骨髓间充质干细胞对高低转移潜能肝癌细胞影响的实验研究

目的观察人骨髓间充质干细胞(hMSC)对高低转移潜能肝癌细胞(MHCC97-H和MHCC97-L)侵袭能力和增殖能力的影响。方法 Transwell法检测hMSC对高低转移潜能肝癌细胞侵袭能力的影响,下室加入培养基和hMSC,上室加入高低转移潜能肝癌细胞悬液,共培养36 h,酶标仪吸光度(optical density,OD)值检测及细胞计数法观察侵袭能力的变化。CCK-8法检测hMSC对高低转移潜能肝癌细胞增殖能力的影响。PCR检测共培养前后转移相关因子骨桥蛋白(OPN)、唾液酸蛋白(BSP)、α-V基因、增殖相关基因TGFβ1和PDCD4的表达差异。结果 (1)侵袭能力检测结果:与对照组比较,镜下观察实验组高低转移潜能肝癌细胞迁移数量明显减少,OD值两组比较差异有统计学意义(P0.05)。MHCC97-H与hMSC共培养后OPN、BSP表达明显下降(P0.05),而α-V表达无明显变化(P0.05)。MHCC97-L与hMSC共培养后OPN、BSP、α-V表达均显著下降(P0.05)。(2)增殖能力检测结果:与对照组比较,实验组高低转移潜能肝癌细胞OD值明显增高(P0.05),实验组TGFβ1基因表达上调(P0.05),而PDCD4基因表达在两组间差异无统计学意义(P0.05),在MHCC97-L实验组PDCD4基因表达上调(P0.05)。结论 hMSC使高低转移潜能肝癌细胞的侵袭能力下调,增殖能力增强。     

骨桥蛋白在不同种植方式种植义齿骨界面改建中的变化及意义

目的:对比埋植型与非埋植型种植体在义齿修复受载后种植体-骨界面中骨桥蛋白表达变化的异同。方法:选用纯系动物Beagle犬8只,在其下颌分别植入埋植型与非埋植型种植体,采用固定金属全冠行种植义齿修复,分不同时期处死动物。采用免疫组化方法,对修复后不同时期埋植型与非埋植型种植体-骨界面骨桥蛋白进行动态观察,比较两者之间的异同。结果:免疫组化观察发现,种植义齿修复受载后,随着种植体周围骨组织发生改建,种植体-骨界面表达骨桥蛋白较未修复对照组明显增强。2周时界面骨桥蛋白有表达,但与对照组无差异;4周和8周时明显高于对照组,并于8周时达到高峰;12周时恢复到与对照组相近。埋植型和非埋植型种植体之间无显著差异。结论:埋植型和非埋植型种植体在义齿修复受载后,所承受的机械负荷均能经过种植体传递至周围骨组织,刺激种植体-骨界面骨桥蛋白表达。     

正畸力作用下大鼠牙周组织中骨桥蛋白的表达

目的：观察SD大鼠正畸牙齿移动过程中牙周组织内骨桥蛋白（osteopontin,OPN）的表达,探讨OPN在正畸牙齿移动过程及成骨方面的作用和机制。方法：选用6～8周龄雄性SD大鼠40只,以左侧上颌第一磨牙为实验组,右侧上颌第一磨牙不加力为对照组,通过自制的加力装置牵引移动大鼠的磨牙,分别在加力后8h、24h、3d、7d处死实验动物,即刻取上颌骨制备组织标本,通过免疫组织化学方法检测SD大鼠牙周组织中OPN的表达。结果：实验组大鼠牙周膜中张力侧OPN表达明显高于对照组,3d、7d组差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：在正畸治疗牙齿移动过程中,OPN参与牙周组织的改建并与新骨的形成相关。     

OPN和VEGF-C在胃癌中的表达及其临床意义

目的:评价骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)在胃癌中表达及与临床病理参数之间相关性,进一步探讨二者的共表达在胃癌淋巴结转移中的机制.方法:收集复旦大学附属中山医院手术切除胃癌组织标本及患者相关临床资料,对纳入研究的93例胃癌原发灶标本采用免疫组织化学染色法(EnVision二步法),检测OPN与VEGF-C蛋白的表达.结果:93例胃癌组织中OPN与VEGF-C的阳性表达率分别为64.5%(60/93)和69.9%(65/93),在非肿瘤性胃黏膜中均未见其阳性表达;OPN和VEGF-C的表达与胃癌浆膜侵犯、TNM分期以及淋巴结转移呈明显相关(P<0.05).蛋白之间的相关性分析显示,OPN与VEGF-C之间存在正相关(r=0.493,P<0.01).结论:联合检测OPN与VEGF-C有助于阐述胃癌发生发展、浸润转移的机制,OPN可能通过上调VEGF-C的表达促进胃癌的淋巴结转移.     

胰高血糖素样肽-1类似物对高糖诱导下肾小管上皮细胞Toll样受体4、骨桥蛋白表达的影响

目的 研究胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物对高糖诱导下的肾小管上皮细胞中Toll样受体4(TLR4)、骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,将其分为低糖组、高糖组、高渗透压组、低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组.干预48 h后采用细胞免疫化学法、RT-PCR法分别检测各组细胞中TLR4、OPN蛋白和mRNA的表达情况.结果 低糖组和高渗透压组TLR4、OPN蛋白和mRNA呈低表达,且表达无明显差异;高糖组TLR4、OPN蛋白及mRNA表达较低糖组明显增高;Exendin-4干预后TLR4、OPN的蛋白及mRNA的表达明显降低,且呈剂量依赖性,明显低于高糖组,但仍高于低糖组.结论 GLP-1类似物可通过抑制TLR4、OPN的表达来抑制免疫炎症反应对肾脏的损害,且GLP-1类似物的这种保护作用呈剂量依赖性.     

