，采用MTT法检测细胞活力；倒置相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡；半定量RT-PCR分析bcl-2和bax mRNA的表达水平。 结果: 0.125-1.0 mmol/L Hcy在Cu²⁺的作用下可以导致PC12细胞凋亡，具有明显的剂量-效应关系；bcl-2 mRNA表达降低，bax mRNA表达升高，且效应与Hcy浓度相关。 结论: 高浓度Hcy在生理浓度Cu²⁺作用下可诱导PC12细胞凋亡，且凋亡作用与Hcy浓度相关。其机制可能是通过调节bcl-2和bax mRNA的比值起作用的。     

精-甘-天冬-丝氨酸4肽对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨精-甘-天冬-丝氨酸(RGDS) 4肽对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSCs)增殖、凋亡及caspase-3表达的影响。方法: 应用体外HSCs培养技术, 采用[³H]-胸腺嘧啶核苷([³H]-TdR)掺入法测定HSCs增殖;膜联蛋白(Annexin-V)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术、TUNEL、扫描电镜及透射电镜等方法测定HSCs凋亡;采用甲苯胺兰染色方法测定细胞粘附率;应用流式细胞方法测定caspase-3蛋白表达。结果: ①25 mg·L^-1、50mg·L^-1、100mg·L^-1浓度RGDS 4肽剂量、时间依赖性抑制HSCs增殖, P＜0.01。②RGDS 4肽对HSCs凋亡的诱导作用亦呈剂量和时间依赖关系, P＜0.01。扫描电镜、透射电镜观察, RGDS 4肽组出现典型的凋亡征象。③RGDS 4肽作用于HSCs 2 h, 25 mg·L^-1、50mg·L^-1、100mg·L^-1组粘附抑制率分别是8.82%、29.41%、45.59%, 而RGES 4肽组的粘附抑制率仅为4.41%, P＜0.01。④RGDS 4肽处理组caspase-3表达明显高于FN、RGES 4肽组。结论: RGDS 4肽剂量和时间依赖性抑制HSCs增殖并诱导其凋亡。RGDS 4肽抑制增殖及诱导凋亡效应, 依赖于caspase-3, 也与其抗粘附作用有关。     

谷氨酸诱导海马神经元凋亡涉及线粒体释放细胞色素C

目的：建立体外谷氨酸诱导神经元兴奋损伤模型，探索其凋亡发生是否通过线粒体信号转导途径介导的细胞色素C（Cyt C）释放而实现，为今后干预性使用神经保护剂提供依据。方法:分离及培养新生Wistar大鼠海马神经元，选用合适谷氨酸浓度建立神经元损伤模型；利用LDH测定及流式细胞仪Annexin V/PI双染色法检测谷氨酸暴露后不同时点神经元凋亡及坏死的动态改变；采用Western blotting法检测caspase-3活性及线粒体内和胞浆内Cyt C水平动态变化。结果:谷氨酸诱导神经元损伤呈明显浓度及时间依赖性，50 μmol/L浓度可使LDH释放量明显增加 (18.4%,P<0.05)，暴露后6 h凋亡率显著增加；凋亡发生前，神经元caspase-3活性已明显增高（3 h），6 h达高峰；线粒体Cyt C释放发生在caspase-3增高前，30 min时胞浆内Cyt C水平即明显增加（P<0.05），3 h胞浆内Cyt C水平超过线粒体内，而线粒体内Cyt C水平进行性减少。结论:50 μmol/L谷氨酸可诱导海马神经元凋亡，凋亡机制可能是通过损伤线粒体膜，使Cyt C易位释放入胞浆激活caspase级联反应而致。     

Caspase 3抑制剂抑制羟基喜树碱对人乳腺癌Bcap37细胞NF-κB的激活

目的： 探讨caspase 3抑制剂Ac-DEVD-CHO对caspase 3和NF-κB信号转导途径的影响。方法:采用MTT法测定细胞的增殖活力，琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡，流式细胞仪进行细胞周期分析，Western blotting和DIG-EMSA研究细胞凋亡途径。结果:Caspase 3抑制剂Ac-DEVD-CHO可抑制羟基喜树碱(HCPT)对Bcap-37诱导的凋亡，抑制Pro-caspase 3的裂解，并能抑制IκBα 蛋白降解，阻止NF-κB活化。结论:Caspase 3抑制剂Ac-DEVD-CHO除特异性抑制Pro-caspase 3的裂解外，还可以抑制HCPT对Bcap37细胞NF-κB的活化。     

