RNA干扰体外抑制HBeAg的表达

目的：构建乙型肝炎病毒前C／C基因小发夹RNA（shRNA）表达载体，探索shRNA表达载体对HBeAg表达的抑制作用。方法：用基因重组技术构建shRNA表达载体，经酶切、测序鉴定后，与HBeAg表达载体pcDNA3．1-preC／C按7：1的比例，共转染HeLa细胞，采用半定量PCR和微粒子酶免疫试验（MEIA）分析shRNA表达载体对HBeAg表达的抑制情况。结果：经限制性内切酶、测序证实成功构建shRNA表达载体；筛选到psiHBV2载体对HBeAg表达有一定抑制作用，对mRNA的抑制率为75％，对蛋白质的抑制率为53％，其余两序列无明显抑制作用。结论：RNAi技术可以有效抑制载体pcDNA3．1-preC／C表达HBeAg。     

牛IL-18基因的克隆及遗传进化分析

目的：克隆牛白细胞介素18（IL-18）全基因，并对其进行序列分析。方法：从ConA刺激培养的牛外周血淋巴细胞提取总RNA，利用巢式RT-PCR方法扩增出牛IL-18全长cDNA，将其克隆到pMDl8-T载体上，测序后进行序列分析。结果：成功地克隆到了牛IL-18全基因，序列分析表明，实验中所克隆到的牛IL-18序列与GeneBank所登录的牛IL-18核苷酸序列及其推导氨酸序列同源性分别是99．5％和99％。与人、猕猴、野猪、山羊属、马等核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分别在84．9％-99．5％和74．9％～99％之间，研究结果在国内还未见报道。结论：成功地从牛外周血中克隆到了牛IL-18的基因，其全长为598bp。     

生后人肺神经内分泌细胞的形态学观察—免疫组织化学及电镜研究

用银染色法、免疫组织化学及透射电镜技术，对３６例人肺的神经内分泌细胞进行了形态学和免疫组织化学观察。提示ＮＥ细胞发生了废用性退化，其原因可能与出生前后人肺功能改变有关。     

IL—6基因转染的瘤苗体内诱导的抗肿瘤免疫功能与效果

经丝裂霉素C体外处理后,将IL-6基因转染的、高分泌的IL-6的B16黑色素瘤细胞制成瘤苗。结果发现,体内注射IL-6基因转染的瘤苗后,小鼠脾脏CTL活性、NK活性及IL-2诱导的LAK活性显著升高。经IL-6基因转染瘤苗体内治疗后,荷瘤小鼠的皮下肿瘤生长显著减慢、肺转移结节数显著降低、存活期显著延长,若同时合用低剂量IL-2,则上述治疗效果更好。可见IL-6基因转染的瘤苗能有效地通过诱导机体抗肿瘤免疫功能而发挥抗肿瘤作用,与低剂量IL-2合用后,IL-6基因转染的瘤苗的抗肿瘤效果更佳。     

抗人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体制备中免疫抗原的选取

目的 获得与人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ没有交叉反应的抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ(HcTnⅠ)特殊位点的单克隆抗体。方法 选择了包括牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(BcTnⅠ)、根据HcTnⅠ氨基酸序列的亲水性设计的4个钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联肽段和一个八倍体多肽分子(MAP)等6种代用抗原，通过免疫、杂交和筛选，获得了能分泌抗(HcTnⅠ)的IgG型抗体的杂交瘤细胞株，并对得到的抗体进行了特异性鉴定。结果 用其中4种抗原免疫得到了抗HcTnⅠ的IgG型单抗的细胞株，其中的3种合成肽可以得到分泌抗HcTnⅠ特殊位点的IgG型单抗细胞株。结论 为临床上检测cTnⅠ以诊断急性心肌梗塞，提供了可能抗体。     

Western blot 检测蛋白表达方法的改进

Western blot为常用的检测蛋白质的方法．其操作步骤较多，在抗体反应这一步骤中．常规方珐首先用靶蛋白特异性的非标记抗体与靶蛋白的抗原决定簇相结合．然后用Ⅰ-蛋白A或与辣根过氧化物酶耦联的抗免疫球蛋白抗体检测已结合上去的抗体，此法虽好，但有如下缺点：（1)信号放大有限．在蛋白质量少的隋况下无法得到满意结果，     

变应性鼻炎病人IL-4、IL-5和GM-CSF的水平观察

变态反应性鼻炎的发病机理与诸多细胞因子有关的现象，近年来已越来越受到国内外学者的重视[1］。变态反应性鼻炎发作时细胞因子的产生及炎性介质的参与均与机体异常的免疫调节有关，即存在T辅助细胞（TH）亚群功能失调，通过释放细胞因子，促进IgE的合成与分泌，并增加炎症细胞的浸润和活化。本文观察变应性鼻炎病人血清IL-4、IL-5和GM-CSF水平变化，为变应性鼻炎的防治提供依据。1材料与方法1. 1研究对象实验组为本院变态反应专科门诊确诊为尘螨变应性鼻炎（1997年修订，海口，变应性鼻炎诊断标准）病人86例，其中男性46例，女性40…     

日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原诊断血吸虫病的初步探讨

用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)作探针，采用ELISA和ELIB检测血吸虫病人血清抗体，对急慢性血吸虫病人的控出率分别为100％和98．2％，未出现假阳性及交叉阳性反应；治疗后3、6和12个月血清抗体的阴转率分别为32．3％、50．9％和64％。其中抗82，73，67，52，42，38，32，31，28，26．21，18kDa分子的血清抗体消失较快。结果表明，SIEA在血吸虫病的诊断中具有较高的敏感性、特异性和潜在的疗效考核价值。     

新生儿乙型肝炎疫苗普种8年效果考核

从１９８６年起，上海市南市区对每年出生的新生儿普遍免疫。１９９４年对该区１９８６年以后出生的１－８人九进行乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染和水平的血清学调查。调查结果表明，１－８岁乙型肝为病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）地阳性率为０．４１％，各年龄分组的阳性率均在１％以下波动，未见明显的随年龄变化趋势；３－８岁组ＨＢＶ感染率为０．９８％。抗－ＨＢdisplay status     

脱氢表雄酮对人脐静脉内皮细胞CD40/CD40L表达的影响

目的:探讨脱氢表雄酮(DHEA)对干扰素-γ(I NF-γ)刺激下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)CD40/CD40L表达的影响。方法:原代培养人脐静脉内皮细胞,给予I NF-γ刺激和不同浓度DHEA干预。采用流式细胞术检测CD40/CD40L在细胞表面的表达,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CD40/CD40L mRNA的表达。结果:I NF-γ刺激HUVECs表达CD40/CD40L,DHEA下调I NF-γ诱导的HUVECs表面CD40/CD40L的表达,同时对I NF-γ刺激下的CD40/CD40L mRNA的表达有抑制作用,并且呈剂量依赖性。结论:DHEA能减轻I NF-γ刺激下的人脐静脉内皮细胞CD40/CD40L的表达。