2014－2018年浙江省江山市中老年HIV/AIDS的HIV-1亚型和分子簇特征研究

目的了解浙江省江山市中老年人类免疫缺陷病毒感染者和艾滋病患者（HIV/AIDS）的HIV亚型分布情况和分子传播簇特征,为该市HIV流行趋势分析和疫情防控提供技术支持。方法对江山市2014 — 2018年新诊断的中老年HIV/AIDS开展分子流行病学研究,从94例感染者（含3例暗娼）血浆中提取RNA,通过反转录–聚合酶链式反应和巢式PCR扩增pol区基因并进行核酸测序,运用MEGA 6.0软件构建Neighbor-Joining系统进化树分析亚型,利用Cytoscape 3.6.0软件对遗传距离≤0.01的序列构建HIV分子簇。结果HIV毒株序列成功获得率为86.2%（81/94）,毒株亚型以CRF01_AE为主（93.8%,76/81）,其余分别为CRF07_BC型3例（3.7%）和B亚型2例（2.5%）;共发现3个分子传播簇,均由CRF01_AE亚型构成,总成簇比例为84.0%（68/81）,大簇包含64例病例（含1例阳性暗娼）,2个小簇均由2例病例组成。结论江山市中老年HIV/AIDS亚型以CRF01_AE为主且种类较为单一,存在与阳性暗娼紧密关联的传播簇,应加强对簇内病例的流行病学调查,以便实施有针对性的公共卫生干预。     

基于CRISPR/Cas蛋白的副溶血弧菌检测方法的研究

目的利用规律间隔性成簇短回文重复序列（CRISPR）免疫原理及Cas12a酶的特点构建一种快速检测副溶血弧菌（VP）的方法,实现对病原菌准确快速的检测和识别。方法本研究通过制备纯化Cas12a蛋白,筛选构建VP的gRNA,建立CRISPR-VP荧光检测系统,根据最终荧光扩增曲线判定CRISPR-VP检测方法的有效性。结果在CRISPR-VP检测方法中只在VP的序列存在时才会产生明显的荧光信号。结论本实验初步建立了基于CRISPR/Cas蛋白的VP的检测方法,为后续简易检测试剂的研制提供理论依据。     

不同类型肠易激综合征患者血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a水平的临床意义

目的探讨不同类型肠易激综合征(IBS)患者血清微小RNA(miRNA)-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平的相关性及临床意义,为IBS的病因学研究提供理论依据。方法采用病例抽样的方法选取2015年10月至2018年6月该院IBS患者110例,选取同期110例体检健康者为健康对照组。受试者采样前12 h低蛋白饮食,每位受试者取10 mL静脉血样本,静脉血3000 r/min离心后取上清。采用实时荧光定量反转录PCR测定受试者miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平。结果混合型IBS的miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平均显著高于其他3种亚型(P<0.05),不确定型IBS的miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平均显著高于便秘型IBS及腹泻型IBS(P<0.05)。混合型、不确定型IBS患者的miRNA-144、miRNA-29a、miRNA-200a的表达水平两两之间均存在相关性且有统计学意义(P<0.05),但对于单纯腹泻或者便秘型IBS患者来说,仅miRNA-29a与miRNA-200a的表达水平存在统计学相关性(P<0.05)。结论混合型、不确定型IBS患者血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达水平较其他2种亚型高,且血清miRNA-144、miRNA-29a和miRNA-200a表达两两之间具有显著相关性。     

基于牡丹皮微观性状与抗炎活性相关的“辨状论质”研究

目的：基于牡丹皮显微特征（簇晶）与药效的相关性,通过数据支持揭示“辨状论质”理论的科学性,为中药的质量评价提供科学依据。方法：采用现代显微鉴别方法对牡丹皮中的簇晶进行定性定量测定;建立炎症小鼠模型,研究牡丹皮的抗炎活性;所得实验数据用SPSS统计软件处理,进行相关性研究。结果：牡丹皮簇晶的显微特征指数与牡丹皮抗炎药效有显著的相关性,呈中、正相关;产自山东青岛的牡丹皮药材中簇晶的显微特征指数明显高于其他来源药材,其抗炎活性也较其他来源的牡丹皮显著。结论：牡丹皮微观性状（簇晶）可作为评价牡丹皮药材品质优劣的标准。     

青少年多形性低级别神经上皮肿瘤的临床病理及分子特征研究(附10例临床病例报告)

目的 分析青少年多形性低级别神经上皮肿瘤(PLNTY)的临床病理特征和分子改变,为临床诊断及治疗提供理论基础和科学依据.方法 收集2015至2020年于复旦大学附属华山医院病理科诊断的组织学无法进一步归类的低级别神经上皮肿瘤病例,收集临床病史、影像学和组织病理学资料,筛选符合PLNTY特征的儿童及青少年患者,进一步分析...     

