丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化的诱导作用及其机制

目的：探讨丹参酮ⅡA （TanⅡA）对人胎盘间充质干细胞（hPDMSCs）向心肌细胞分化的诱导作用及其机制,为TanⅡA作为心肌细胞分化诱导剂提供实验依据。方法：采用不同浓度TanⅡA （0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0 mg·L^-1）处理hPDMSCs,MTT法筛选出无毒剂量的TanⅡA （0.1 mg·L^-1）用于实验。hPDMSCs培养体系分为对照组、5-氮胞苷（5-aza,10μmol·L^-1）诱导组和TanⅡA （0.1 mg·L^-1）诱导组。培养20d后,免疫组织化学法检测各组细胞中α-横纹肌肌动蛋白（α-SCA）的表达;免疫荧光法检测各组细胞中心肌肌钙蛋白I （cTnI）的阳性表达率,计算心肌细胞分化率;Western-blotting法检测各组细胞中心肌转录调节因子4（GATA4）、心钠素（ANF）、cTnI、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）和β-连环蛋白（β-catenin）的蛋白表达水平。结果：hPDMSCs的生物学特性符合间充质干细胞。MTT法,当TanⅡA浓度大于0.1 mg·L^-1时,细胞存活率随浓度的增加而降低。对照组细胞在培养12 d以前呈快速增长趋势,培养12 d后细胞增殖活性降低;与对照组比较,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）。免疫组织化学染色,对照组细胞不表达α-SCA,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞均表达α-SCA,且TanⅡA诱导组更明显。与对照组比较,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞中GATA4（t_5-aza=2.937,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=4.769,P_TanⅡA<0.05）、ANF （t_5-aza=3.728,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=5.912,P_TanⅡA<0.05）、cTnI （t_5-aza=3.623,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=7.153,P_TanⅡA<0.05）和GSK-3β（t_5-aza=2.995,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=5.420,P_TanⅡA<0.05）蛋白表达水平明显升高,β-catenin （t_5-aza=2.985,P_5-aza<0.05;t_TanⅡA=6.951,P_TanⅡA<0.05）蛋白表达水平明显降低;与5-aza诱导组比较,TanⅡA诱导组GATA4、ANF和GSK-3β蛋白表达水平进一步升高（P<0.05）。结论：TanⅡA能诱导hPDMSCs分化为心肌细胞,且效果优于5-aza,其机制可能与TanⅡA能抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

小儿遗尿症指南和专家共识质量评价

背景 小儿遗尿症是儿科常见病之一,有效的小儿遗尿症诊疗指南有助于症状的规范化控制和缓解,而制定高质量的临床实践指南是提高小儿遗尿症诊疗水平的重要方式。目的 基于AGREEⅡ和RIGHT工具,评价2010年以来国内外发布的小儿遗尿症指南和专家共识的质量,以期为临床实践及后续指南的制订提供参考。方法 检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网、中国生物医学文献数据库和PubMed(补充检索医脉通、世界卫生组织以及英国国家临床示范研究所等数据库)2010-01-01至2022-01-31公开发表的小儿遗尿症相关的诊疗指南和专家共识。采用AGREEⅡ和RIGHT工具评价纳入文献的方法学和报告质量。根据AGREE Ⅱ工具评价结果,将各指南/共识推荐等级评定为“推荐(A级)”“更新后推荐(B级)”和“不推荐(C级)”。使用组内相关系数(ICC)进行一致性评价。结果 纳入8部指南和5部专家共识。共形成推荐意见185条,其中44条为诊断评估方面的意见,140条为治疗方面的推荐意见,1条为随访推荐意见。AGREEⅡ工具评价结果显示,范围和目的、参与人员、严谨性、清晰性、应用性和独立性6个领域的总得分(报...     

