一株永生化口腔癌相关成纤维细胞系的建立及鉴定

背景:肿瘤相关成纤维细胞系是构成肿瘤微环境的重要细胞成分,但是在原代培养过程中极易老化和表型丢失,进而显著降低肿瘤相关成纤维细胞功能相关研究的实验重复性。目的:旨在建立一种永生化的口腔癌相关成纤维细胞系,为探索口腔癌中肿瘤相关成纤维细胞功能提供稳定的细胞实验材料。方法:采用酶消化法分离、纯化人口腔癌组织来源肿瘤相关成纤维细胞,利用包装有人端粒酶反转录酶(pBABE-hygro-hTERT)的慢病毒感染原代肿瘤相关成纤维细胞,鉴定其形态及其标志物,然后进行细胞增殖、衰老功能检测,对原代和永生化肿瘤相关成纤维细胞进行染色体核型分析、细胞系身份鉴定。结果与结论:(1)成纤维细胞永生化后,其标志物α-SMA、PDGFRβ以及FSP-1表达没有发现显著改变;(2)即使在传代15代后,永生化成纤维细胞的增殖速率明显优于非永生化成纤维细胞;(3)β-半乳糖苷酶染色结果显示:随着细胞代数增加,与非永生化成纤维细胞相比,永生化成纤维细胞未见明显衰老;(4)永生化成纤维细胞染色体核型仍保留正常细胞的基本特征,而未发生恶性转化;(5)短串联重复序列鉴定结果显示,永生化成纤维细胞为原代细胞,与已知细胞数据库信...     

大鼠肺鳞癌发生发展过程中肿瘤血管生成及血液供应研究

目的　探讨肺癌发生发展过程中肿瘤血管生成和血液供应 ,以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体Flk 1与肿瘤血管生成的关系。方法　 10 0只Wistar大鼠左肺下叶支气管灌注致癌质碘油 ,分批处死获取肺鳞癌癌变及进展期病变标本 ,使用油画颜料染成黄、绿两种颜色的液态硅橡胶分别灌注支气管动脉与肺动脉 ,免疫组化检测病变组织中VEGF、Flk 1的表达及vWF染色切片上的微血管密度 (MVD)。结果　经支气管动脉灌注黄色液态硅橡胶显示 ,肿瘤病灶呈黄色的新生血管团与曲张的支气管动脉相连通 ,镜下见癌巢间质肿瘤微血管腔充盈硅橡胶颗粒 ;经肺动脉灌注绿色液态硅橡胶 ,肿瘤区绿色的血管呈不连续的枯树枝、断枝、残枝状 ,与肿瘤血管不连续 ,镜下肿瘤微血管腔无硅橡胶颗粒。原位癌的MVD计数 ( 3 9.5 0± 12 .60 )与不典型增生 ( 8.92± 3 .80 )及侵袭癌 ( 61.0 5± 19.92 )比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。从支气管粘膜上皮增生→鳞状化生→不典型增生→原位癌→侵袭癌 ,VEGF和Flk 1阳性系数逐渐升高。MVD与VEGF和Flk 1表达均呈正相关 (r分别为 0 .9798和 0 .90 78,P <0 .0 0 5 )。结论　肺癌新生血管形成是大鼠肺鳞癌发生发展的重要现象 ,新生的肿瘤血管与支气管动脉相连通 ,与肺动脉不相连通 ,证明肺鳞癌发生     

宫颈液基细胞学检测在健康体检中的应用价值

目的 探讨液基薄层宫颈细胞检测(TCT)方法在宫颈病变中的诊断价值.方法 对来我院妇科体检及就诊的3067名妇女进行TCT检测,并进行TBS系统分类,对阳性者进行追踪随访,获得组织病理学结果.结果 3067人中共检出180例阳性,检出率5.9%.其中,意义不能明确的非典型鳞状细胞(ASC-US)112例,占3.7%;倾...     

卡瑞利珠单抗联合放射治疗局部晚期食管鳞癌的安全性和可行性研究

目的 探讨卡瑞利珠单抗联合放射治疗（放疗）局部晚期食管鳞癌（ESCC）的临床疗效和安全性。方法 选取宝鸡市中心医院医院接受根治性放疗的ESCC患者67例,根据治疗方式不同分为放疗组31例和联合组36例,放疗组单纯应用三维适形放疗技术,联合组采用卡瑞利珠单抗联合放疗,比较2组患者的客观缓解率、血清肿瘤标志物、生活质量及不良反应。结果 联合组客观缓解率（75%）高于放疗组（48%）,P<0.05）;治疗前2组患者血清癌胚抗原（CEA）、鳞状细胞癌抗原（SCC-Ag）和细胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）水平、生活质量量表（QLQ-C30）量表评分差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后联合组血清CEA、SCC-Ag、Cyfra21-1水平低于放疗组,差异有统计学意义（P<0.05）,QLQ-C30量表功能和总体生活领域评分高于放疗组,症状评分低于放疗组,差异有统计学意义（P<0.05）,2组患者间不良反应差异无统计学意义（P>0.05）。结论 卡瑞利珠单抗联合放疗方案治疗局部晚期ESCC,具有良好疗效和可控的不良反应,降低血清肿瘤标志物水平,改善患者预后。     

