文冠果花提取物对良性前列腺增生具有抑制作用

目的 探究文冠果花提取物对良性前列腺增生的抑制作用及可能的机制。方法 通过MTT法检测文冠果花提取物对良性前列腺增生细胞（BPH-1）增殖能力的影响、Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡、流式细胞仪测定细胞周期、免疫印迹法检测BPH-1细胞Bcl-2/Bax/Caspase3、PI3K/AKT蛋白表达水平。通过皮下注射丙酸睾酮建立大鼠良性前列腺增生（BPH）模型,文冠果花提取物给药28 d后取大鼠前列腺组织,通过HE染色观察组织病理变化,免疫印迹法检测前列腺组织中Bcl-2/Bax/Caspase3、PI3K/AKT的蛋白表达水平。结果 文冠果花提取物在125～1000μg/mL的浓度范围内抑制BPH-1细胞的增殖（P<0.05）;在G0/G1期产生周期阻滞,细胞的凋亡率与文冠果花提取物给药浓度正相关;文冠果花提取物处理后的细胞Bcl-2蛋白表达水平明显下调,Bax和Caspase3蛋白表达水平显著提升,PI3K/AKT蛋白磷酸化水平显著下调（P<0.05）;在动物实验中,与模型组相比,文冠果花提取物中剂量组和高剂量组p-AKT、Bcl-2表达水平降低,Bax表达水...     

铜诱导神经元凋亡及凋亡相关蛋白的表达

目的观察铜对原代培养神经元的凋亡以及Bax、Bcl-2、caspase-3表达的影响,探讨铜沉积对肝豆状核变性神经系统的损伤机制。方法以不同浓度醋酸铜(0、2、20、40、80、160、240、320μmol/L)诱导体外培养大鼠神经元48 h。MTT比色法检测细胞活力,Hoechst 33342/PI和Annexin-V/PI法检测神经元凋亡;Western blotting测定细胞Bcl-2、Bax、caspase-3表达。结果神经元细胞活力随醋酸铜浓度的升高而显著降低。醋酸铜低浓度诱导组(0~80μmol/L),神经元凋亡数随铜浓度的增加而增多(P<0.01);caspase-3表达上调,Bcl-2表达下调,Bcl-2/Bax比值下降(P<0.01)。醋酸铜高浓度诱导组(≥160μmol/L),神经元坏死较凋亡更为明显。结论Bax、Bcl-2、caspase-3在低浓度铜诱导神经元凋亡过程中发挥重要的调控作用。神经元凋亡或死亡导致神经元减少可能与肝豆状核变性神经系统症状有关。     

大鼠全脑缺血再灌注损伤后调控基因Bcl-2、Bax的表达及与细胞凋亡的关系

目的:本研究旨在探讨Bcl-2及Bax蛋白在大鼠全脑缺血再灌注损伤中的变化及与细胞凋亡的关系。方法:雄性Wistar大鼠56只,随机分为假手术组、缺血15分钟再灌注1、6、12、24、48、72小时组。采用大鼠四条血管阻断方法制备大鼠全脑缺血再灌注模型。采用TUNEL法观察不同再灌注时间组海马CAl区细胞凋亡的变化。采用免疫组化法观察Bcl-2及Bax蛋白表达水平的变化。结果:脑缺血损伤后随再灌注时间延长凋亡细胞逐渐增多,至再灌注48小时达到高峰,72小时后减少。Bcl-2表达至再灌注12小时达高峰,再灌注24~72小时组逐渐减弱。Bax表达至48小时达高峰,再灌注72小时减少。结论:Bcl-2于再灌注早期表达增强,Bax于再灌注中期表达增强,Bcl-2/Bax比例失衡可能是大鼠全脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的机制之一。     

培补肝肾方药对帕金森模型小鼠黑质内Bax和Bcl-2表达的影响

目的：观察培补肝肾方药对帕金森模型小鼠黑质内Bax和Bcl-2表达的影响,探讨此方药预防帕金森病的机制。方法：成年C57-BL雄性小鼠分为对照组、模型组和中药治疗组。应用免疫组织化学染色技术,观察各组小鼠黑质内Bax和Bcl-2表达的变化情况。结果：Bax和Bcl-2阳性神经元主要位于黑质致密部,其中Bax和Bcl-2阳性神经元的数量在对照组和中药治疗组均较少且组间无显著差异;MPTP造模后,Bax阳性神经元的数量随时间明显递增,Bcl-2阳性神经元的数量亦呈逐渐递增的趋势。结论：培补肝肾方药可能通过抑制黑质神经元内Bax基因表达的途径抑制黑质神经元的凋亡,从而对帕金森病发挥预防和治疗作用。     

高压力对体外培养动脉中膜平滑肌细胞凋亡及其相关蛋白的影响

目的观察血管平滑肌细胞在单纯高压力作用下凋亡及其相关蛋白Bcl-2和Bax的变化,探讨力学因素在血管重建中的作用。方法应用血管体外应力培养系统,分别在压力100mmHg和160mmHg条件下培养猪颈总动脉1、4和7d,新鲜血管为对照。应用TUNEL法、透射电镜等观察血管平滑肌细胞的凋亡;用免疫组织化学方法检测血管平滑肌细胞内Bcl-2和Bax的表达。结果高压力作用下,血管平滑肌细胞凋亡第1d较多,而后逐渐减少;Bcl-2蛋白表达持续增强;Bax蛋白第1d较多,而后逐渐减少。结论高压力可以影响血管平滑肌细胞的凋亡,凋亡相关蛋白Bcl-2持续增加,Bax先增加后减少,揭示高压力可能通过调节Bcl-2和Bax来调控血管平滑肌细胞的凋亡。     

