异钩藤碱调节EGFR/FAK信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-FU耐药性的影响

目的 探讨异钩藤碱调节表皮生长因子受体（EGFR）/局部黏着斑激酶（FAK）信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药性的影响。方法 取对数生长期的 HepG2 细胞,分为对照组,异钩藤碱低、中、高浓度（32.5、65.0、130.0 μmol·L^-1）组,异钩藤碱（130 μmol·L^-1）＋EGFR 激活剂 NSC228155（2 μmol·L^-1）组 ;对数生长期的 5-FU 耐药肝癌细胞系 HepG2/5-FU 分为对照组 、异 钩 藤 碱（ 130 μmol · L^-1 ）组 、5-FU（ 60 μmol · L^-1 ）组 、异 钩 藤 碱（ 130 μmol · L^-1）＋5-FU（60 μmol·L^-1）组、异钩藤碱（130 μmol·L^-1）＋5-FU（60 μmol·L^-1）＋NSC228155（2 μmol·L^-1）组。给药处理 24 h,对照组不给药。EdU 染色、CCK-8 检测 HepG2 或 HepG2/5-FU 细胞增殖;划痕实验检测 HepG2 或 HepG2/5-FU 细胞迁移;Westernblotting 检测细胞中细胞周期蛋白 D1（CyclinD1）、迁移侵袭增强子因子 1（MIEN1）、P-糖蛋白（P-gp）、p-EGFR、p-FAK蛋白表达。结果 与对照组相比,异钩藤碱低、中、高浓度组 EdU 阳性率、吸光度（A₄₅₀）值、划痕愈合率、CyclinD1、MIEN1、p-EGFR、p-FAK 蛋白表达显著降低,且呈浓度相关性（P＜0.05）;与异钩藤碱 130.0 μmol·L^-1组相比,异钩藤碱＋NSC228155 组 HepG2 细胞 EdU 阳性率、A₄₅₀ 值、划 痕 愈 合 率 、 CyclinD1、 MIEN1、 p-EGFR、 p-FAK 蛋 白 表 达 显 著 升高（P＜0.05）。与对照组相比,5-FU 组 HepG2/5-FU 细胞 EdU 阳性率、A₄₅₀值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK 蛋白表达显著降低（P＜0.05）;与异钩藤碱组、5-FU 组相比,异钩藤碱＋5-FU 组 HepG2/5-FU 细胞 EdU 阳性率、A₄₅₀值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK 蛋白表达降低（P＜0.05）;与异钩藤碱＋5-FU 组相比,异钩藤碱＋5-FU+NSC228155 组 HepG2/5-FU 细胞 EdU 阳性率、A₄₅₀值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK 蛋白显著上调（P＜0.05）。结论 异钩藤碱抑制 HepG2细胞增殖、迁移及降低 5-FU 耐药性的机制可能与阻断 EGFR/FAK 通路有关。     

胃癌中P-gp和LRP的表达及临床意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)和肺耐药蛋白(LRP)在胃癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SABC法检测P-gp和LRP在80例胃癌组织和20例正常胃粘膜组织中的表达,探讨胃癌组织学类型、肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移对P-gp和LRP表达的影响。结果:P-gp和LRP在胃癌组织中的阳性表达率高于正常胃粘膜组织(P<0.05);在高中分化腺癌中的表达显著高于低分化腺癌(P<0.05);在浸润粘膜及粘膜下层组、肌层组、浆膜及浆膜外组表达率无显著差别(P>0.05);在有淋巴结转移组P-gp、LRP表达率显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:P-gp、LRP在胃癌原发性多药耐药中起重要作用,其表达与组织学类型、有无淋巴结转移有关而与肿瘤浸润深度无关,联合检测P-gp、LRP对于胃癌判断预后、制定化疗方案有一定的指导意义。     

酪氨酸激酶抑制剂逆转K562/A02细胞多药耐药的研究

本研究旨在比较酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(Imatinib)、尼洛替尼(Nilotinib)对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用。用RT-PCR法检测各组mdr-1mRNA、bcr-abl mRNA表达;用Western blot法检测各组P-gp、P210蛋白表达;用流式细胞术检测各组细胞内柔红霉素(DNR)的蓄积。结果表明:0.0625μmol/L伊马替尼、5nmol/L尼洛替尼对K562/A02细胞无明显细胞毒性,伊马替尼和尼洛替尼上述剂量单独作用48小时均下调mdr-1mRNA、bcr-abl mRNA、P-gp、P210蛋白的表达,且尼洛替尼较伊马替尼作用更强。荧光强度检测显示,K562/A02细胞经伊马替尼、尼洛替尼单独处理48小时后,其细胞内DNR浓度分别为K562细胞中的7.85%、12.02%。结论:酪氨酸激酶抑制剂具有很好的逆转细胞耐药作用,且尼洛替尼较伊马替尼逆转作用更强。     