口腔白斑病癌变的血管生成基因芯片检测及表达验证

目的:研究口腔白斑发生发展中的血管生成基因表达谱,并验证关键基因表达.方法:对正常黏膜(n=3),低危白斑(n=4),高危白斑(n=4),早期鳞癌(n=6)进行转录组学芯片检测生物学作用为血管生成的相关基因,对4个关键基因表达进行了验证.结果:从高危白斑发展到鳞癌有151个基因,为全部异常表达基因占比18.9％.RT-...     

FEZ1基因在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

目的：探讨FEZ1基因在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义。方法：收集宫颈鳞癌标本102例,宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）66例,正常宫颈组织40例。通过免疫组织化学（immuno-histochemistry,IHC）方法检测各标本中FEZ1蛋白的表达情况,并分析其表达与宫颈鳞癌临床参数的关系。结果：FEZ1蛋白在正常宫颈组织中的阳性表达率显著高于CIN和宫颈鳞癌组织（P〈0.05）;FEZ1蛋白的表达随着癌组织分化程度的降低而显著降低（P〈0.05）,而与患者年龄、浸润深度、临床分期和有无淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论：FEZ1的表达缺失或下调可能与宫颈鳞癌的发生与演进有关。     

人口腔鳞癌耐药细胞株中药干预差异性蛋白表达

目的筛选中药成分干预人口腔鳞癌耐药细胞株KBV200前后差异性表达蛋白质。方法采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测5种中药对KBV200的细胞毒性,选择对细胞抑制率低于10%(IC10),即无细胞毒作用的浓度,联合200 ng/mL长春新碱(VCR)对KBV200细胞株进行干预;取干预前后的细胞总蛋白提取液,用表面加强激光解析电离-飞行时间质谱(SELD I-TOF-MS)和CM-10蛋白质芯片技术筛选差异性蛋白。结果质荷比2 000～50 000Da范围内,表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预KBV200前后共捕获13个差异蛋白质峰(均P<0.05),对于3997、4941、4968、5971、6084 Da 5个蛋白质峰,人口腔鳞癌细胞株KB表达较低,而KBV200表达明显升高(P<0.05),EGCG干预后表达明显降低(P<0.05);大黄素干预KBV200前后共捕获到6个差异蛋白质峰(P<0.05),对于4968,5971,6084 Da 3个蛋白质峰,KB表达较低,KBV200表达明显升高(P<0.05),大黄素干预后表达明显降低(P<0.05);未检测到两面针碱、板蓝根粗提物和岩黄连粗提物干预...     

沉默信息调节因子6与上皮细胞钙黏蛋白在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的:分析沉默信息调节因子6(SIRT6)与上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)在食管鳞癌组织及同一患者的癌旁正常组织中的表达及其临床意义。方法:选取2018年6月至2019年12月郑州大学附属洛阳中心医院胸外科收治的61例手术治疗食管鳞癌患者的癌组织及距肿瘤切缘3 cm以上的癌旁组织(镜下观察未见癌细胞),男42...     

淋巴细胞与中性粒细胞比值对食管鳞癌患者同步放化疗疗效及预后判断的临床意义

目的 探讨淋巴细胞与中性粒细胞比值(NLR)对食管鳞癌患者同步放化疗疗效及预后判断的价值。方法 选取2018年3月至2021年9月安徽省亳州市人民医院肿瘤科收治的122例食管鳞癌患者为研究对象,依据受试者工作特征曲线(ROC)中NLR最佳截断值分为低NLR组(n=82)及高NLR组(n=40)。分析放疗前NLR水平与食管癌患者同步放化疗疗效及预后之间的联系。结果 低NLR组患者临床有效率明显高于NLR组,差异有统计学意义(P<0.05);低NLR组与高NLR组患者间年龄、性别比较,差异无统计学意义(P>0.05),TNM分期具有统计学意义(P<0.05);Cox比例风险回归模型分析,影响患者预后的相关因素主要为NLR水平、TNM分期,多因素分析表明影响患者预后的独立危险因素为NLR水平、TNM分期;NLR对食管鳞癌预后具有一定的诊断价值(P<0.05)。结论 淋巴细胞与中性粒细胞比值对食管鳞癌患者同步放化疗疗效及预后具有一定的预测价值。