IL—2R缺陷所致X—性联严重联合免疫缺陷病及其基因治疗

人体白介素－２受体γ是链组成中，高亲和力ＩＬ－２Ｒ的重要成员，其基因已被定位于Ｘｑ１３区。遗传学连锁分析提示ＩＬ－２Ｒγ链基因与Ｘ－性联严重免疫缺陷病位点存在于同一位置，并发现Ｘ－ＳＣＩＤ患者扔ＩＬ－２Ｒγ链基因存在突变，从而证明了Ｘ－ＳＣＩＤ与ＩＬ－２Ｒ的γ链缺陷有关。     

Chediak-Higashi综合征一例

患儿　男 ,5岁 ,因反复发热 4个月入院。患儿于 4月前开始出现反复发热 ,有时伴轻微咳嗽 ,无咳痰、咳血等。曾两次于外院就诊 ,诊为“传染性单核细胞增多症”,治疗好转出院。 1月前又出现发热 ,伴流涕 ,不咳 ,无寒颤、头痛、呕吐、抽搐等 ,无关节、肌肉疼痛 ,无出血倾向 ,于院外抗生素治疗效果不佳而入院。患儿系第 1胎第 1产 ,父母非近亲结婚 ,家族中无类似患者及其他遗传病史。入院查体 :发育正常 ,营养良好 ,精神可 ,智力正常 ,全身皮肤阳光暴露部位呈棕黑色 ,并见较多纸屑状局部白化斑 ,无黄染及出血斑点。颈、腹股沟区可扪及花生米大小…     

HIV/HCV合并感染者淋巴细胞活化及第二受体表达的研究

目的了解中国不同疾病进展阶段人类免疫缺陷病毒和丙型肝炎病毒（HIV／HCV）合并感染者T淋巴细胞与自然杀伤细胞（natural killer cells，NK）数量变化及T淋巴细胞活化、受体表达情况，并探讨HCV感染对HIV感染免疫指标及疾病进展的影响。方法应用流式细胞术分析228例不同疾病进展阶段的HIV／HCV合并感染者及101例单纯HIV感染者外周血T淋巴细胞、NK细胞数量及T淋巴细胞活化受体（HLA-DR、CD38）、第二受体（CCR5、CXCR4）表达情况。结果（1）HIV／HCV合并感染组中，CD4^＋T淋巴细胞、NK细胞数量随疾病进展持续下降，其中艾滋病组（AIDS）明显低于无症状HIV感染组（HIV）（P〈0．05），HIV组明显低于长期不进展组（LTNP）（P〈0．01），LTNP组与健康对照组差异无统计学意义。LTNP组、HIV组及AIDS组CD4^＋、CD8^＋T细胞表面活化受体HLA-DR、CD38的表达依次升高，其中各组间CD8／CD38的升高差异均有统计学意义（P〈0．05），AIDS组CD4／HLA-DR、CD8／HLA-DR的升高明显高于LTNP组和HIV组（P〈0．01）。LTNP组、HIV组及AIDS组CD4^＋、CD3^＋T细胞表面CCR5的表达亦依次升高，各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）；CD3^＋T细胞表面CXCR4的表达依次升高，AIDS组明显高于HIV组和LTNP组（P〈0．01）。（2）HIV／HCV合并感染组与单纯HIV感染组相比，AIDS组NK细胞明显下降（P〈0．05），CD4^＋T细胞下降，但无统计学意义，CD4／HLA-DR、CD8／HLA-DR、CD4／CXCR4、CD3／CXCR4明显升高（P〈0．01）；HIV组NK细胞明显下降（P〈0．01），CD4／CXCR4明显升高（P〈0．05）；LTNP组各项指标与单纯HIV感染组相比差异无统计学意义。（3）HIV／HCV合并感染组的HIV病毒载量随疾病进展不断升高，与单纯HIV感染组相比差异无统计学意义；HCV病毒载量在疾病不同阶段差异无统计学意义（P〉0．05）。结论随疾病进展，HIV／HCV合并感染者的免疫功能逐渐下降，HIV病毒载量逐渐升高。与单纯HIV感染相比，合并HCV感染可通过破坏机体天然免疫功能、促进免疫系统活化和受体表达，加速HIV感染的疾病进展。     

中国92例HIV/AIDS患者HIV-1 gp41 2F5和4E10中和抗体表位变异研究

目的 探讨92例HIV/AIDS患者HIV-1病毒近膜端(membrane proximal external re-gion,MPER)中和抗体2F5和4E10保守表位ELDKWA、NWFDIT氨基酸变异特点,为中国HIV/AIDS患者免疫治疗以及疫苗设计提供数据.方法 Nest-PCR扩增HIV-1 env区gp41段基因,核酸序列测定,翻译为氨基酸与HIV-1 Sequence Database HXB Ⅱ参考株中和抗体表位数据比对,分析2F5、4E10中和表位氨基酸变异情况.结果 92例HIV/AIDS患者HIV-1外膜蛋白env gp41段中和抗体2F5、4E10保守表位氨基酸均存在突变;2F5中和抗体表位主要有E662A(14.1%)、K665S(17.4%)、A667K(16.3%)突变;4E10中和抗体表位主要有N671S(13.0%)、D674S(3.3%)、T676S(16.3%)突变;CRF_B'C亚型与B'亚型的2F5和4E10表位氨基酸突变差异具有统计学意义(P<0-05);CRF_B'C与CRF01_AE亚型2F5表位突变差异具有统计学意义(P<0.05);B'亚型缓慢进展者、HIV感染者和AIDS患者的4E10表位氨基酸突变差异具有统计学意义(P<0.05).结论 92例HIV/AIDS患者HIV.1包膜蛋白env gp41段中和抗体2F5、4E10中和表位氨基酸存在突变,且变异多样化;不同亚型中和抗体保守表位氨基酸位点变异有差异;B'亚型4E10中和抗体表位变异可能与疾病进展有一定联系.     

