大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡caspase-3活性变化规律及药物对其影响

目的　探讨大鼠心肌缺血再灌注 (Ischemiareperfusion ,IR)不同时相的心肌细胞凋亡、caspase 3活性变化规律及caspase 3抑制剂Ac DEVD CHO的影响。方法　Wistar大鼠 12 2只 ,设立IR组 ,IR +Ac DEVD CHO组和假手术对照组并分设缺血 3 0min后再灌注 1、3、6、12、2 4h 5个时相点 ;以缺口末端标记法 (TUNEL)标记凋亡细胞 ,用荧光分析法检测caspase 3活性 ,行TTC染色测定心肌梗死范围。结果　心肌细胞凋亡与caspase 3活性随心肌再灌注不同时相而变化 ,心肌细胞凋亡指数 (Apoptosisindex ,AI)与caspase 3活性于再灌注 12h最高 [AI :( 3 4 83± 9 3 5 ) % ;caspase 3活性 :( 1 3 4±0 2 ) ] ,其后基本维持在平台状态 ;心肌梗死范围随IR时间逐渐增加 ,至 2 4h仍未见下降趋势 ,三者间呈显著正相关 (P <0 0 5 )。IR +Ac DEVD CHO组上述指标虽也明显增高 ,但比IR组明显减小 (P <0 0 5 )。结论　Caspase 3激活及心肌细胞凋亡参与了心肌缺血再灌注损伤过程 ,Ac DEVD CHO减轻心肌缺血再灌注损伤可能部分与其抑制心肌细胞凋亡有关。     

脑源性神经营养因子与缺血性脑损伤

脑源性神经营养因子（Brain—derived neurotrophic factor，BDNF）属神经营养因子家族成员，具有维持神经元存活的作用，对缺血性脑损伤有保护作用。本文综述了BDNF的基因定位、组成、分布及其相关受体；BDNF对缺血性脑损伤的保护作用；其保护机制可能包括抑制兴奋性氨基酸的毒性和稳定神经元内Ca^2＋浓度、调节自由基代谢、抑制Caspase-3活性、调节Bax和Bcl-2的表达等。     

角质形成细胞相关基因的研究进展

角质形成细胞是表皮的主要构成细胞，很多皮肤病都有不同程度的角质形成细胞受累，而角质形成细胞受累经常涉及到基凶的变化，目前已知与角质形成细胞相关的基因主要有癌基因、抑癌基因、凋亡调节基因等。     

人骨形成蛋白与肿瘤细胞凋亡

骨形成蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ)最初因其具有诱导骨形成的作用而得名。随着研究的不断深入 ,人们发现它还是一个多功能因子 ,在胚胎发生和发育、组织与细胞的分化和增殖等方面起重要作用。Ｗｏｚｎｅｙ[1] 于 1988年首次报道了人ＢＭＰ 1、ＢＭＰ 2Ａ、ＢＭＰ 2Ｂ和ＢＭＰ 3的ｃＤＮＡ克隆及表达 ,以后相继有 16种不同的人骨形成蛋白ｃＤＮＡ得到克隆。目前国内也已克隆了多种ＢＭＰ亚型的ｃＤＮＡ ,在ＢＭＰ家族中 ,具有较强功能活性者为ＢＭＰ 2、ＢＭＰ 4和ＢＭＰ 7。1　ＢＭＰ的结构特征和理化性质…     

胆管癌组织中Gastrin/CCK受体表达的研究

胃泌素 (Ｇａｓｔｒｉｎ)和胆囊收缩素 (Ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎ ,ＣＣＫ)在进化上来源于单一祖先肽 ,在结构上具有等同的Ｃ端 5肽酰胺活性片段 ,共同组成一激素家族 (Ｇａｓｔｒｉｎ ＣＣＫ族 ) ;而且两者的受体序列也具有同源性 ,其中胃泌素受体与ＣＣＫ Ｂ受体高度同源而统称为Ｇａｓｔｒｉｎ ＣＣＫ Ｂ受体。近 2 0余年来 ,胃泌素和ＣＣＫ作为单纯消化激素的概念发生了巨大变化。研究表明 ,通过Ｇａｓ ｔｒｉｎ ＣＣＫ Ｂ和 (或 )ＣＣＫ Ａ受体 ,Ｇａｓｔｒｉｎ ＣＣＫ对某些消化道肿瘤(包括胆管癌 )的发生发展过程有确切的促进…     