脓毒症患者外周血单核细胞miR-147b的表达及其与病情严重程度和预后的关系

目的 探讨脓毒症患者外周血单核细胞miR-147b的表达水平及其与病情严重程度及预后的相关性。方法 选择2019年1月至2021年6月于安徽医科大学第一附属医院就诊的46例脓毒症患者(脓毒症组)和50例普通感染患者(普通感染组)作为研究对象。查阅患者病历,记录年龄、性别、感染部位等一般资料。采用酶联免疫吸附试验试剂盒检测研究对象血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)的浓度。计算序贯性器官衰竭评分(sequential organ failure score, SOFA)和急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(acute physiology and chronic health scoreⅡ,APACHEⅡ)。观察或随访脓毒症患者的28 d预后情况,分为生存组和死亡组。应用逆转录聚合酶链反应测定外周血单核细胞中miR-147b的表达水平。结果 脓毒症组和普通感染组的年龄、性别、感染部位分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。脓毒症组患者的TNF-α、CRP水平、SOFA评分和A...     

退行性腰椎管狭窄症相关指南的质量评价和推荐意见比较研究

背景 退行性腰椎管狭窄症（DLSS）是一种老年多发,严重影响患者正常生活且医疗费用负担较重的疾病。DLSS治疗方法较多,开发高质量的临床实践指南和临床医生应用高质量指南是提高DLSS诊疗水平的重要途径。目的 采用AGREEⅡ及RIGHT评价DLSS相关指南的方法学及报告质量,为DLSS指南制订及报告提供参考依据。方法 计算机检索中国生物医学文献数据库（CBM）、中国知网（CNKI）、万方数据知识服务平台（Wanfang Data）、维普网（VIP）、PubMed,补充检索医脉通数据库（Medlive）、世界卫生组织（WHO）、英国国家临床优化研究所（NICE）、国际指南协作网（GIN）、美国国立指南文库（NGC）和苏格兰院际间协作网（SIGN）等指南库中有关DLSS的临床实践指南、共识或规范,检索时限均为2010-01-01至2022-01-01。由两位评价员独立对纳入文献进行方法学质量及报告质量评价,并在文献中推荐意见等级统一前提下进行比较。结果 共纳入6篇文献,其中4篇指南,2篇共识;1篇指南为中医指南,3篇指南为循证指南。AGREEⅡ评价结果显示纳入6篇文献的实际总得分/总最高可...     

肺癌组织分型与转化生长因子-βⅡ型受体和肿瘤相关性巨噬细胞计数的关系

目的 检测肺腺癌和肺鳞状细胞癌中转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)和肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)计数,探讨两者与肺腺癌和肺鳞状细胞癌的关系.方法 应用免疫组织化学法检测TGF-βRⅡ蛋白和TAMs在肺腺癌和肺鳞状细胞癌组织中的表达,并与癌旁正常肺组织中的表达进行比较.结果 (1)TGF-βRⅡ蛋白的表达在肿瘤组织中明显降低(P＜0.01),其表达下调与肺癌的组织学类型、淋巴结转移、临床分期相关(P＜0.05).(2)TAMs在肿瘤间质内浸润数量明显增多(P＜0.01),并与肺癌的组织学类型、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05).结论 TGF-βRⅡ蛋白表达水平降低可促进肺癌的发生、浸润和转移,对肺腺癌发生或进展影响很大,并可能通过下调TGF-βRⅡ的表达、诱导TAMs至肿瘤间质,从而促进肿瘤的发生、发展,且这种作用在非小细胞肺癌中具有较普遍的意义.     

SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体基因过表达对CaMK Ⅱ和CREB的影响

目的研究SH-SY5Y神经细胞中α7 nAChR基因过表达对CaMKⅡ和CREB的影响。方法复苏稳定转染α7 nAChR-pc DNA3.1质粒及空载质粒的SH-SY5Y神经细胞后,用含G418的培养液进行筛选培养;应用实时荧光定量PCR法和蛋白印迹法(Western blot)检测α7 nAChR基因过表达组、空载质粒组和正常对照组细胞中CaMKⅡ、CREB mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与对照组相比,α7 nAChR基因过表达细胞组的CaMKⅡ、CREB mRNA表达水平分别增加了116.8%和114.7%(P0.01);及CaMKⅡ、CREB蛋白表达水平分别增加了8.7%(P0.05)和41.4%(P0.05)。结论α7 nAChR的神经保护作用可能与上调细胞CaMKⅡ、CREB水平有关。     

