牵张成骨术整复猕猴腭裂骨桥蛋白与骨钙蛋白表达研究

目的 以牵张成骨术整复猕猴腭裂骨缺损,定量分析新骨在不同时期骨桥蛋白(osteopetin,OPN)与骨钙蛋白(osteocalcin,OC)的表达水平,探讨新骨生成与改建的规律.方法 以猕猴为对象建立腭裂动物模型.实验组动物21只行牵张成骨术整复其聘部软硬组织缺损,关闭裂隙后固定.固定期第1、2 4、6、8、12及24周分别取材,各3只动物.采用实时定量PeR法(real-time,RT-PCR)定量比较OPN与OC的mRNA表达水平,并以酶联免疫吸附试验法(ELISA)定量分析其OPN与OC含量,与实验对照组及健康对照组(各2只动物)结果进行比较.结果 固定期第2周OPNmRNA表达上调,第4周达最高(7.59±0.37);而OC mRNA表达则自第4周开始上调(4.98±0.21),第6周时达最大值(7.94±0.31);随后开始下降,至第24周时两者的mRNA表达水平接近健康对照组(P>0.05).ELISA结果显示:固定期第4、6周OPN分别为(4.75±0.15)ng/mg和(4.86±0.09)ng/mg,OC分别为(3.18±0.16)ng/mg和(3.63±0.33)ng/mg,两者均为高水平表达.至第8～12周以后蛋白表达趋势与其对应mRNA表达基本一致.结论 应用牵张成骨术整复腭裂骨缺损,其牵张区域新骨生成,裂隙被骨运送盘移动封闭,腭部裂隙被完全修复.     

微应变环境下柚皮苷对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的 探讨在微应变环境下,柚皮苷体外对培养的骨髓间充质干细胞（MSCs）向成骨细胞分化的影响及其机制。方法 将体外培养的兔MSCs接种于硅橡胶膜上,利用EF3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应舱系统,对细胞进行周期性循环牵张微应变（微应变）加载。实验分成8组：对照组（常规培养）,微应变组,柚皮苷不同质量浓度（2、20、200 ng/mL）组,微应变＋柚皮苷（2、20、200 ng/mL）组。流式细胞仪检测各组MSCs的增殖指数;RT-PCR检测各组MSCs骨钙蛋白（OCN）、成骨特异性转录因子（Runx 2）与I型胶原（Col I）基因的表达。结果 在微应变环境下,柚皮苷使MSCs呈现明显的极性排列趋向,且细胞长轴平行力学刺激方向;显著提高MSCs的增殖活性;柚皮苷200 ng/mL显著上调OCN基因表达;不同质量浓度的柚皮苷均显著上调Runx 2基因表达,且与质量浓度呈正相关;低质量浓度柚皮苷促进Col I基因表达,而高质量浓度柚皮苷抑制了Col I基因的表达。结论 柚皮苷可增强在微应变环境下MSCs的增殖并能够促进其向成骨分化。     

重组慢病毒载体转染羊骨髓间充质干细胞及成骨基因表达量的变化简

背景：碱性成纤维细胞生长因子具有促进骨髓基质细胞分裂增殖作用,而骨形态发生蛋白2在诱导新骨形成方面有重要的研究意义。目的：分析骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子基因单独和联合转染对体外培养的骨髓间充质干细胞的增殖和骨向分化的影响,比较Ⅰ型胶原蛋白、骨钙蛋白、骨桥蛋白等非特异性成骨基因于转染前后骨髓间充质干细胞相对表达量的差别,为构建组织工程骨的种子细胞做理论依据。 方法：构建碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2慢病毒载体,分别转染羊骨髓间充质干细胞,得到碱性成纤维细胞生长因子组、骨形态发生蛋白2组、联合组、对照组细胞,提取RNA后采用实时定量PCR的方法检测Ⅰ型胶原蛋白、骨钙蛋白、骨桥蛋白等非特异性成骨基因的mRNA水平相对表达量的变化。 结果与结论：对照组、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2及联合组4组间非特异性成骨基因表达量存在明显差异（P ＜0.05）,且碱性成纤维细胞生长因子和骨形态发生蛋白2具有交互作用（P ＜0.05）,碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2联合组的Ⅰ型胶原蛋白和骨钙蛋白基因表达量明显高于其他3组,且差异有显著性意义（P ＜0.05）;但是骨桥蛋白基因中差异无显著性意义（P ＞0.05）。体外实验结果显示联合转染组中的Ⅰ型胶原蛋白、骨钙蛋白、骨桥蛋白等非特异性成骨基因mRNA水平相对表达量较多,该组细胞的成骨功能最强,适合作为组织工程骨的种子细胞。     