经颅重复针刺法结合认知康复训练对血管性痴呆患者的疗效及对Hcy水平的影响

摘要 ：目的：观察经颅重复针刺法结合认知康复训练治疗血管性痴呆患者的临床疗效及对同型半胱氨酸（Hcy）的影响。方法：将60例符合研究范围患者随机分为观察组30例和对照组30例,观察组采用经颅重复针刺法结合认知康复训练,对照组采用常规针刺法,两组均予以基础治疗,于治疗4周前、后比较MMSE,VaDAS-Cog量表、BADL量表评分的变化,并行血清Hcy水平检测。结果：治疗后,观察组总有效率86.66%,优于对照组63.33%,差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者MMSE评分提高、VaDAS-Cog评分降低、BADL评分,血清Hcy浓度下降,且观察组各项结果优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：经颅重复针刺法结合认知康复训练对血管性痴呆伴同型半胱氨酸异常升高患者的认知功能、基本生活能力及血清Hcy浓度有明显改善,效果优于常规针刺治疗。     

维生素B12联合叶酸治疗缺血性脑卒中的疗效及对血浆Hcy水平的影响

目的：探讨维生素B12联合叶酸治疗缺血性脑卒中的临床疗效及对血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平的影响。方法：选取2020年7月至2022年3月三门峡市中心医院收治的缺血性脑卒中患者136例为研究对象,依据治疗方式不同分为常规组（66例）和联合组（70例）,常规组患者接受缺血性脑血管病的规范化治疗,联合组在常规组基础上服用维生素B12片和叶酸片,两组患者均治疗4周,比较治疗前后两组患者的血浆Hcy、叶酸和维生素B12水平,神经功能缺损量表（NIHSS）和日常生活活动能力评定量表（ADL）评分,并记录随访期内的脑卒中事件复发情况。结果：两组患者治疗前血浆Hcy、叶酸、维生素B12水平、NIHSS、ADL评分比较,差异均无统计学意义（P> 0.05）,治疗后联合组血浆Hcy水平低于常规组,血浆叶酸和维生素B12水平高于常规组,差异具有统计学意义（P <0.05）。治疗后联合组患者ADL评分高于常规组,NIHSS评分低于常规组,差异具有统计学意义（P <0.05）。随访期间联合组患者复发率为6.67%,低于常规组的26.67%,差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：在...     

血清CRP、Hcy、血脂水平与冠心病并发缺血性脑卒中的相关性

目的探讨血清C反应蛋白(CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)、血脂水平与冠心病并发缺血性脑卒中的相关性。方法选取2018年4月至2019年6月本院收治的冠心病并发缺血性脑卒中患者74例为研究组,单纯冠心病患者74例为对照组。问卷调查方式收集患者性别、年龄、合并高血压情况,冠状动脉造影检查左前降支长度和冠脉病变程度Gensini积分,颈部超声检查显示颈动脉斑块情况。抽取患者清晨空腹肘静脉血4 ml,检测血清CRP、Hcy、血脂水平。结果研究组患者高血压比例明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。研究组患者血清CRP(8.26±2.04)mg/L、Hcy(24.71±5.28)μmol/L、LDL-C(3.27±0.59)mmol/L水平明显高于对照组,HDL-C(0.96±0.14)mmol/L水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,高血压、CRP、Hcy、LDL-C是冠心病并发缺血性脑卒中的独立影响因素(均P<0.05)。结论冠心病患者血清CRP、Hcy、LDL-C水平升高是并发缺血性脑卒中的危险因素,同时应积极控制血压,降低缺血性脑卒中的发生风险。     

