慢性乙肝患者血清趋化因子RANTES水平与肝功能生化指标等的相关性研究

Objective To investigate the level of the serum chemokine RANTES and its correlation with serum biochemical indices of liver function test, HBeAg and HBV DNA load in patients with chronic hepatitis B.Methods 144 patients with chronic hepatitis B (observed group) and 18 normal cases (control group) were enrolled in this study. The serum level of chemokine RANTES was detected with an ABC-ELISA assay. Statistical analysis was performed on the software of SPSS13.0. Results The serum chemokine RANTES level in the observed group (3930.12 ng/ml±2856.96) ng/ml was significantly higher than that in the control group (329.46 ng/ml±152.23) ng/ml. The results from the observed group indicated the positive correlation of serum RANTES level with indices of liver function test, including ALT (r=0. 197, P=0.018), AST(r=0.239, P=0.004) and TBil (r=0.316, P=0.001), but did not with PTA (r=-0.078, P=0.357). Neither difference of serum chemokine RANTES level between HBeAg-positive group and HBeAg-negative group nor that between high HBV DNA load group (≥105 copies/ml) and low HBV DNA load group (< 105 copies/ml) were statistically significant (P=0.407 and 0.185, respectively). Conclusions Serum chemokine RANTES level in patients with chronic hepatitis B elevates significantly and is not affected by HBeAg or HBV DNA load. Its positive correlation with indices of liver function test indicates that RANTES might play an important rule in the pathogenesis of chronic hepatitis B.     

人乳头瘤病毒16型修饰后E6E7基因免疫原性增强

利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus type 16,HPVl6)E6E7融合基因(fmE6E7)，研制治疗HPVl6相关疾病的DNA疫苗。用PCR扩增fmE6E7基因后，插人真核表达质粒获得pVRl012-fmE6E7，瞬时转染Cos-7细胞，免疫荧光法检测证实其表达后，在C57BL／6小鼠后腿肌肉进行裸DNA免疫，5lCr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性Cytotoxic T lymphocyte，CTL)，间接ELISA法检测免疫鼠血清中E7特异性抗体。研究表明修饰后的中国地方株E6E7融合基因可诱导机体产生特异的抗体反应和CTL反应，与单独野生型E7基因免疫相比，E6E7融和基因可更好的活化CTT反应。表明修饰后消除转化活性的中国地方株E6E7融合基因可作为HPVl6治疗性DNA疫苗的靶基因。     

真核表达人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法

目的 真核表达人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,SV)融合蛋白(fusion protein,),并完成蛋白纯化及纯度测定.方法 根据编码F蛋白的基因序列设计引物,CR方法扩增出3'端带His标签的F基因序列,克隆入pGEM-T-easy载体,经核酸序列分析后,进一步克隆到pcDNA3.1( )真核表达载体,限制性内切酶鉴定,用脂质体Lipofectamine2000转染COS-7细胞,2 h后再用Westem blot检测目的蛋白的表达.Ni柱亲和层析纯化COS-7细胞表达的F蛋白,高效毛细管电泳分析纯化后蛋白纯度.结果 核酸序列分析证实获得带His标签的RSV F基因序列,没有发生无义突变.转染COS-7细胞后,利用Western blot方法检测到F蛋白的特异性条带,纯度达99%以上.结论 初步建立了真核表达RSV F蛋白的纯化方法,为进一步优化RSV F蛋白制备条件及单克隆抗体及诊断试剂等研究奠定了基础.     

IGFBP2、IGFBP6在TGF-β1活化的肝星状细胞中表达

目的:观察胰岛素样生长因子结合蛋白2、6(IGFBP2、IGFBP6)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导活化后的肝星状细胞中的表达变化。方法:大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)体外培养,分别设立空白对照组(加入等量PBS)、不同浓度的TGF-β1处理组,处理因素作用24 h,采用免疫细胞化学染色、Western blotting检测IGFBP2、IGFBP6在HSC-T6中的表达。结果:免疫细胞化学染色及Western blotting结果发现,TGF-β1各处理组IGFBP2、IGFBP6的表达均较空白对照组显著增强。结论:IGFBP2、IGFBP6在TGF-β1诱导活化后的HSC-T6中表达明显增强,IGFBP2、IGFBP 6可能参与了肝纤维化的形成。     

格列美脲联合甘精胰岛素治疗2型糖尿病12周后对血糖水平和体重指数的影响

目的:观察格列美脲联合甘精胰岛素治疗2型糖尿病(T2DM)对血糖水平和体重指数(BMI)的影响。方法:选取本院2018-01-2018-06 T2DM患者50例,随机平分为对照组和试验组,对照组给予单纯注射甘精胰岛素治疗(0.2U/kg·d),试验组给予口服格列美脲(2-4mg/次,1次/天)联合注射甘精胰岛素治疗,12周后,分析比较两组患者空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)以及BMI等指标的水平变化。结果:治疗后两组FPG、2hPG、HbA1c和BMI水平均较同组治疗前降低(P0.01),且试验组血糖水平及其血糖达标率均优于对照组(P0.01)。结论:格列美脲联合甘精胰岛素治疗T2DM能有效降低血糖及BMI指标,提高血糖达标率。     