强骨生血口服液联合骨化三醇治疗绝经后骨质疏松的临床研究

目的 探讨强骨生血口服液联合骨化三醇治疗妇女绝经后骨质疏松的临床疗效。方法 选取2022年6月—2023年6月在武汉市中医院诊治的124例绝经后骨质疏松患者，随机分为对照组（62例）和治疗组（62例）。对照组患者口服骨化三醇胶丸，0.25 µg/次，2次/d。在对照组的基础上，治疗组口服强骨生血口服液，30 mL/次，3次/d。两组患者连服12周。观察两组患者临床疗效，比较治疗前后两组患者症状好转时间，骨代谢指标骨钙蛋白（BGP）、骨碱性磷酸酶（BALP）、骨保护素（OPG）和N-端骨钙素（N-MID）水平及血清胰岛素样生长因子-1（ICF-1）、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果 治疗后，治疗组临床总有效率为98.39%，明显高于对照组（83.87%，P＜0.05）。治疗后，治疗组症状好转时间均明显短于低于对照组（P＜0.05）。治疗后，两组患者BGP、BALP、OPG和ICF-1水平明显升高，而N-MID、IL-6、TNF-α、CRP水平明显降低（P＜0.05），且治疗组这些指标水平明显好于对照组（P＜0.05）。结论 强骨生血口服液联合骨化三醇治疗效果确切，能显著缓解临床症状，有效提高骨代谢能力，并促进机体炎症反应减弱。     

流体剪切力对人脂肪基质细胞成骨相关基因表达影响的研究

目的 探讨流体剪切力(FSS)对人脂肪基质细胞(ADSC)成骨相关基因骨钙素(OCN)、转录因子Osterix(Osx)及核心结合因子(Cbf) al/Runt相关转录因子(Runx)2表达的影响.方法 将脂肪抽吸术获取的人体脂肪进行常规培养(A1、A2组)和诱导培养(A3、A4组),然后分别对其加载强度为0.3 Pa的FSS(A1、A3组),未加FSS的为对照组(A2、A4组),通过逆转录-聚合酶链反应检测骨钙素、转录因子Osx及Cbfal/Runx2基因表达的情况.结果 A3、A4组在FSS加载后,其成骨相关基因的表达增强;而A1、A2组未见成骨特异性基因条带.这表明在常规培养条件下,无论是否有FSS的刺激,均无成骨特异性基因表达.结论 脂肪基质细胞在诱导培养条件下,FSS可促使其向成骨细胞分化,可作为骨组织工程的种子细胞.     