抗OPN抗体干预感染泡球蚴沙鼠后细胞因子水平的动态变化

目的观察人工接种泡球蚴(EM)沙鼠在抗骨桥蛋白(OPN)抗体干预下体内白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-5和IL-10水平动态变化,探讨抗OPN抗体对泡球蚴感染免疫机制的影响。方法采用开腹直视下肝脏穿刺注射的方法,用20%泡球蚴组织混悬液感染长爪沙鼠180只,每只0.1ml,建立肝泡球蚴病(AE)沙鼠模型。将感染沙鼠随机分为实验组、对照组和空白组,每组60只。实验组沙鼠接种泡球蚴后当天经尾静脉注射抗OPN抗体,每次0.15ml,每隔两日注射一次,注射7次后,每隔1周注射一次;对照组沙鼠经尾静脉注射兔血清(时间和剂量同上);空白组为单纯模型组。分别于感染1、20、40、60、80和100d后,各组随机选取10只沙鼠,摘眼球取血,离心,收集血清,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-2、TNF-α、IL-5和IL-10含量。结果感染100d时实验组IL-10为(77.93±4.13)pg/ml,对照组为(82.46±4.24)pg/ml,空白组为(84.69±5.57)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05),其余各时间段的IL-10水平及各时间段其他3种细胞因子水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Th1细胞介导的细胞免疫与Th2细胞介导的体液免疫共同参与宿主抗肝泡球蚴免疫。抗OPN抗体可能对血清IL-10表达水平有一定的抑制作用。     

骨桥蛋白在关节疾病中的表达及其意义

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种多功能的细胞外基质蛋白,因最初作为骨组织中一种非胶原基质蛋白被发现而得名[1]。OPN可以广泛参与多种生理和病理过程,包括炎症反应、免疫调节、组织修复、骨的发生发育和重建及肿瘤等[2～5]。同时,多种类型细胞如破骨细胞、软骨细胞、滑膜细胞、内皮细胞及     

乌苯美司联合XEC化疗方案治疗三阴性乳腺癌的临床研究

目的探讨乌苯美司联合XEC化疗方案治疗三阴性乳腺癌患者的临床疗效及其对外周血T淋巴细胞亚群及血清骨桥蛋白(OPN)水平变化的影响。方法选取河南科技大学第一附属医院2015年6月—2017年1月收治的三阴性乳腺癌患者83例,随机分成对照组(41例)和治疗组(42例)。对照组患者给予XEC化疗方案治疗,第1天静脉滴注注射用环磷酰胺500 mg/m~2,同时静脉滴注注射用盐酸表柔比星100 mg/m~2,第1~14天口服卡培他滨片1 g/m~2,疗程为21 d。治疗组在对照组的基础上口服乌苯美司片,30 mg/次,1次/d,疗程为21 d。两组均持续治疗4个疗程。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者SF-36评分、外周血T淋巴细胞亚群表达水平和OPN水平。结果治疗后,对照组和治疗组临床总有效率分别为75.61%、95.24%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组躯体疼痛、躯体功能、睡眠质量、生命活力、生理职能、心理健康等生活质量评分均显著升高,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组生活质量评分显著高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者CD~(3+)、CD~(4+)、CD~(4+)/CD~(8+)水平均显著升高,CD~(8+)水平显著下降,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组T淋巴细胞亚群水平显著优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组血清OPN水平显著下降,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组血清OPN水平显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论乌苯美司联合XEC化疗方案治疗三阴性乳腺癌患者效果显著,可有效改善患者外周血T淋巴细胞亚群和血清OPN水平,且安全性较高,具有一定的临床推广应用价值。     

复方氯己定含漱液对种植义齿后种植体周围龈沟液中骨桥蛋白和碱性磷酸酶水平的影响

目的：探讨种植义齿后复方氯己定含漱液含漱对种植体周围龈沟液中骨桥蛋白（OPN）和碱性磷酸酶（ALP）水平的影响。方法：20例种植义齿患者随机分为A、B两组,每组10例,每位患者种植义齿1颗。A组患者义齿种植术后应用0.12%复方氯己定含漱液漱口,每次15 ml,早晚刷牙后含漱。B组患者只于早晚刷牙后清水漱口。两组均在种植术前2h及种植术后1.5个月采集种植体龈沟液1次,采用Western-boltting法检测OPN的表达,酶联免疫吸附法（ELISA）检测ALP水平。结果：两组患者种植义齿前OPN和ALP的表达差异无显著性（P〉0.05）,种植术后A组OPN和ALP的水平明显低于B组术后,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：种植义齿术后用复方氯己定含漱液含漱能够明显降低种植体周围龈沟液中OPN及ALP表达,有利于种植牙的成功种植。     

骨桥蛋白血清白细胞介素-8与狼疮肾炎的病理临床关系

骨桥蛋白（osteopotin，OPN）与系统性红斑狼疮（SEE）的临床活动有关，白细胞介素8（interleukin-8，IL-8）与狼疮肾炎（Lupus Nephritis，LN）的肾损害关系密切。为了探讨狼疮肾炎（LN）患者肾小管OPN表达和血浆IL-8的浓度及其意义，本研究检测了LN患者的OPN，并分析其表达与病理分型、临床表现和血清IL-8的关系。