慢性乙肝患者血清趋化因子RANTES水平与肝功能生化指标等的相关性研究

Objective To investigate the level of the serum chemokine RANTES and its correlation with serum biochemical indices of liver function test, HBeAg and HBV DNA load in patients with chronic hepatitis B.Methods 144 patients with chronic hepatitis B (observed group) and 18 normal cases (control group) were enrolled in this study. The serum level of chemokine RANTES was detected with an ABC-ELISA assay. Statistical analysis was performed on the software of SPSS13.0. Results The serum chemokine RANTES level in the observed group (3930.12 ng/ml±2856.96) ng/ml was significantly higher than that in the control group (329.46 ng/ml±152.23) ng/ml. The results from the observed group indicated the positive correlation of serum RANTES level with indices of liver function test, including ALT (r=0. 197, P=0.018), AST(r=0.239, P=0.004) and TBil (r=0.316, P=0.001), but did not with PTA (r=-0.078, P=0.357). Neither difference of serum chemokine RANTES level between HBeAg-positive group and HBeAg-negative group nor that between high HBV DNA load group (≥105 copies/ml) and low HBV DNA load group (< 105 copies/ml) were statistically significant (P=0.407 and 0.185, respectively). Conclusions Serum chemokine RANTES level in patients with chronic hepatitis B elevates significantly and is not affected by HBeAg or HBV DNA load. Its positive correlation with indices of liver function test indicates that RANTES might play an important rule in the pathogenesis of chronic hepatitis B.     

阴道镜下高频电灼术联合α-2a干扰素凝膏治疗尖锐湿疣疗效分析

目的探讨阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a治疗尖锐湿疣（CA）的效果。方法将165例CA分为3组，A组应用阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a；B组单纯采用阴道镜下高频电灼治疗；C组应用NS-FII型多功能光谱治疗仪联合肌注重组人干扰素α-2a。结果治疗后3-6个月A、B、C组复发率分别为0％、4．4％、65．4％：半年后人乳头瘤病毒（HPV）转阴率分别为93．5％、85．4％、43．8％，A组明显优于B组，B组明显优于C组，3组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a治疗CA可明显降低CA复发率和提高HPV转阴率。     

人胸腺基质淋巴生成素的研究进展

人胸腺基质淋巴生成素(hTSLP)是一种结构类似IL-7的新型细胞因子.正常情况下其mRNA主要表达于基质细胞、上皮细胞和肥大细胞,病理状态下,TSLPmRNA在一些前炎症细胞因子的作用下表达增加.hTSLP直接作用的效应细胞主要是树突状细胞(DC),通过调节DC的成熟来发挥作用.一方面.hTSLP-DC在外周能够诱导初始T细胞向一类特殊的Th2细胞分化,从而启动炎症反应;另一方面,hTSLP-DC能够促进胸腺中CD4+CD25-T细胞分化成CD4+CD25+调节性T细胞,从而在免疫耐受的发生和调控中发挥作用.     

术前碳水化合物对瘢痕切除术后胰岛素抵抗的影响

目的观察术前口服碳水化合物及静脉输注葡萄糖对术后胰岛素抵抗程度的影响.方法择期瘢痕切除术病人60例,随机分为对照组、口服组和静注组,每组20例.术前对照组常规禁食禁饮;口服组口服12.5%碳水化合物的饮料（CHO）;静注组持续静脉输注10%葡萄糖液.分别于口服或静注前、术后6 h采血,测定血糖、血清胰岛素以及红细胞胰岛素受体.结果处理前各组血糖、血清胰岛素、胰岛素敏感指数及红细胞胰岛素高亲和力受体、低亲和力受体无明显差异;术后6 h口服组、静注组的血糖明显低于对照组,与处理前无显著差别;术后6 h各组血清胰岛素无显著差别,均显著高于处理前;胰岛素敏感指数、红细胞低亲和力受体三组均较处理前显著降低,但口服组、静注组明显高于对照组;术后6 h口服组、静注组红细胞高亲和力受体无明显降低;口服组与静注组间的血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数及红细胞胰岛素受体无明显差别.结论术前静脉输注葡萄糖可缓解术后胰岛素抵抗的程度,术前饮用碳水化合物具有同样的效果,是一种简单有效的治疗方法.     

抗蓖麻毒素A链人源化单域抗体的设计、原核表达及生物活性检测

目的 运用计算机辅助蛋白质分子设计的方法设计针对蓖麻毒素A链(RTA)的拮抗肽,实现在大肠杆菌B121中的可溶性表达,并对其生物学活性进行评价.方法 根据RTA的晶体结构、RTA-rRNA相互作用复合物模型,在CVFF(consistent-valence force field)、Amber力场下,对RTA的空间构象进行理论模拟,初步确定其生物活性功能域;然后针对该功能域设计小分子拮抗肽,并借助人抗体重链町变区骨架,在CDR3区对拮抗肽进行展示,用重叠延伸PCR全基因合成人源化的单域抗体并克隆至载体pET-32a(+);双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定;IPrG诱导人源化的单域抗体表达,用镍离子亲和层析纯化,竞争ELISA和MTT法分别进行结合和中和活性检测.结果 从头搭建并设计合成了人源化的单域抗体,实现了其原核表达,并进行了牛物活性检测;建立了基于人源化的单域抗体的RTA和蓖麻毒素检测方法.结论 研究结果为新型蓖麻毒素小分子拮抗剂的研制奠定了理论和实验基础.