miR-132-3p过表达对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响

文题释义： miRNA：是一类小的非编码RNA,长度约为22个核苷酸,其主要通过结合靶标mRNA的3'UTR区诱导靶标mRNA降解或抑制其翻译,从而在转录及转录后水平调控相关基因的表达。miRNA在细胞增殖、分化及凋亡等多种生物学活动过程中起着非常重要的调控作用,并且发现它是调控骨组织细胞增殖和分化过程的重要因子之一。 MC3T3-E1细胞：是新生C57BL/6小鼠颅顶骨中分离培养所建立的一株成骨细胞株,它能够展现骨组织中成骨细胞的各个发育阶段和各种生物学特性。作为研究成骨细胞增殖和分化的理想模型,被广泛应用于国内外各种骨组织工程学研究。 背景：机械牵引力能够影响MC3T3-E1细胞的增殖分化过程,并引起细胞内miR-132-3p的差异表达。然而,牵引力是否通过调控miR-132-3p的表达来影响成骨细胞增殖分化仍需进一步研究。 目的：明确12%牵引力作用下MC3T3-E1细胞中成骨分化标志因子及miR-132-3p表达变化,并进一步探讨miR-132-3p对细胞增殖分化的影响。 方法：MC3T3-E1细胞分别加载0%,12%牵张应力,检测应力加载后碱性磷酸酶活性、骨钙蛋白及miR-132-3p mRNA的表达水平;细胞内瞬时转染miR-132-3p模拟物及其阴性对照,qRT-PCR检测转染后碱性磷酸酶、骨钙蛋白、Runt标志转录因子2 mRNA的表达,CCK-8法检测miR-132-3p对细胞增殖能力的影响。 结果与结论：①12%牵张应力作用下,MC3T3-E1细胞中碱性磷酸酶活性、骨钙蛋白mRNA表达水平下调(P < 0.01),miR-132-3p表达水平显著升高(P < 0.05);②细胞内转染miR-132-3p后,miR-132-3p模拟物组成骨分化标志因子碱性磷酸酶、骨钙蛋白、Runt标志转录因子2 mRNA表达水平显著降低(P < 0.05);③相比于阴性对照组,miR-132-3p 模拟物转染24,48,72 h后细胞增殖能力明显降低(P < 0.001),且在转染48 h后降低最明显;④结果说明12%周期性循环牵张应力能够通过过表达miR-132-3p负向调节MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化。 ORCID: 0000-0003-0696-3329(孙芬) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

机体维生素K营养状况评价指标的研究进展

维生素Ｋ的发现者Ｄａｍ最初认为维生素Ｋ只参与凝血 ,于是称之为凝血性维生素。几十年来维生素Ｋ也一直被作为抗凝剂使用。维生素Ｋ缺乏可导致出血 ,而维生素Ｋ能有效改善这种出血。人们似乎不再把维生素Ｋ视为营养素。在传统临床医学实践中 ,通过测定依赖维生素Ｋ的凝血因子或凝血酶原时间、部分凝血活酶时间、凝血试验等来了解机体凝血功能状况。当凝血因子浓度或活性下降、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间延长、凝血试验为服用维生素Ｋ所纠正 ,认为机体凝血功能异常 ,可能有维生素Ｋ缺乏。机体维生素Ｋ营养状况的评价是由评价机体凝血功…     

大鼠牙移动中骨钙蛋白和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在牙周组织的表达及其相关性研究

近年来。关于正畸牙移动过程中牙周组织改建的分子生物学机制越来越受到正畸科医生的关注．研究发现骨钙蛋白（OCN）是骨中最丰富的非胶原蛋白质之一,由成骨细胞合成和分泌。是成骨细胞特异性标志。OCN具有骨代谢调节激素作用,参与调节骨转化过程,其mRNA水平的高低与成骨直接相关。半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatinc）有促进骨形成、抑制骨吸收等作用[43,在牙龈炎和牙周炎患者中CystatinC含量很高。本实验旨在研究正畸牙移动过程中OCN和CystatinC表达的时间分布特点．及二者相关性的研究．进一步探讨牙周组织改建过程中的分子生物学机制,从而为临床提供指导。     

125 机体维生素K营养状况评价指标的研究进展

传统评价机体凝血功能的指标包括维生素K依赖凝血因子含量或活性、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间、凝血试验等.这些均为功能性指标,只能反映临床水平的维生素K缺乏.这些指标异常时表明机体维生素K缺乏已达到严重程度.近十几年来,生物化学和检测技术的进步极大地推动了维生素K的研究,揭示了维生素K生化作用机制,建立了维生素K检测技术,发现了凝血酶原前体蛋白、羧化不全骨钙蛋白等新的蛋白质,使从生化水平了解机体维生素K营养状况成为可能.