注射HBsAg-SCT质粒的HBV转基因小鼠血清转氨酶的检测分析

目的研究注射HBsAg-SCT质粒的HBV转基因小鼠血清中转氨酶水平的变化。方法选取遗传背景相同的HBsAg阴性正常鼠30只作为正常对照组,HBV转基因鼠30只为实验1组,注射HBsAg-SCT质粒的HBV转基因小鼠30只为实验2组。采集各组小鼠在8周龄时的血液,用全自动的生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶水平。结果实验1组(HBV转基因小鼠未注射HBsAg-SCT质粒组)和实验2组(HBV转基因小鼠注射HBsAg-SCT质粒组)小鼠的血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶与正常对照组比较,均显著升高(P<0.01);实验1组小鼠的血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶与实验2组比较,无明显差异(P>0.05)。结论注射HBsAg-SCT质粒的HBV转基因小鼠血清转氨酶水平明显高于正常小鼠;但与未注射HBsAg-SCT质粒HBV转基因小鼠无明显差异。     

丁苯酞对肌萎缩侧索硬化模型小鼠的生存期、细胞周期蛋白依赖激酶5和P35表达的影响

目的观察丁苯酞对hSOD1G93A转基因小鼠的生存期及对脊髓前角细胞周期蛋白依赖激酶5(CDK5)、P35表达的影响。方法肌萎缩侧索硬化模型hSOD1G93A转基因小鼠24只,随机分为丁苯酞组和安慰剂组(均n=12,雌雄各半),6周龄时分别给予丁苯酞180 mg·kg-1·d-1和玉米油10 mL·kg-1·d-1灌胃,每日1次,观察两组的发病时间及生存期;另取hSOD1G93A阴性小鼠12只作为阴性对照组;通过甲苯胺蓝染色比较终末期两组小鼠脊髓前角运动神经元数目,通过免疫组化、免疫印迹法观察干预前后脊髓前角CDK5、P35的分布、表达情况。结果与安慰剂组相比,丁苯酞组可推迟转基因小鼠发病时间(P<0.05),显著延长小鼠的生存期(P<0.01);终末期残存的脊髓前角运动神经元数量明显增加(P<0.01);免疫组化显示丁苯酞可减少胞浆内CDK5免疫沉积,阳性神经元数量明显增多(P<0.05);免疫印迹结果显示两组CDK5蛋白表达无显著差异(P>0.05),丁苯酞组P35的表达显著增加(P<0.01)。结论丁苯酞可以推迟hSOD1G93A转基因小鼠的发病时间并延长小鼠的生存期,减少脊髓前角运动神经元丢失,增加了细胞膜P35/CDK5的表达。     

Potassium 2-（1-hydroxypentyl）-benzoate promotes long-term potentiation in Aβ1-42-injected rats and APP/PS1 transgenic mice

Aim： Potassium 2-（1-hydroxypentyl）-benzoate （d/-PHPB） is a new drug candidate for ischemic stroke. The aim of this study was to investigate the effects of dI-PHPB on memory deficits and long-term potentiation （LTP） impairment in animal models of Alzheimer＇s disease. Methods： The expression of NMDA receptor subunits GluN1 and GluN2B in the hippocampus and cortex of APP/PS1 transgenic mice were detected using Western blot analysis. Memory deficits of the mice were evaluated with the passive avoidance test. LTP impairment was studied in the dentate region of Aβ1-42-injected rats and APP/PS1 transgenic mice. Results： APP/PS1 transgenic mice showed significantly lower levels of GluN1 and p-GluN2B in hippocampus, and chronic administration of dI-PHPB （100 mg·kg-1·d1, po） reversed the downregulation of p-GluN2B, but did not change GluN1 level in the hippocampus. Furthermore, chronic administration of d/-PHPB reversed the memory deficits in APP/PS1 transgenic mice. In the dentate region of normal rats, injection of dI-PHPB （100 μmol/L, icv） did not change the basal synaptic transmission, but significantly enhanced the high-frequency stimulation （HFS）-induced LTP, which was completely prevented by pre-injection of APV （150 μmol/L, icv）. Chronic administration of dI-PHPB （100 mg·kg-1·d-1, po） reversed LTP impairment in Aβ1-42 -injected normal rats and APP/PS1 transgenic mice. Conclusion： Chronic administration of d/-PHPB improves learning and memory and promotes LTP in the animal models of Alzheimer＇s disease, possibly via increasing p-GluN2B expression in the hippocampus.     

淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对阿尔采末病转基因动物模型的学习记忆能力及病理学影响

目的观察淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的学习记忆能力及病理学影响。方法 6月龄♂APPswe/PS1ΔE9双转基小鼠20只,随机分为模型组和复方组。复方组灌胃给予淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方3个月,模型组给予等量生理盐水。6月龄♂C57BL/6J小鼠10只为阴性对照组。灌胃结束后,采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力情况,并于水迷宫后灌注处死各组小鼠,采用改良Bielschowsky银染法以及尼氏染色法观察小鼠大脑组织病理学变化。结果水迷宫定位航行实验结果显示,APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的逃避潜伏期与C57对照组小鼠相比明显延长(P<0.05),复方组小鼠的逃避潜伏期与模型组小鼠相比明显缩短(P<0.05);空间探索实验结果显示,APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠与C57对照组小鼠相比跨台次数减少(P<0.05),复方组小鼠跨台次数与模型组小鼠相比明显增多(P<0.05)。APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠的游泳速度与C57对照组小鼠相比增大(P<0.05),复方组小鼠的游泳速度与模型组小鼠相比差异无显著性(P>0.05)。改良Bielschowsky银染法结果显示,C57对照组小鼠大脑皮质未见明显改变,神经原纤维排列有序、稀疏。模型组小鼠大脑皮质神经原纤维增粗、肿胀,密集成宽带状,深染,神经纤维缠结明显,分布有大量老年斑,复方组小鼠大脑皮质神经纤维缠结情况减轻,可见少量老年斑。尼氏染色结果显示,C57对照组小鼠海马各区神经细胞排列整齐且密集,胞质中尼氏体丰富,大脑皮层尼氏小体呈深蓝色,细胞核淡蓝色,背景略呈浅蓝色;模型组小鼠神经元水肿,细胞数量减少,排列稀疏,细胞间隙增大,胞质内尼氏体减少,分界不清,染成淡蓝色;复方组小鼠较模型组小鼠神经元水肿减轻,细胞数量增多,排量相对整齐,分界清晰。结论APP/PS1双转基因AD小鼠能够较好地模拟AD患者的表现及病理过程,提供有效的实验动物模型。淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方可以有效地改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的学习记忆能力,减轻其大脑皮质神经纤维缠结、老年斑以及神经元水肿等改变。     

Blood-testis barrier and spermatogenesis： lessons From genetically-modified mice

The blood-testis barrier （BTB） is found between adjacent Sertoli cells in the testis where it creates a unique microenvironment for the development and maturation of meiotic and postmeiotic germ cells in seminiferous tubes. It is a compound proteinous structure, composed of several types of cell junctions including tight junctions （TJs）, adhesion junctions and gap junctions （GJs）. Some of the junctional proteins function as structural proteins of BTB and some have regulatory roles. The deletion or functional silencing of genes encoding these proteins may disrupt the BTB, which may cause immunological or other damages to meiotic and postmeiotic cells and ultimately lead to spermatogenic arrest and infertility. In this review, we will summarize the findings on the BTB structure and function from genetically-modified mouse models and discuss the future perspectives.     

乙肝病毒X基因转基因树鼩模型的建立和病理学研究

目的:探索以精原细胞作为载体建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型的可行性.方法:首先构建带乙肝病毒pcDNA3.1- HBx基因的表达载体;然后以脂质体2000包被之.将此复合物以微量注射器注入8只雄性树鼩之睾丸组织中,1周后重复注射1次.注射后6周,使处理过的雄树鼩与雌性树鼩交配.在仔树鼩出生后1个月,取其肝组织作活检,并以多聚酶链式反应(PCR)对其DNA表达进行鉴定,观察其内是否存在乙肝病毒X基因.结果:处理的8只雄性树鼩中,6只具有生育能力,产仔树鼩11只.其中,1只仔树鼩乙肝病毒X基因阳性(阳性率9.09%).基因测序结果证实为乙肝病毒X基因.病理检查结果显示仔树鼩肝组织的改变包括:肝细胞坏死、慢性炎细胞在汇管区的浸润.结论:以精原干细胞作为载体,建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型是可行的.     