慢性支气管炎患者急性期和缓解期T淋巴细胞亚群的变化

淋巴细胞是人体免疫系统的重要组成部分[1],它们不仅具有识别抗原和排除抗原的能力,而且对免疫应答起重要调节作用.我们对慢性支气管炎急性发作期患者外周血淋巴细胞的主要白细胞分化抗原(CD)进行检测,观察T淋巴细胞亚群的变化,分析患者细胞免疫和体液免疫功能的改变,以探讨慢性支气管炎病原学与临床特点、细胞免疫的关系,为临床治疗提供实验依据.     

ATG7、FIP200在口腔癌中的研究进展

自噬(autophagy)是一种细胞分解代谢过程,可以通过溶酶体降解系统维持细胞内稳态.自噬相关基因7(autophagy related gene 7,ATG7)、200 kDa 的家族相互作用蛋白(family interacting protein of 200 kDa,FIP200)与自噬关系密切,并具有调控自...     

ROS介导的自噬在心血管疾病中的作用

心血管疾病是一类严重危害人类健康的重大疾病。活性氧簇（ROS）既可引起氧化应激反应直接参与心血管疾病的发生，又可诱导自噬的启动，而贯穿于心血管疾病的始终。本文就ROS与自噬的作用以及ROS介导的自噬在动脉粥样硬化、心肌缺血/再灌注损伤及心力衰竭中的作用进行阐述，以期为临床心血管疾病的防治提供新思路。     

MicroRNA-200b在吉西他滨诱导的胰腺癌细胞株MiaPaCa-2上皮间质转化中的作用

目的 探讨MicroRNA-200b (miR-200b)在吉西他滨诱导的胰腺癌MiaPaCa-2细胞上皮间质转化(EMT)过程中的作用.方法 应用不同浓度的吉西他滨诱导MiaPaCa-2细胞,选择50％细胞生长抑制时的药物浓度(IC50),获取耐药MiaPaCa-2细胞.采用脂质体法将miR-200b和无意义小分子片段(阴性对照)分别转染MiaPaCa-2细胞,再用IC50的吉西他滨诱导细胞,获取转染miR-200b的耐药MiaPaCa-2细胞及阴性对照的耐药MiaPaCa-2细胞.倒置显微镜下观察细胞形态变化;Transwell小室测定细胞侵袭能力;实时定量PCR检测细胞miR-200b表达;蛋白质印迹法检测细胞E-cadherin、Vimentin、Zeb1、Zeb2蛋白表达.结果 吉西他滨处理后细胞体积逐渐缩小,呈纺锤样,细胞间连接减少,伪足增多,呈现间质细胞特征.耐药MiaPaCa-2细胞的穿膜数从亲本细胞的(26±3)个上升至(85±6)个,Vimentin、Zeb1、Zeb2表达分别上升至亲本细胞的(1.87±0.17)、(2.57±0.21)、(5.24±0.83)倍,miR-200b表达下降至亲本细胞的(0.36±0.01)倍,E-cadherin表达下降至亲本细胞的(0.47±0.05)倍.而转染miR-200b的耐药MiaPaCa-2细胞的穿膜数下降至(42±4)个,Zeb1、Zeb2表达下降至阴性对照的耐药MiaPaCa-2细胞的(0.36±0.07)、(0.08±0.01)倍.结论 吉西他滨诱导胰腺癌MiaPaCa-2细胞过程中细胞出现EMT,其机制可能与miR-200b表达下调有关.     

槐杞黄颗粒对糖尿病肾病大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制

【目的】观察槐杞黄颗粒对糖尿病肾病（DKD）大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制。【方法】（1）体内实验：采用高脂肪饲料喂养结合链脲佐菌素（STZ）腹腔注射法构建DKD大鼠模型。实验设正常组,模型组,槐杞黄颗粒低、中、高剂量组及氯沙坦组,每组10只大鼠。给予对应处理后,测定尿微量白蛋白、空腹血糖、血清肌酐、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等主要生化指标,分别采用苏木素-伊红（HE）染色、高碘酸希夫（PAS）染色和马松（Masson）染色观察肾组织病理改变。（2）体外实验：构建高糖诱导肾小管上皮细胞HK2模型。实验分为正常糖组、高糖组和槐杞黄颗粒组及甘露醇组。给予对应处理后,MTT法检测细胞增殖情况,采用2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）法和MitoSOX/Hoechst 33342染色法分别检测细胞内、线粒体活性氧簇（ROS）的生成,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测炎症小体相关蛋白NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解型半胱天冬酶3(cleaved-Caspase-3)和白细胞介素1β(IL-1β)及肾纤维化相关蛋白纤维连接蛋白（FN）和Ⅳ型胶原蛋白（ColⅣ）...