Clinical significance and correlation of miR-200c and P-gp expression in gastric cancer and the effects on multidrug resistance

BackgroundPoor prognosis is common in gastric cancer patients due to multidrug resistance (MDR)-induced recurrence and metastasis. In the present study, we investigated the expression of microRNA (miR)-200c in gastric cancer tissues and cell lines and its relationship with the expression of the drug resistant gene ABCB1, which encodes P-glycoprotein (P-gp).MethodsThe basic characteristics of 102 patients with gastric cancer were reviewed. Real time-polymerase chain reaction (PCR), immunohistochemistry, and Western blot were employed to detect the expression levels of miR-200c and P-gp in gastric carcinoma tissues and cell lines. The correlation of miR-200c messenger RNA (mRNA) level with clinicopathological characteristics and P-gp protein expression were analyzed. SGC7901/vincristine (VCR) cells were transfected with miR-200c mimics or a specific small interfering RNA (siRNA) targeting the ABCB1 gene. The methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay and flow cytometry were used to determine the role of miR-200c and ABCB1 on the viability and apoptosis of gastric carcinoma cell lines.ResultsThe level of miR-200c in carcinoma tissues was significantly lower than that in adjacent tissues, and the expression level of P-gp in carcinoma tissues was obviously higher than that in adjacent tissues (P<0.01, P=0.029). The expression levels of miR-200c and P-gp were associated with the malignant characteristics of gastric cancer, and patients with high expression of miR-200c or negative expression of P-gp had a better prognosis (P=0.006, P=0.022). MiR-200c negatively regulated the ABCB1 gene in gastric cancer cell lines. MiR-200c overexpression and ABCB1 down-regulation increased the sensitivity of SGC7901/VCR cells to VCR and reversed MDR by promoting cell apoptosis.ConclusionsThe expression level of miR-200c decreases in gastric carcinoma tissues and drug-resistant gastric cancer SGC7901/VCR cells. Overexpression of miR-200c may enhance the sensitivity of SGC7901/VCR cells to VCR by regulating the expression of P-gp.     

幼鼠癫痫模型海马神经元NMDA受体表达与MMP-3表达相关性

目的 探讨幼鼠癫痫模型海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）表达与基质金属蛋白酶-3（MMP-3）表达的相关性。方法 将60只2~4周龄SPF级C57/BL6小鼠随机分为正常组、癫痫组、MMP-3抑制剂组、NMDAR抑制剂组,每组15只。采用匹罗卡品建立幼鼠癫痫模型;采用RT-PCR检测海马神经元NMDAR2A、NMDAR2B、MMP-3 mRNA表达;采用尼氏染色观察海马区神经元形态;采用Western blot检测海马区P-糖蛋白（P-gp）、钙调蛋白激酶Ⅱ（CAMKⅡ）蛋白表达。结果 幼鼠癫痫模型海马区NMDAR2A/B、MMP-3 mRNA以及P-gp、CAMKⅡ蛋白较正常组显著增加（P<0.05）。注射NMDA受体抑制剂或MMP-3抑制剂可显著降低幼鼠癫痫模型NMDAR2A/B、MMP-3 mRNA及P-gp、CAMKⅡ蛋白表达,且明显改善海马区神经元结构。结论 幼鼠癫痫模型海马神经元MMP-3表达与MNDAR表达可能具有相关性。     

Chemoprevention of liver cancer by plant polyphenols

Primary liver cancer or hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most frequent tumors representing the fifth commonest malignancy worldwide and the third cause of mortality from cancer. Currently, the treatments for HCC are not so effective and new strategies are needed for its fight. Chemoprevention, the use of natural or synthetic chemical agents to reverse, suppress or prevent carcinogenesis is considered an important way for confronting HCC. Many of the chemopreventive agents are phytochemicals, namely non-nutritive plant chemicals with protective or disease preventive properties. In this review, we focus on plant polyphenols, one of the most important classes of phytochemicals, their chemopreventive properties against HCC and discuss the molecular mechanisms accounting for this activity.     