α7神经型尼古丁受体激动剂PNU282987对APP/PS1小鼠海马组织中DYN-Ⅰ蛋白表达的影响

目的研究特异性激动APP/PS1转基因小鼠脑组织中α7神经型尼古丁受体(α7 nAChR)水平后对海马组织DYN-Ⅰ蛋白的影响;探讨α7 nAChR在阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)发病机制中的神经保护作用机制。方法实验动物分为对照组(Control)、野生加PNU282987组(WP)、APP/PS1转基因组(APP/PS1)和APP/PS1加PNU282987组(AP)各8只,WP和AP组给予α7 nAChRs特异性激动剂PNU-282987,另两组给予生理盐水,给药方式为小鼠24 w龄时1 mg/kg腹腔注射PNU-282987,连续5 d。采用Real-time PCR法和蛋白免疫印迹(Western Blot)法分别测定小鼠海马组织中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白表达水平的变化。结果与control组相比,APP/PS1组海马组织中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白水平下降(P0.05,P0.01);而特异性激动α7 nAChR水平后,与对照组相比WP组中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白水平升高(P0.05,P0.01);与APP/PS1组相比AP组小鼠大脑海马组织中发动蛋白Ⅰ(DYN-Ⅰ)mRNA和蛋白水平明显升高(P0.01,P0.01)。结论特异性激动APP/PS1转基因小鼠海马组织中α7 nAChR水平能够使网格蛋白内吞调节蛋白DYN-Ⅰ表达升高。这可能提示了α7 nAChR对突触有一定的保护作用,进一步说明α7 nAChR在阿尔茨海默病的发病中起着重要作用。     

HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞功能与PD1、CD28表达分析

目的研究HBV转基因小鼠肝脏中NKT细胞的功能与表面PD1、CD28表达的关系。方法分离小鼠肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结单个核细胞,利用流式细胞检测技术,分别检测其淋巴细胞中NKT细胞的频率,同时检测肝脏NKT细胞PD1、CD28的表达及IFN-γ、IL-4的分泌功能,比较肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结这几个主要免疫组织淋巴细胞中NKT细胞所占的比例,并分析肝脏NKT细胞PD1、CD28的表达与细胞功能的关系。结果与正常同品系小鼠比较,HBV转基因小鼠肝脏、脾脏、胸腺和腹膜淋巴结NKT细胞数量明显减少(P<0.05),与脾脏、胸腺和腹膜淋巴结相比,肝脏淋巴细胞中含有大量的NKT细胞;与正常同品系小鼠比较,HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞PD1的表达明显增多(P<0.05),CD28的表达明显减少(P<0.05),肝脏NKT细胞IFN-γ、IL-4的分泌功能明显降低(P<0.05)。结论肝脏中含有大量的NKT细胞,HBV转基因小鼠肝脏NKT细胞的功能存在明显的缺陷,并提示PD1的增加和CD28的降低可能与NKT细胞功能的下调密切相关。     

2007年度《中国中西医结合杂志》优秀论文评选结果揭晓

中国中西医结合杂志2007年度优秀论文评选工作现已结束,经全国数十位专家对本刊2007年度论文认真审阅,评选出优秀论文3篇。现公布如下。1血瘀证及其兼证与冠脉造影所示病变及介入治疗后再狭窄的相关性研究,2007,27(1):8-13,中日友好医院全国中西医结合心血管病中心,徐浩,等。2人参、银杏叶提取物对PDAPPV717I转基因小鼠海马乙酰胆碱和单胺类神经递质水平的影响,2007,27(9):810-813,中国中医科学院西苑医院实验研究中心,丛伟红,等。3小檗碱抑制核因子NF-κB p65表达及转位改善游离脂肪酸诱导的3T3-L1细胞胰岛素抵抗的分子机制,2007,27(12):1099-     

不同萃取方法对番茄籽油理化性质与脂肪酸含量的影响

分别采用超临界ＣＯ２萃取技术和传统溶剂法从番茄籽中萃取脂肪油，经过甲酯化处理后，用气相色谱法分析出亚油酸等５种脂肪酸占总脂肪酸的９８．５％．同时对油的其它理化指标进行了测定。对测定结果进行了比较分析，说明超临界ＣＯ２萃取所得番茄籽油品质更好。并对番茄籽油的营养学机理作了讨论。