831名健康青年庚型肝炎病毒和人免疫缺陷病毒感染？…

目的 了解我国健康青年中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）和人免疫缺陷病毒的感染情况。方法 采用酶联免疫法（ＥＩＡ）检测６省８３１名健康青年血清中的ＨＧＶ和ＨＩＶ抗体，对抗－ＨＧＶＩｇＧ阳性的血清再用逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果 发现抗－ＨＧＶ ＩｇＧ阳性率为２．５３％（２１／８３１），２１例阳性者中ＨＧＶ ＲＮＡ阳性８例，两者符合率为３８．１％；抗－ＨＩＶ均阴性。结论 我     

人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白V3区对细胞结合能力的研究

目的：研究人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）不同亲嗜株包膜糖蛋白Ｖ３区结合于靶细胞的能力。方法：合成来源于不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区的生物素标记和非标记的多肽。采用流式细胞计数分析生物素化的 Ｖ３多肽对细胞的结合能力以及细胞表面的结合配体。结果：ＨＩＶ－１Ｘ４　亲嗜株ＩＩＩＢＶ３区能结合于多种细胞的表面，包括辅助受体ＣＸＣＲ４；竞争实验结果显示蛋白酶抑制剂能抑制该结合。Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区只极微弱地结合于外周血单核细胞和表达ＣＣＲ５ 的人星形胶质细胞表面。结论：不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区结合于细胞表面的能力不同从亲嗜株Ｖ３区直接结合于细胞表面并被其自身所增强，其靶分子至少包括辅助受体 ＣＸＣＲ４和蛋白酶分子；而Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区则不结合于 ＣＣＲ５和蛋白酶。     

HIV-1 黑龙江省分离株CHNHLJ03009包膜克隆及分析

目的 分析黑龙江省Ⅰ型人免疫缺陷病毒（human irnmunodeficiency virus type 1，HIV-1）原代分离株包膜糖蛋白的变异性及表型特征。方法从一名HIV阳性但未发病的感染者外周血单个核细胞提取DNA，采用保守引物进行HIV包膜直接克隆，进行序列分析及系统树分析。构建了一株带该包膜蛋白的伪病毒并利用表达CXCR4和CCR5的靶细胞进行了感染实验，观察该病毒包膜利用辅助受体的表型特征。结果共获得2个有功能全长env克隆，分别命名为CHNHIJ03009c34（GenBank序列号为AY905493）和CHNHIA03009c33。用全长env氨基酸序列与国内外分离株进行同源性比较分析发现，与分离株CHNHLJ03009c34的包膜同源性最高的病毒为云南的HIV-1 B’亚型分离株RIA2，同源性为91．52％。系统发育分析结果表明，该株为泰国B’亚型，与云南分离株RIA2的遗传距离最近。对包膜蛋白结构分析结果显示，分离株CHNHLJ03009c34包膜在抗原性和亲水性上与RIA2没有明显差别。感染性检测结果显示该病毒只能感染U87．CD4．CCR5细胞，不能感染U87．CD4．CX-CR4细胞。结论本研究从黑龙江省一名HIV-1阳性者克隆到HIV-1CHNHLJ03009病毒的包膜基因，该病毒属于B’亚型（泰国亚型），为R5亲嗜性毒株。该包膜基因克隆为首次报道的黑龙江分离株。     

人源抗人免疫缺陷病毒1型噬菌体抗体库的构建及筛选

目的构建人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）特异性噬菌体抗体库，制备人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体。方法以半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）从ＨＩＶ－１感染者外周血单个核淋巴细胞中扩增抗体重链Ｆｄ和轻链（ｋ）基因，与噬菌体载体ｐＣｏｍｂ３连接，构建噬菌体抗体Ｆａｂ组合文库。对抗体库进行３轮吸附－洗脱－扩增的亲和选择后，以ＥＬＩＳＡ法筛选抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体，并进行ＤＮＡ序列分析和Ｆａｂ的可溶性表达。结果半巢式ＰＣＲ有效地扩增出Ｆｄ和ｋ基因，以此构建成容量为１９５×１０７的噬菌体抗体库。３轮亲和选择使特异性抗体得到高度富集，抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０噬菌体抗体阳性克隆占３２％。对一阳性克隆抗体基因ＣＨ１和ＣＬ部分ＤＮＡ序列进行了测定，并在大肠杆菌表达出可溶性Ｆａｂ。结论抗ＨＩＶ－１特异性噬菌体抗体库的构建和人源抗ＨＩＶ－１ｇｐ１２０单克隆抗体的制备为今后筛选抗ＨＩＶ中和抗体奠定了基础，具有重要的应用价值。