肥大细胞的酪氨酸激酶与抗过敏药物的分子靶向

肥大细胞脱颗粒为过敏反应中的重要环节,其中Src家族激酶(Src family kinase,SFKs)参与激活肥大细胞脱颗粒的起始信号。SFKs中的Lyn、Fyn、Syk等在肥大细胞脱颗粒过程中发挥重要调节作用。调节SFKs可抑制肥大细胞脱颗粒过程,并抑制过敏反应的发生。因此,SFKs抑制剂可以作为过敏性疾病的潜在药物。针对于SFKs的靶向药物的研发将是抗过敏药物发展的新方向之一。     

肥大细胞膜稳定剂对实验性重症急性胰腺炎的治疗作用研究

目的探讨肥大细胞(mast cell,MC)在重症急性胰腺炎(SAP)时的致病作用,了解肥大细胞膜稳定剂对SAP的治疗作用.方法将15只健康雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、SAP组及MC膜稳定剂处理组.MC膜稳定剂处理组应用MC膜稳定剂色甘酸钠,以50 mg/kg的用量于制模前30 min注入大鼠腹腔进行预处理.使用胆管注射5%牛磺胆酸钠法诱发SAP,观察各组大鼠血清淀粉酶、胰腺及肺组织病理变化、组织髓过氧化物酶(MPO)活性以及肺干湿重比的变化情况.结果SAP组的淀粉酶水平为2 500.0±227.7 U/L,胰腺髓过氧化物酶活性为0.41±0.01U/g湿重,肺干湿重比为4.58±0.29,胰腺病变评分为6.4±0.5,均较假手术组明显增高(P＜0.05).而使用MC膜稳定剂预处理后造模,其淀粉酶水平降为1 894.40±124.37 U/L,胰腺髓过氧化物酶活性为0.38±0.15 U/g湿重,肺干湿重比为4.35±0.13,胰腺病变评分为3.4±0.5,均较SAP组明显减轻(P＜0.05).结论肥大细胞可能在SAP发病过程中起着重要的作用,MC膜稳定剂对SAP可能有治疗作用.     

神经-免疫-内分泌网络与肠易激综合征

肠易激综合征(IBS)与神经-免疫-内分泌网络调节紊乱之间的联系尚未明确。此文分别从肠道神经控制、神经-免疫调节、神经-内分泌调节三个方面介绍该网络在IBS发病机制中的重要作用。     

甘草酸铵调控IL-33/ST2通路对特应性皮炎小鼠肥大细胞活化的影响

目的 研究甘草酸铵对特应性皮炎（AD）小鼠IL-33/ST2通路及肥大细胞的活化情况的影响。方法 72只ICR小鼠（雌雄各半）随机均分为对照组、模型组及甘草酸铵低、中、高剂量（25、50、100 mg/kg）和泼尼松龙（阳性药,60 mg/kg）组。除对照组外,以丙酮-DNCB为致敏源构建AD小鼠模型,建模后各组ip相应药物,对照组和模型组ip生理盐水。记录小鼠夜间搔抓次数;甲苯胺蓝患处皮肤组织染色法观察肥大细胞活化情况;ELISA法检测白细胞介素（IL）-33和ST2血清学水平;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Weston blotting法检测皮肤组织中的IL-33和ST2 mRNA和蛋白水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠的搔抓次数显著增多（P<0.05）,肥大细胞密度显著升高（P<0.05）,IL-33和ST2的血清学水平、皮肤组织的转录水平和蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）;与模型组比较,泼尼松龙组和甘草酸铵低、中、高剂量组的搔抓次数和肥大细胞密度分别显著减少和降低（P<0.05）,IL-33、ST2的血清学水平、皮肤组织mRNA和蛋白表达均显著降低（P<0.05）。结论 甘草酸铵能够明显抑制AD模型小鼠IL-33和ST2的血清学水平、皮肤组织中的转录水平和蛋白表达,降低了肥大细胞的活化程度,从而减轻AD的瘙痒症状。     

肥大细胞Toll样受体4在人慢性牙周炎牙龈组织中的表达

 目的：观察人慢性牙周炎牙龈组织中肥大细胞Toll样受体4（Toll-like receptor 4, TLR4）的表达,并探讨其在牙周炎发病中的可能作用。方法: 将68例自愿接受本研究的牙周炎患者按照牙周炎的病变程度分成3组：轻度牙周炎组（23例）、重度牙周炎组（25例）和正常对照组（20例）。取牙龈组织标本,4%中性甲醛液固定48 h以上。制作牙龈组织的连续切片,HE染色,光学显微镜下观察各实验组牙龈组织的组织学改变;免疫组化法染色观察各实验组牙龈组织TLR4的表达;免疫荧光双染色法观察TLR4在肥大细胞中的表达。结果： (1)与正常对照组相比,各慢性牙周炎组牙龈组织中TLR4的表达及TLR4在肥大细胞中的表达均显著升高（P<005）;(2)重度牙周炎组牙龈组织中TLR4表达的数量及TLR4在肥大细胞中的表达明显高于轻度牙周炎组（P<005）。结论：TLR4在牙龈组织中的表达及在肥大细胞中的表达量随着牙周炎的炎症程度加重而增加,提示TLR4,特别是肥大细胞TLR4可能在慢性牙周炎的发病和疾病进程中起着重要的作用。     

银杏叶提取物对于BPA活化RBL-2H3分泌IL-13的影响

目的:探讨银杏叶提取物(Extract of Ginkgo biloba,以下简称EGB)对于BPA(Bisphenol A,双酚A)活化RBL-2H3(简称RBL)分泌白细胞介素13(IL-13)和蛋白激酶C(PKC)活化的影响.方法:利用BPA激活RBL,通过测定β-氨基己糖苷酶了解活化RBL脱颗粒情况,利用ELISA测定IL-13,Western blot检测RBL胞膜与胞浆PKC比值了解PKC活化情况.结果:经BPA活化后,RBL释放的β-氨基己糖苷酶上升到41.6％,IL-13分泌量上升到95.4 pg/ml,加入EGB(浓度为160μg/ml)后,RBL释放的β-氨基己糖苷酶降低到18.7％,分泌的IL-13降低到45.3 pg/ml,同时PKC活化也受到了明显的抑制.结论:EGB通过抑制RBL细胞的PKC活化,进而抑制活化RBL脱颗粒和IL-13分泌,提示EGB治疗哮喘的作用可能与其抑制肥大细胞PKC活化和分泌IL-13有关.     

肥大细胞在大鼠胰腺组织纤维化形成中的作用及其机制

目的探讨肥大细胞（MC）在大鼠胰腺组织纤维化形成中的作用和机制。方法建立经逆行胆胰管注射2％三硝基苯磺酸（TNBS）诱导大鼠慢性胰腺炎模型，将大鼠分为三组，每组40只，分别用肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠和MC激动剂48／80化合物及生理盐水进行干预，并于第3、7、14、21和28天处死动物。H—E染色观察胰腺组织病理学改变；Van Gieson染色观察胰腺组织纤维化情况；硫堇蓝染色观察大鼠慢性胰腺炎过程中MC分布、形态和数量的改变；免疫组化染色观察大鼠慢性胰腺炎α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子（TGF）β1的表达；逆转录-多聚酶链反应（RT—PCR）观察血管紧张素Ⅱ1型（AT1）和2型（AT2）受体蛋白的表达。结果2％TNBS胰管内注射后可于第4周引起典型大鼠胰腺组织纤维化，在胰腺纤维化区域可见大量Ⅰ型胶原沉积。在此过程中MC存在着活化及脱颗粒。胰腺组织α—SMA、TGFβ1、AT1和AT2 mRNA蛋白制模早期表达即为阳性，至第4周时最强。与对照（生理盐水）组比较，色甘酸钠组MC数量及脱颗粒现象明显减少，α-SMA、TGFβ1蛋白表达和AT1、AT2受体mRNA表达明显减少；48／80化合物组MC数量及脱颗粒现象明显增多，上述各指标的表达均有不同程度的增加。结论MC参与TNBS诱导的大鼠慢性胰腺炎的炎症和纤维化的发生及发展，其机制可能与MC促进胰腺星状细胞活化，上调血管紧张素Ⅱ受体表达等介导了胰腺纤维化的形成。     