芍药苷对醋酸铅诱导海马神经元凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的 探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对醋酸铅诱导海马神经元凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法 分离培养胎鼠海马神经元细胞,细胞免疫荧光染色鉴定纯度。MTT测定海马神经元细胞活力以确定醋酸铅最适造模浓度及时间,同时筛选合适剂量PF干预海马神经元凋亡。依据MTT测定结果,分为空白组、模型组和20,40,80 μmol·L^-1 PF组干预海马神经元细胞,作用24 h后,加醋酸铅染毒,检测细胞色素C (cytochrome C,Cyt-C)含量、线粒体膜电位及细胞内Ca²⁺浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blotting测定海马神经元细胞中caspase-3、cleaved-caspase-3、caspase-8、cleaved-caspase-8、caspase-9、cleaved-caspase-9、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果 细胞免疫荧光染色鉴定结果显示分离培养的细胞为海马神经元细胞,且纯度较高。MTT测定结果显示醋酸铅最适造模浓度及时间为25 μmol·L^-1染毒24 h;PF剂量为20,40,80 μmol·L-1可显著改善海马神经元细胞活性,呈剂量依赖性。与空白组相比,模型组Cyt-C含量、凋亡率、细胞内Ca²⁺浓度显著升高(P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.01)。与模型组相比,40 μmol·L^-1 PF组和80 μmol·L^-1 PF组可降低Cyt-C含量、凋亡率、细胞内Ca²⁺浓度(P<0.05或P<0.01),升高线粒体膜电位(P<0.01),20 μmol·L^-1PF组可显著升高线粒体膜电位(P<0.05)。此外,一定剂量的PF可下调cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-9、Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达。结论 PF可抑制醋酸铅诱导的海马神经元凋亡,可通过调控Bcl-2/Bax蛋白表达发挥神经保护作用。     

大豆异黄酮对大鼠卵巢Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的 通过动物实验研究,观察B-cell lymphoma 2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2-associated X protein(Bax蛋白)在大鼠卵巢组织中的表达情况。方法 选用2月龄Wistar雌性大鼠50只,按体重随机分成5组:空白对照组(基础饲料),大豆异黄酮低、中、高剂量组[含量分别为100、200、300 mg/(kg.bw)]、雌激素组(EC)(己烯雌酚0.5 mg/kg),实验周期为7周;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组大鼠卵巢组织中Bcl-2蛋白和Bax蛋白水平。结果 空白对照组、大豆异黄酮低、中、高剂量组、雌激素组Bcl-2蛋白浓度分别为(1.41±0.19)、(1.43±0.20)、(2.07±0.58)、(2.42±0.32)、(2.95±0.78)pg/mL,组间差异均无统计学意义;Bax蛋白浓度分别为(33.64±5.83)、(30.02±9.44)、(17.33±4.21)、(9.67±1.95)、(10.69±4.95)pg/mL,其中大豆异黄酮高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大豆异黄酮可抑制大鼠Bax蛋白表达,对Bcl-2蛋白表达无影响。     

Sorafenib potentiates ABT-737-induced apoptosis in human oral cancer cells

ObjectiveThe mimetic BH3 ABT-737, a potent inhibitor of anti-apoptotic Bcl-2 family proteins, has potential as anti-cancer drug in many cancers. Recently, patients treated with ABT-737 have developed drug tolerance during cancer therapy. Therefore, we examined whether ABT-737 is effective in killing MC-3 and HSC-3 human oral cancer cells either alone or in combination with the oncogenic kinase inhibitor, sorafenib.DesignThe potentiating activities of sorafenib in ABT-737-induced apoptosis were determined using trypan blue exclusion assay, DAPI staining, cell viability assay and Western blot analysis.ResultsCombined use of ABT-737 and sorafenib synergistically suppressed cell viability and induced apoptosis compared with either compound individually. The combination of ABT-737 and sorafenib altered only Bax and Bak proteins and their activations, resulting in mitochondrial translocation of Bax from the cytosol. Additionally, combination treatment-mediated apoptosis may be correlated with ERK and STAT3 pathways.ConclusionsThese results suggest that sorafenib may effectively overcome ABT-737 resistance to apoptotic cell death, which can be a new potential chemotherapeutic strategy against human oral cancer.     

牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制及其机制的探讨

目的研究牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用并初步探索其机制。方法 MTT法检测牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用,RT-PCR检测BCL-2mRNA、Bax mRNA的表达。结果牛蒡多糖能明显抑制K562细胞的增殖;BCL-2基因表达下调,Bax的基因表达增多。结论牛蒡多糖对K562细胞增殖有抑制作用,其机制可能与BCL-2基因表达下调,Bax的表达上调有关。     

MOMP in the absence of BH3-only proteins

The minimum requirement for mitochondrial apoptosis has been controversial ever since the discovery of BCL-2 as a cell death regulator. In this issue of Genes & Development, O''Neill and colleagues (pp. 973–988) end a long-standing debate by creating a cellular system free of BCL-2 family proteins, thereby identifying the outer mitochondrial membrane rather than BH3-only proteins as the only requirement for BAX/BAK activation and mitochondrial outer membrane permeabilization (MOMP).