UVA对人角质形成细胞的氧化损伤作用

①目的　探讨紫外线A(UVA)对人角质形成细胞氧化损伤的机制。②方法　用 5J/cm2 UVA照射角质形成细胞 ,酶生化法检测活性氧 (ROS)的含量及超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)活性的变化 ,流式细胞仪测定紫外线对角质形成细胞凋亡的影响 ,原位杂交技术观察 p2 1mRNA的变化 ,并与非照射组比较。③结果　与对照组比较 ,UVA照射组ROS含量升高 (t =113.6 8,P <0 .0 0 1) ,SOD、GSH PX活性下降 (t =5 7.2 3、19.0 4 ,P <0 .0 0 1) ,细胞凋亡率升高 (t=5 3.2 8,P <0 .0 0 1) ,p2 1mRNA表达增强。④结论　UVA对人角质形成细胞的损伤与氧自由基生成增多及细胞抗氧化能力抑制有关     

Pten基因敲除对过氧化物酶家族表达和活性氧水平的影响

目的:探讨Pten基因敲除后对过氧化物酶家族(Peroxiredoxins,Prdxs)水平和活性氧水平的影响.方法:采用Western印迹和化学/荧光发光分析法分别检测了在Pten / MEF和Pten-/-MEF细胞中PRDXs的表达和细胞内活性氧水平.结果:Western印迹结果显示,与Pten / MEF细胞相比,Pten-/-MEF细胞PRDX Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ,Ⅵ蛋白水平下调,PRDX Ⅲ不变,PRDX Ