成骨细胞异种移植的免疫观察

目的 探讨异种成骨细胞移植及组织工程骨构建的可能性。方法 用二步酶消化—组织块联合接种法行SD大鼠骨细胞原代培养，传代后用碱性磷酸酶(ALP)染色法进行细胞鉴定；再将28只大耳白兔分为3组：自体移植组(A组)、异种移植组(B组)、正常对照组(C组)，分别于腹直肌袋内注入自体软骨细胞悬液、SD大鼠成骨细胞及生理盐水，于1、2、4及8周行免疫学及组织形态学检测。结果 细胞原代接种后5天成单层，经鉴定为成骨细胞；实验兔各组移植后受体无明显全身及局部排异反应；B组移植后2、4周检测到特异性抗体，2周检测到细胞介导的细胞毒反应，4周达高峰，8周开始减退，HE染色见大量炎性细胞浸润，至8周无明显异位成骨现象。A、C两组移植后末见明显体液及细胞免疫反应。结论 单纯异种成骨细胞不能作为细胞移植及组织工程骨构建的可靠细胞来源。     

组织工程化血管的种子细胞在体外培养扩增方法的实验性研究

目的为培养组织工程化血管的实验研究提供细胞来源.方法采用酶消化法和组织块法培养人脐静脉血管内皮细胞、人脐动脉血管平滑肌细胞及成纤维细胞,并进行细胞的传代、纯化、鉴定以及形态学观察.结果培养细胞符合血管内皮细胞、血管平滑肌细胞及成纤维细胞的各有形态特征.结论所培养的细胞有望作为体外构建组织工程化血管的应用.     

胎鼠牙胚细胞体外培养研究

目的 摸索正常胎鼠牙胚细胞离体培养所需条件，为进一步将其作为牙组织工程种子细胞奠定基础。方法 体视显微镜下取17d龄胎鼠下颌第一磨牙牙胚，胶原酶／分离酶消化，以含10％胎牛血清(FCS)的DMEM为培养基进行原代培养。倒置显微镜下观察培养细胞的生长特点，MTT法测定细胞活性绘制生长曲线，取原代培养4～9d的细胞进行组织化学和免疫组织化学染色。结果 倒置显微镜下观察，培养细胞在24h内贴壁，约7～9d生长连成片状。细胞有多角形、大而扁平梭形和长梭形几种形态。生长曲线表明：培养细胞在前3天生长缓慢，第4天呈对数生长，第7天达高峰。免疫组化结果表明：培养细胞来源于两种组织。结论 采用酶消化培养法，用胶原做基质饲养层，含10％FCS的低糖DMEM作为培养基，能将胎鼠牙胚细胞培养成活，并维持其细胞学特征。     

具有骨诱导活性的仿生骨基质材料的制备

目的将一种具有与骨形态发生蛋白2相似骨诱导活性的多肽p24共价结合于改性聚（丙交酯-co-乙交酯）基质材料上，以制备出具有骨诱导活性的仿生骨基质材料。方法将活性多肽p24通过交联剂共价结合于改性PLGA材料上作为实验组；以未加交联剂多肽溶液和材料简单混合反应为对照组，通过X射线光电子光谱法和扫描电镜检测交联情况；同时对两组材料进行钙离子吸附实验，初步评价其仿生矿化能力。结果XPS检测结果表明，实验组及对照组材料表面均已结合硫元素，两者含有硫元素含量分别为1.50％及0.09％；钙离子吸附实验结果表明，12h及24h时实验组材料的钙离子吸附量分别为0，126mg及0．231mg；12h及24h时对照组材料的钙离子吸附量分别为0．053、0．102mg。多肽交联之材料较混合之材料的钙离子吸附能力显著增强。结论在改性PLGA三嵌段材料上固定了BMP2活性多肽，为以后发挥其骨诱导活性修复骨缺损奠定了良好基础。     

第二军医大学附属长海医院血液内科暨全军血液病专科中心

第二军医大学附属长海医院内科血液病专业成立于1962年，1978年成立血液内科，1979年被总后勤部批准为全军血液病专科中心，是最早的集医、教、研于一体的全军医学专科中心，医学硕士学位和医学博士学位授权点，第二军医大学“211”工程重点建设学科。至今已招收博士后2人，博士、硕士研究生40余人，毕业30余人。现有医教研护技人员40余名，展开普通病床50张，无菌层流病床5张。     

微机在护理工作中的应用

“中国医院信息系统-CHIS”是我国规模较大，系统技术平台较完善的一套HIS产品。为了适应现代化医院管理，提高医疗服务质量，我院于2002年10月1日正式上马了这套系统，又名：“军字一号工程”。实现了医院各部门的微机网络化，其中住院管理子系统的运行，大大提高了我院临床护理工作的质量和效率，同时减轻了护士人力的消耗，并使护理管理工作上了新台阶。具体表现在以上方面。     

不同持续时间的周期性压力对构建组织工程软骨的影响

Objective To determine the best duration for exerting the cyclic pressure under which the tissue-engineered cartilage is constructed. Methods Free chondrocytes isolated from rabbit articular cartilage were seeded into polylactic acid-co-glycolic acid(PLGA) scaffolds after expansion in vitro, and ran-domized into 4 groups. In Groups 1 to 3, chondrocytes were cultured under daily cyclic pressure (0 ～ 200 kPa, 0.1Hz) for 4 hours, 8 hours, 12 hours respectively; Group 4 was a control in which no pressure was exerted. In each group, after 2 weeks of culture, the tissue engineered cartilages were observed in vitro and assessed by his-tological staining of liE. Next, the content of DNA and the secretion of type Ⅱ collagen and GAG in cartilages were detected quantitatively. Results Under the daily cyclic pressure (0 ～200 kPa, 0.1 Hz), the scaf-fold-chondrocytes complex in the group of 8 hours got the largest volume, smooth, lucidus, and elastic surface, the most queuing chondrocytes, and the highest content of type Ⅱ collagen and GAG (P < 0.01). Conclusions Since chondrecytes are baro-senstive, the metabolism of chondrocytes can be affected by the time of cyclic pressure. Under the effect of 0 ～200 kPa, 0.1Hz, the daily cyclic pressure of 8 hours may be optimal for chondrocytes to multiply and synthesize extracellular matrixes such as type Ⅱ collagen and GAG.     

生物衍生骨复合骨髓基质干细胞修复山羊胫骨缺损的血管化研究

目的研究生物衍生骨与骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells, MSCs)复合修复山羊胫骨缺损的血管化过程,了解其修复长段管状负重骨缺损的血管化情况. 方法制备生物衍生骨作为支架材料,培养、诱导MSCs作为种子细胞,二者在体外复合构建组织工程骨.20只山羊双侧胫骨中段制备成20 mm长的骨-骨膜缺损模型,采取自身左右侧对照,实验侧(右侧)缺损处植入组织工程骨,对照侧(左侧)植入单纯支架材料,采用钢板内固定.术后2、4、6及8周用墨汁灌注透明标本及血管面积图像分析方法观察血管化过程,组织学观察血管形成及成骨情况. 结果术后2、4周,实验侧血管形成较对照侧少(P<0.05);术后8周,两侧均完全血管化,差异无统计学意义(P>0.05).实验侧于术后6、8周新骨形成逐渐增加,材料降解吸收较对照组快;对照侧术后8周材料孔隙内仍无明显新骨形成. 结论生物衍生骨作为骨组织工程的支架材料,能够较快发生血管化;组织工程骨成骨能力较单纯支架材料强.