DHS与PFNA-Ⅱ内固定治疗老年股骨粗隆间骨折对比分析

目的对比观察动力髋螺钉(Dynamical hip screw,DHS)与改进型防旋股骨近端髓内钉(Proximal femoral nail antirotation-Ⅱ,PFNA-Ⅱ)治疗老年股骨粗隆间骨折手术创伤、并发症及临床效果。方法回顾总结本院自2007年6月至2010年6月分别采用DHS内固定(DHS组,35例)和PFNA-Ⅱ内固定(PFNA-Ⅱ组,18例)治疗老年股骨粗隆间骨折,对其进行随访9~15个月,对手术切口、手术时间、术中出血、术后引流、骨折愈合时间、髋关节活动度、行走情况进行评估。结果所有患者均达到骨性愈合,两组在手术切口长度、手术时间、术中出血量方面有统计学意义(P<0.05),PFNA-Ⅱ组优于DHS组。结论 PFNA-Ⅱ内固定治疗股骨粗隆间骨折手术时间短,术中出血少,而且安全有效,尤其适用于骨质疏松患者,值得临床进一步推广应用。     

丹参酮ⅡA诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及细胞周期阻滞的实验研究

目的观察丹参酮ⅡA对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,予含有不同浓度丹参酮ⅡA的培养液(分别为0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL)进行干预。不同时间点以CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期的变化。结果不同浓度丹参酮ⅡA干预和不同时间干预,对瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖活性、早期凋亡率、细胞周期G0/G1期比例的影响,均具有统计学意义(P<0.001),其中200μg/mL组干预效果最明显。结论丹参酮ⅡA具有抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖,诱导凋亡并阻滞细胞周期的作用,且干预效果存在浓度依耐性及时间依耐性。     

摆式矫治器加直丝弓技术治疗第二恒磨牙完全萌出后的效果

目的 探讨头影测量和定量分析摆式矫治器加直丝弓技术在上颌第2磨牙萌出后的治疗效果.方法 选择安氏Ⅱ类错(牙合)患者,分为两组,第2磨牙未萌出者为对照组,第2磨牙完全萌出者为实验组.两组均戴用摆式矫治器,推磨牙向远中,当上下磨牙达到轻度安氏Ⅲ类关系时,维持3个月,拆除摆式矫治器.两组皆用滑动直丝弓技术进行第2期矫治,直至治疗结束.每位患者皆拍摄头颅侧位片.对患者的头颅侧位片进行测量、分析.结果 实验组的第1磨牙近中颊尖向远中移动4.62 mm,几何中心移动3.75 mm,约占第1磨牙远中移动量的81％.对照组的第1磨牙近中颊尖向远中移动5.78 mm,几何中心移动3.20 mm,约占第1磨牙远中移动量的55％,以上变化差异均具有显著的统计意义(P＜0.01).可见,两组的第1磨牙皆能有效地向远中移动,但实验组以整体移动为主,对照组以倾斜移动为主.结论 在上颌第2磨牙完全萌出的情况下,摆式矫治器仍可以有效远中移动第1、2磨牙.摆式矫治器加直丝弓技术仍可获得良好疗效.     

血管紧张素Ⅱ对小鼠足细胞小窝蛋白1表达的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激及氯沙坦干预对足细胞小窝蛋白1（caveolin-1）表达的影响,探讨caveolin-1在足细胞损伤中的作用.方法 体外培养永生化小鼠足细胞（MPC）,AngⅡ（10-6mol/L）刺激不同时间（3 h、6h、12 h和24 h）;Losartan（10-6 mol/L）提前预处理3h后与AngⅡ（10-6 mol/L）共孵育6h,Hoechst-33342检测足细胞凋亡率,Western-blot法检测各组细胞caveolin-1蛋白表达,免疫荧光检测caveolin-1及其磷酸化水平.结果 ①AngⅡ刺激3h,足细胞即开始发生凋亡,随着刺激时间的延长,足细胞凋亡明显增多（P＜0.05）.②AngⅡ刺激不同时间caveolin-1表达总量无明显改变（P＞0.05）,从3h开始,caveolin-1磷酸化水平明显增高（P＜0.05）.③Losartan干预后caveolin-1磷酸化水平明显降低（P＜0.05）.结论 caveolin-1可能在AngⅡ诱导的足细胞损伤中发挥着重要的作用.