原发性双侧乳腺癌P-gp LRP的表达及其与预后相关性的研究

目的：探讨P-糖蛋白（P-gp）、肺耐药蛋白（LRP）在双侧乳腺癌中的表达特点及其预后意义.方法：收集我院1989～2000年收治的原发性双侧乳腺癌45例,同时随机选取单侧乳腺癌病例41例作为对照.应用免疫组化方法（S-P法）检测P-gp与LRP在双侧乳腺癌第一癌、第二癌及单侧乳腺癌中的表达.结果：1）双侧乳腺癌第一癌、第二癌及单侧乳腺癌中P-gp表达率分别为66.7%、46.7%、26.8%.显示双乳癌第一癌比单侧乳腺癌P-gp表达率高,差异有显著性（P＜0.01）.双乳癌第一癌、第二癌及单乳癌中LRP表达率分别77.8%、75.6%、52.3%,显示双侧乳腺癌第一癌及第二癌比单侧乳腺癌LRP表达率高,差异有显著性（P＜0.05）.2）P-gp、LRP表达与双乳癌原发肿瘤大小、组织学分级、病理类型无关,与临床分期有关.LRP与双侧乳腺癌淋巴结转移情况有关.3）双侧乳腺癌第二癌P-gp的表达情况与复发转移情况有关,P-gp、LRP的不同表达状态与双乳癌生存率的差异无统计学意义.结论：P-gp、LRP可能与双侧乳腺癌发病有关,它们有可能成为遴选双侧乳腺癌高危患者的蛋白检测指标和预后因子.     

鼻咽癌组织中P-gp、MRP和LRP的表达及其临床意义

目的探讨多药耐药基因蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)在鼻咽癌组织中的表达情况及其临床意义。方法应用单克隆抗体多药耐药相关蛋白(P-gp),多药耐药基因蛋白(MRP),肺耐药相关蛋白(LRP),对54例鼻咽癌初诊患者的肿瘤组织进行免疫组化检测。结果3项多药耐药指标在54例患者中有不同程度表达。P-gp、MRP、LRP的表达与鼻咽癌病理类型、临床分期及有无淋巴结转移不相关;P-gp表达与MRP、LRP表达不相关,MRP与LRP表达间呈正相关。结论联合检测LP-gp、MRP、LRP在鼻咽癌组织中的表达,对鼻咽癌化疗药物的选择及预后的判断都有重要的参考价值。     

胃癌细胞增殖与P-gp表达的相关性研究

目的 了解胃癌细胞增殖和P-糖蛋白（P-gp）表达水平的临床意义。方法 采用流式细胞术（FCM）检测95例胃癌手术标本P-gp、DNA指数（DI）、S期细胞百分率（SPF）和细胞增殖指数（PI）,结合临床病理资料进行相关性分析。结果 胃癌P-gp表达阴性39例（41.1%）;P-gp表达阳性有56例（58.9%）,其中轻、中度表达有29例（30.5%）,重度表达有27例（28.4%）。95例胃癌中非整倍体肿瘤48例（50.5%）,非整倍体肿瘤SPF和PI显著高于二倍体肿瘤（P〈0.01）,非整倍体肿瘤P-gp表达低于二倍体肿瘤,但差异无统计学意义。胃癌低分化组与中分化组的肿瘤倍体例数比较有非常显著性差异（P〈0.01）;胃癌中-低分化组与中分化组的肿瘤倍体例数比较有非常显著性差异（P〈0.01）。以胃癌发生部位、肿瘤大小、临床分期和有无淋巴结转移进行分组比较SPF、PI、P-gp和倍体关系,均无显著性差异。结论 用FCM检测胃癌P-gp表达水平和DNA倍体可为临床选择适当的化疗方案提供参考依据。     

环氧化酶-2和糖蛋白P在B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的 探讨COX-2和P-gp在B细胞型非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)的表达及意义. 方法 采用免疫组化S-P法检测COX-2及P-gp在70例B-NHL和25例良性淋巴结病变组织中的表达. 结果 COX-2蛋白及P-gp在B-NHL中的阳性表达率分别为42.9%(30/70)和34.3%(24/70),在对照组的阳性率表达率分别为8%(2/25)和4%(1/25),差异具有显著性(P＜0.05).B-NHL患者COX-2和P-gp的表达呈正相关(r=0.758,P＜0.05).COX-2和P-gp均阴性表达的B-NHL患者化疗疗效及5年生存率均高于两者阳性表达患者.COX-2和P-gp共同表达为独立于IPI的独立预后因素,与患者的生存期呈负相关(χ2=13.363, P＜0.0001). 结论 COX-2和P-gp在B-NHL的发生发展中具有协同作用,且两者阳性表达提示患者预后不良.