大蒜新素对人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞凋亡的影响

目的 研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fas mRNA表达的影响。方法 用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2．5、0．25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96h凋亡细胞比率；大、中、小剂量大蒜新素(9、6和3μg／mL)处理正常的和感染的HELF细胞(MOI为2．5)后上述各时间点凋亡细胞比率。用原位杂交法检测大剂量大蒜新素处理感染细胞(MIO为0．25)72h后bcl-2和fas mRNA表达强度变化，并与正常细胞和感染细胞对比分析。结果 正常细胞凋亡比率保持恒定低水平(凋亡率平均2．68％)；低、高感染复数感染细胞随时间延长凋亡细胞逐渐增多，凋亡率峰值分别达8．85％(96h)和25．63％(72h)；各剂量大蒜新素处理的正常细胞凋亡率增加，呈剂量依赖性，峰值分别为4．88％、6．47％和8．35％；但各剂量药物处理感染细胞后却使细胞凋亡比率下降，大剂量药物处理72h时效应最为明显，凋亡细胞比率由25．63％降至16．24％。正常细胞高表达bcl-2，低表达fas基因；感染HCMV后，bcl-2表达显著下调，fas表达明显增强；大蒜新素处理感染细胞后使bcl-2表达强度明显高于感染细胞，fas表达水平明显低于感染细胞，但仍未恢复到正常细胞水平。结论HCMV是HELF凋亡的强诱导剂；病毒可通过下调凋亡抑制基因bcl-2和上调凋亡促进基因fas而发挥致凋亡作用。大蒜新素本身可诱导HELF凋亡，但却能明显抑制HCMV诱导的细胞凋亡，其抑制作用可能与药物干扰HCMV影响凋亡调控基因bcl-2和fas表达有关。     

吐烟花化学成分研究

吐烟花是荨麻科吐烟花属植物Pellionia reports(Lour．)Merr．，分布于海南、广东、云南等地。在对云南民间抗癌中草药筛选工作中发现其95％乙醇提取物有一定的诱导细胞凋亡作用。本研究主要报道从粗提取物的氯仿层分离得到4个化合物，分别确定为β-谷甾醇(β—stiosterol，Ⅰ)、羽扇豆酮(1upeone，Ⅱ)、羽扇豆醇(1upeol，Ⅲ)和3-羟基-2-苯胺酰基-4-偶氮基苯基萘(Ⅳ)，以上化合物均为从该种植物首次分离得到。     

常见舌苔舌上皮细胞凋亡与bax、bc1-2基因表达关系的研究

目的：研究舌苔厚度变化与舌上皮细胞凋亡、bax、bel-2mRNA和蛋白质表达的关系。方法：运用TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记)技术、原位杂交、免疫组化和图像分析技术。结果：与正常薄苔比较，剥苔bax基因过度表达伴随细胞凋亡增多，而厚苔bax基因低表达伴随细胞凋亡减少。bax基因表达水平变化趋势与细胞凋亡水平变化趋势一致。在各组舌苔中均未检测到bcl-2基因表达。结论：bax基因表达水平的变化可能是影响舌苔上皮细胞凋亡并导致舌苔厚度变化的重要原因。     

舌苔形成机制的现代研究进展

望舌苔是中医舌诊的重要组成部分之一，近代对舌苔的研究所涉及的领域越来越广，其目的是通过现代医学手段使舌苔诊断客观化、定量化、标准化和规范化。本支就10年来有关舌苔形成机制研究的相关文献进行分析，分别从舌苔形成的形态学；生物化学；血液流变学；表皮生长因子：细胞凋亡：促凋亡基因以及神经、内分泌、免疫调节网络等方面的研究进行了综述。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对缺血再灌注损伤大鼠心肌脂质过氧化及细胞凋亡的影响

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对缺血再灌注损伤大鼠心肌脂质过氧化及细胞凋亡的影响。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支30min后，松开结扎恢复灌流613min。实验结束后，取一部分左室心肌制成10％匀浆，测定SOD水平及MDA含量；另一部分心肌用4％多聚甲醛固定后切片，用TUNEL法测定凋亡细胞指数(AI)，用SABC法检测Bax和Bcl-2基因的阳性蛋白表达指数(PEI)。实验分假手术组、缺血再灌注损伤组(IRI)、EGCG治疗组(10mg/kg与20mg/kg)和丹参对照治疗组(1．0g/kg)。结果：(1)IRI组心肌组织SOD水平较假手术组明显降低，而MDA含量则明显升高。与IRI组比，EGCG和丹参能显著提高SOD水平，并显著降低MDA含量，且EGCG 20mg/kg的作用强于EGCG 10mg/kg，与丹参相当。(2)与假手术组比，IRI组的AI值显著增加，Bcl-2及Bax的PEI值亦显著增加，但Bcl-2／Bax值却显著降低。与IRI组比，EGCG组的AI值明显降低。并显著降低Bax的唧值，明显提高Bcl-2的PEI值及Bcl-2／Bax值。结论：EGCG通过抑制脂质过氧化反应及细胞凋亡。对缺血再灌注损伤心肌产生保护作用。     