TRAIL胸外段基因克隆及其表达与纯化

目的；克隆TNF相关的诱导凋亡配体胞膜外段基因（the extracellular region of the human TRAIL cDNA,TPAILex），构建表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达有生物学活性的TRAIL蛋白胞膜外段。方法：抗CD3McAb刺激正常人外周血淋巴细胞，用RT－PCR、巢式－PCR方法从活化的淋巴细胞中获得人TRAIL基因及其胞膜外段cDNA，并克隆到pGEM-T Easy载体中，DNA测序鉴定，将TRAIL的胞膜外段基因插入表达载体pGEX-2T，构建重组表达质粒pGEX/TRAILex，用IPTG诱导表达TRAIL蛋白的胞膜外段，GST－Agarose 4B层析柱纯化GST－TRAILex融合蛋白，Western-blot鉴定纯化产物。结果：抗CD3 McAb能诱导正常人外周血核细胞TRAIL的高表达，成功地克隆了TRAIL胞膜外段基因，构建了重组表达载体pGEX/TRAILex，IPTG诱导后得到高效表达的TRAIL蛋白胞膜外段，经12％SDS－PAGE分析，可观察到一分子量和理论值相符（约54kD）的诱导表达。Kodak软件分析表达GST－TRAIL胞膜外段融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的28％，进一步分析证实TRAIL蛋白的胞膜外段主要以可溶性的形式表达，用GST－Agarose 4B层析柱纯化超声破菌后的上清，每升细菌培养液可得到9.8mg纯度的95％以上的GST－Tex。Western-blot结果证实54kD的表达带可与鼠抗TRAIL McAb起特异性反应。结论：成功地克隆了人TRAIL基因，并应用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人TRAIL蛋白的胞膜外段，为进一步研究TRAIL的功能及其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。     

米诺环素对压力作用下体外培养视网膜神经细胞凋亡的抑制

目的 观察米诺环素对压力系统作用下大鼠视网膜神经细胞(RNs)的活性及凋亡的影响，探讨其对受损RNs保护的可能机制。 方法 制备大鼠RNs体外加压培养模型，通过细胞形态学观察、四唑盐（MTT）比色法测定细胞活力、吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色法检测细胞凋亡率等方法观察不同浓度的米诺环素对上述损伤细胞的保护作用，并用免疫细胞化学法观察iNOS和caspase 3表达的改变。 结果 加压培养后RNs与对照组相比形态改变较明显，细胞活力降低，5393%的细胞发生凋亡。20000 μmol/L的米诺环素治疗组则细胞形态改善，活力显著增高，1729%的细胞发生凋亡；免疫细胞化学法显示细胞内iNOS和caspase-3表达较加压损伤组减少。 结论 一定剂量的米诺环素在体外可有效抑制压力引起的大鼠RNs损伤及凋亡；抑制iNOS和caspase-3的表达可能是其潜在作用机制。     

血管内皮生长因子及其受体在单侧输尿管梗阻大鼠术侧肾脏的表达

血管内皮生长因子（VEGF）的主要作用是刺激血管内皮细胞的增殖与分化、抑制内皮细胞凋亡，主要通过两个受体Flk-1和Flt-1发挥作用。本研究旨在明确VEGF及其受体在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠术侧肾脏不同时间的表达变化情况，为进一步探讨其在UUO大鼠小管间质纤维化中的作用机制提供实验依据。     

凋亡抑制因子livin在肝癌组织中的表达及其意义

本实验通过免疫组化SP法研究凋亡抑制因子livin在肝癌组织中的表达情况，探讨其与原发性肝细胞癌（PLC）TNM分期、复发之间的关系。     

白藜芦醇对C6鼠胶质瘤细胞抑制生长和诱导凋亡的作用

白藜芦醇（resveratrol，Res）是一种广泛存在于植物中的植物补体，Res不但可以作为一种抗氧化剂，有防治心血管疾病的功效。而且具有抗炎和抗癌的作用，它可以在肿瘤的起始、发生、进展等各个阶段通过多种途径起到抑制肿瘤的作用。近年来有关胶质瘤的大量研究证实，表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）的基因扩增和过表达是恶性胶质瘤发生、发展的重要始动事件之一，其介导的信号转导通路发挥着关键的作用旧J。本实验进一步就Res对C6鼠脑胶质瘤细胞生长增殖的抑制、诱导细胞凋亡及其与胶质瘤增殖、凋亡相关的EGFR等重要基因变化进行了探讨。