原位PCR和免疫组化检测垂体腺癌P16基因

目的研究人垂体腺瘤P16基因的改变,同时探索原位PCR技术的适宜条件和结果确认,以及用于基因缺失检测的可行性。方法原位PCR和免疫组化技术。结界绝大部分间质细胞为P16蛋白免疫组化阴性,而一部分垂体肿瘤细胞呈P16阳性;针对P16基因的原位PCR信号则可见于垂体肿瘤细胞和间质细胞等各种细胞,即P16组化阴性的细胞同样表明有P16基因存在。结论原位PCR可以是P16基因研究的一种有效手段,提示垂体腺癌的P16基因改变形式可能主要是表达过度而不是基因缺失。     

DNA测序建立甘肃当归、大黄种子rRNA基因图谱的研究

目的：对甘肃地道性中药材当归、大黄种子中rRNA基因内转录间隔区进行碱基序列测定，以期建立从分子水平对中草药种子进行鉴定的一种新方法。方法：提取当归、大黄种子中核DNA，利用特异性引物对其rRNA基因内转录间隔区进行套式PCR扩增，并将扩增产物进行碱基序列测定。结果：经琼脂糖凝胶电泳证实：以上述方法可获得当归、大黄种子DNA中rRNA基因内转录间隔区PCR扩增产物；并经测序后得到了当归、大黄种子rRNA基因内转录间隔区的碱基序列，且具有明显的差异和可对比性。结论：不同植物性中药材种子rRNA基因内转录间隔区碱基序列可做为从分子水平进行鉴定的标记。     

小鼠胚泡着床相关基因的差减筛选

目的:筛选新的小鼠胚泡着床相关基因。方法:对孕4.5 d小鼠着床和非着床位点的子宫内膜组织进行PCR差减。获得了2个新的在小鼠胚泡着床位点高表达的EST(EST8和EST81)。结果:EST8在孕4.5 d小鼠着床位点、肝脏中表达较高,在非着床位点和卵巢中亦有微量表达。EST81主要在孕4.5 d小鼠子宫着床组织和卵巢中表达,其它各种组织中也有微量表达。用PCR方法获得了相应的全长。cDNA,长度分别为1665bp和1364bp。结论:用差减筛选获得的两种cDNA是孕小鼠着床相关基因,其功能有待进一步研究。     

实时荧光定量PCR在肿瘤研究中的应用

聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的出现使得人们对微量甚至单个细胞DNA的分析成为可能,并且显示出了前所未有的敏感性和特异性.但开始阶段PCR只局限于对DNA的定性研究,随着科技的发展,定量PCR应运而生.然而,所谓的"定量PCR",其精确性与特异性也不是绝对的,直到实时荧光定量PCR(quantitative real timePCR)的出现,人们才真正在技术上实现了PCR从定性到定量的飞跃.本文试就其原理、特点、在肿瘤研究中的应用及其发展前景作一简要叙述.     

92例急性盆腔炎临床分析

我院自1998—2002年对门诊及住院的急性盆腔炎的患者其中的92例，为进一步了解女性泌尿生殖淋球菌、沙眼衣原体、支原体以及各种细菌感染与盆腔炎的关系，我们对此部分患者的宫颈分泌物和腹腔液应用PCR和细菌培养方法，进行细菌检测，同时对病原体及各种感染情况做了调查，现报道如下：     

端粒酶活性与宫颈癌相关性研究

端粒酶是一种特殊的DNA聚合酶 ,它通过以自身为模板 ,逆转录合成端粒中重复DNA序列 ,维持端粒长度 ,以保持细胞的存活。端粒酶的激活或表达在恶性肿瘤的发生中起重要作用 ,目前倍受众多学者重视。本文就宫颈癌与端粒酶活性的关系及与淋巴结转移的相关性进行研究。1　材料与方法1.1　临床资料　标本来源于 1977～ 1999年白求恩医科大学第二临床学院妇产科手术病人标本 (用液氮保存 )。对照组 :30例正常宫颈组织 ;实验组 :35例宫颈慢性炎症、38例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)、5 2例宫颈癌 (其中 19例淋巴结有转移 )。诊断依据《妇产科学》第…     

血肺炎支原体PCR检测在支原体肺炎诊断中的应用

本文对１６８例疑似支原体肺炎患儿抽血进行肺炎支原体ＰＣＲ检测及冷凝集试验，结果ＰＣＲ阳性５９例（３５．３％）冷凝集试验阳性３８例（２２．８％）两者均阳性２８例（１６．７％）ＰＣＲ和／或冷凝集试验阳性６９例（４１．３），比较〈５岁与≥５岁两个年龄组，ＰＣＲ阳性率与冷凝集试验阳性均有显著性差异，在ＰＣＲ阳性病例中，冷凝集试验阳率在两个年龄组间有显著差异，而在冷凝集试验阳性病例中，ＰＣＲ阳性率在两个年龄     

应用PCR和斑点杂交试验检测急性淋巴细胞白血病微小残瘤病

应用ＰＣＲ和斑点杂交试验检测３５例儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）ＩｇＨ和ＴｃＲｒ基因重排，并对９例完全缓解期患儿进行了微小残留病（ＭＲＤ）动态监测，结果表明，双基因标记检查较单一基因检测ＭＲＤ更具优越性，可降低假阴性率，有利于临床预知疾病意义。