尼美舒利对食管癌细胞株ECa-109端粒酶活性的影响

目的：研究特异性COX-2抑制剂尼美舒利对食管癌细胞株ECa109端粒酶活性和凋亡的影响，为特异性COX-2抑制剂运用于食管癌的防治提供新的理论依据。方法：采用人食管癌细胞株ECa109作为研究对象，体外药物敏感实验(MTT)检测不同浓度和作用时间的尼美舒利对细胞的增殖抑制效应和凋亡的影响，用PCR-ELSIA半定量法检测细胞端粒酶活性。结果：尼美舒利对人食管癌细胞株的杀伤率和诱导细胞产生凋亡的强弱具有时间和计量依赖性，同时能显著抑制细胞的端粒酶活性，并呈计量依赖关系。结论：尼美舒利能抑制食管癌细胞株ECa109的端粒酶活性，从而促进细胞凋亡，产生抗肿瘤的作用。     

大蒜素对脑出血大鼠细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨脑出血大鼠血肿周边组织细胞凋亡的变化规律;观察大蒜素治疗对血肿周边组织细胞凋亡的影响及可能机制。方法将90只 Wistar 大鼠随机分成对照组、脑出血组及大蒜素组;脑出血组和大蒜素组又分为6h 及1、3、7天几个时相点。脑出血动物模型采用立体定位技术及“二次注血,二次退针”方法,将50μl 自体血注入大鼠尾状核;对照组只进针不注血。大蒜素组给予大蒜素注射液0.2mg/100g 体重,股静脉注射,于造型成功即刻及每日1次;TdT 介导的 dUTP 缺口末端标记法检测 TUNEL 阳性细胞的表达;免疫组化二步法测 Caspase-3 IR 细胞。结果 (1)脑出血组血肿周边 TUNEL 阳性细胞表达显著高于对照组,于3天时达高峰(P<0.01);Caspase-3IR 细胞出现较早,于造模后6h 即显著增高,1天达高峰(P<0.01);(2)大蒜素组治疗后 TUNEL 阳性细胞、Caspase-3IR 细胞表达显著降低(P<0.05)。结论脑出血后血肿周边组织出现凋亡性损伤,大蒜素治疗可减轻出血性细胞凋亡,其机制可能与大蒜素抑制 Caspase-3蛋白表达有关。     

化痰散结方对人肺癌细胞Fas-FasL和TNFR1信号通路的影响

目的观察化痰散结方含药血清,对人肺癌 SPC-A1细胞 Fas-FasL 和 TNFR1的表达的影响。方法通过血清药理学方法,选择不同浓度的含化痰散结方的兔血清,与人肺癌细胞 SPC-A1共同孵育不同时间后,应用倒置相差显微镜对细胞生长和凋亡状况进行形态学观察,应用 SABC 法检测 SPC-A1细胞 Fas 和FasL 的表达。用原位杂交方法检测 SPC-A1细胞 TNFR1的表达。结果人肺癌细胞经含化痰散结方的兔血清作用后,由贴壁生长而逐渐脱落,外形变圆,体积缩小,折光性增加;SABC 法显示,化痰散结方含药血清可上调 SPC-A1细胞 Fas(P<0.05),而且可下调 SPC-A1细胞 FasL 的表达(P<0.05)。原位杂交方法显示,含药血清组 SPc-A1细胞 TNFR1的表达明显高于不含药血清组(P<0.01)。结论化痰散结方含药血清可诱导人肺癌细胞凋亡,其机制可能与上调 SPC-A1细胞 Fas、下调其 FasL 以及上调 TNFR1有关。     

小鼠光气染毒对肺脏细胞的凋亡作用

背景与目的:小鼠原代肺Ⅱ型细胞的分离、培养方法的建立,探讨光气对肺水肿小鼠的肺脏细胞凋亡的诱导作用.材料与方法:12只二级BALB/c小鼠,雄性,随机分为2组:正常对照组(6只)和染毒组(6只).正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9 mg/L剂量的光气,时间为5 min.染毒后4 h,分离、培养肺Ⅱ型细胞,电镜观察两组小鼠肺Ⅱ型细胞、肺Ⅰ型细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和纤毛细胞凋亡情况.结果:单宁酸染色和电镜鉴定培养细胞为小鼠原代肺Ⅱ型细胞;小鼠给予11.9 mg/L的光气染毒5 min,电镜显示光气染毒肺水肿小鼠原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体,肺Ⅱ型细胞核染色质呈现月牙型,嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和纤毛细胞均出现凋亡征象.结论:建立了小鼠原代肺Ⅱ型细胞的分离、培养方法,证明光气染毒可造成肺水肿小鼠肺脏细胞发生凋亡.     

BRM释介素体外抑瘤作用与诱导癌细胞凋亡

背景与目的:BRM释介素在临床上对一些肿瘤有一定疗效,但其机理仍不清楚.本研究旨在探讨中药复方胶囊BRM释介素诱导人神经胶质瘤细胞株SHG-44,人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡作用,及其抗肿瘤作用的机理.方法:运用MTT法检测BRM释介素体外对人癌细胞株的抑制作用;应用电镜、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪分析、琼脂糖凝胶电泳观察BRM释介素诱导SHG-44,MCF-7细胞发生凋亡的作用.结果:BRM释介素体外对SHG-44,MCF-7,PANC1细胞具有明显的抑制作用,IC50值分别为0.299 mg/ml,1.853 mg/ml和9.416 mg/ml.SHG-44和MCF-7在BRM水提液(2.5 mg)作用下发生细胞凋亡,表现为细胞固缩、核染色质靠边,出现马蹄形,半月形.Annexin V-FITC/PI流式细胞仪分析,BRM(0.625～2.5 mg)作用14～48h,凋亡细胞明显增多.BRM水提液(1.25～5 mg)作用24或48 h,细胞DNA裂解片段呈典型的梯带.结论:BRM释介素的抗肿瘤活性与诱导细胞凋亡有关.