哮喘和气道血管的改变

支气管哮喘(哮喘)是由多种细胞如嗜酸粒细胞、肥大细胞、T细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾患。哮喘气道的结构除了急性发作期的改变，稳定期也有改变，即气道重建。气道重建包括气道上皮损伤、基底膜增厚、平滑肌增生和肥大、黏液腺化生、血管变化、弹性纤维分裂、细胞外基质糖蛋白类物质沉积增加、气道神经形态和功能改变等。     

慢病毒介导的Jagged1 RNA干扰通过抑制肥大细胞的迁移、浸润和脱颗粒减轻变应性鼻炎小鼠的炎症

目的 探究慢病毒介导的Jagged1 RNA干扰通过抑制肥大细胞的迁移,浸润和脱颗粒对变应性鼻炎小鼠炎症的影响。方法 32只BALB/c小鼠随机分为4组:对照组、AR组、sh-NC组和sh-Jagged1组,每组各8只。卵清蛋白(OVA)联合氢氧化铝制备变应性鼻炎小鼠。RT-PCR检测小鼠Jagged1 mRNA表达;Western blot法检测小鼠Jagged1蛋白表达;鼻部症状评分评估小鼠变应性鼻炎症状;ELISA检测小鼠组胺、类胰蛋白酶、前列腺素D2(Prostaglandin D2)和IgE含量;HE染色观察鼻黏膜病理学变化;电子显微镜观察小鼠鼻黏膜纤毛结构变化;甲苯胺蓝染色观察小鼠鼻黏膜肥大细胞浸润。结果 与对照组比较,AR组和sh-NC组小鼠的Jagged1表达、症状评分升高和IgE表达升高(P＜0.01)。与sh-NC组比较,sh-Jagged1组小鼠Jagged1表达、症状评分降低和IgE表达降低(P＜0.01)。与对照组比较,AR组和sh-NC组小鼠的鼻中隔黏膜基膜破碎,黏膜下血管出现明显扩张、充血现象,炎性细胞浸润和肥大细胞数量增加(P＜0.01),纤毛大面积减少、排列紊乱,组胺、类胰蛋白酶和PGD2水平明显升高(P＜0.01)。sh-Jagged1可改善AR小鼠鼻黏膜和纤毛损伤,抑制炎性细胞浸润、肥大细胞数量、组胺、类胰蛋白酶和PGD2水平(P＜0.01)。结论 慢病毒介导的sh-Jagged1通过抑制肥大细胞的迁移,浸润和脱颗粒减轻变应性鼻炎小鼠炎症。     

食物过敏和十二指肠肥大细胞在功能性消化不良中的关系研究

目的探讨食物过敏及十二指肠肥大细胞对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)的影响及其关系。方法选取2012年1月-2013年12月重庆市北部新区第一人民医院门诊接诊的58例FD患者为观察组,另选取50名健康志愿者为对照组。对两组消化情况进行评分,并于胃镜下取两组十二指肠降段黏膜及球部组织标本。应用ELISA法测定FD患者及健康志愿者血清中14种食物过敏原特异性抗体IgG。甲苯胺蓝染色组织样本并计算肥大细胞总数及脱颗粒肥大细胞所占比例。结果与对照组相比,FD组上腹疼痛、早饱、上腹胀及上腹烧灼感评分显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,FD组十二指肠降段黏膜及球部肥大细胞数量及脱颗粒肥大细胞百分比显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。经Pearson相关因素分析,十二指肠降段黏膜及球部肥大细胞总数及脱颗粒肥大细胞比例与各症状评分无相关性(P0.05);FD组牛肉、大豆、虾、小麦的特异性抗体IgG阳性率高于对照组(P0.05);FD组IgG阳性评分高于对照组(P0.05)。经Pearson相关因素分析,IgG阳性评分与症状评分无相关性(P0.05),与十二指肠降段黏膜肥大细胞总数及脱颗粒细胞无相关性(P0.05),而与十二指肠球部黏膜肥大细胞数量及脱颗粒细胞比例呈正相关(P0.05)。结论 FD发病与特异性抗体IgG阳性表达、十二指肠脱粒肥大细胞比例升高及黏膜肥大细胞数量增多有关。