大剂量乙酰半胱氨酸联合汉防己甲素治疗尘肺病的随机对照临床试验

  目的  评价大剂量乙酰半胱氨酸联合汉防己甲素治疗尘肺病的临床疗效和安全性。
  方法  将尘肺病患者随机分为对照组（n=57）和试验组（n=57）。对照组:给予对症支持治疗,发生呼吸系统感染时,给予抗感染治疗。试验组:在对照组的基础上给予口服乙酰半胱氨酸泡腾片及汉防己甲素片治疗,疗程24周。
  结果  治疗24周后试验组有咳嗽、咳痰、气促、胸痛等症状的患者比例明显低于对照组（P < 0.05）。治疗12周及24周后,对照组患者第一秒用力呼气量（FEV₁）、第一秒用力呼气量占用力肺活量的百分比（FEV₁/FVC）、用力肺活量（FVC）均较治疗前下降（P < 0.05）,试验组患者FEV₁、FEV₁/FVC及FVC较治疗前无变化（P > 0.05）,表明试验组疗效好于对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）。在不同治疗期内,试验组新发呼吸系统感染率均低于对照组（P < 0.05）。试验组有1例患者出现皮肤色素沉着,不良反应率为1.75%。
  结论  大剂量乙酰半胱氨酸联合汉防己甲素可有效改善尘肺病患者临床症状,维持肺通气功能,减少新发呼吸系统感染率,不良反应少,为一种安全有效的治疗措施,值得临床推广使用。
     

菏泽地区新生儿甲基丙二酸血症的 筛查及基因突变分析

目的 分析甲基丙二酸血症(MMA)患儿的临床表型、基因突变类型以及不同类型治疗效果,为该病的产前诊断提供科学依据。方法 利用串联质谱技术对菏泽市2015年5月-2019年12月出生的210 319名新生儿进行筛查,结合尿气相色谱质谱检测及二代测序技术,将确诊的88例患儿分为单纯型MMA患儿和MMA合并同型半胱氨酸血症,进行相应治疗,并采用配对样本t检验对患儿治疗前后进行比较分析。结果 88例MMA患儿中79例为MMA合并同型半胱氨酸血症,9例为单纯型MMA,49例患儿行基因测序,其中MUT基因突变位点13个,包括3个未报道突变:c.389G>A:1963C>T、c.2009G>T、c.1233_1235delCAT;MMACHA基因突变位点20个,包括5个未报道突变:c.481C>T、c.568dupT、c.57delT、c.471G>A、c.IVS2+149C>T。78例MMA合并同型半胱氨酸血症患儿治疗后较治疗前血中丙酰肉碱(C3)值和尿中甲基丙二酸值显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 新生儿遗传代谢病筛查能对MMA早发现、早诊断、早治疗,并降低其死亡率和致残率。基因检测有助于MMA分型诊治,不同基因型的临床表型以及对治疗反应不同。新发突变位点,不仅丰富了我国MMA患儿基因突变谱,而且为先证者家系提供产前诊断。     

自发性高血压大鼠应用卡托普利加左旋精氨酸、牛磺酸的实验研究

目的：为研究左旋精氨酸、牛磺酸、卡托普利三药合用对自发性高血压大鼠的血压、血脂以及同同型半胱氨酸的影响。方法：用酶法测血脂,用高效液相色谱法测血浆HCY,在大鼠清醒状态下,测鼠尾的尾动脉收缩压,观察两组自发性高血压大鼠（卡托普利单用组,左旋精氨酸＋牛磺酸＋卡托普利三药合用组）在用药前后各指标的变化。结果：①经过四周药物治疗,合用组血压下隆比卡托普利组明显（P＜0.01）。②卡托普利组血脂无降低（P＞0.05）。合用组TC和TG均降低,（P＜0.005)。③两组HCY均下降。用药前,大鼠血压高低与血浆HCY的浓度无相关性（P＞0.05）,用药后,血压的下降与血浆HCY浓度的变化无相关性（P＞0.05）。结论：①卡托普利与有氨酸、牛磺酸合用对血压、血脂的控制比单用卡托普利。②血压的下降与同型半胱氨酸的下降无相关性（P＞0.05）。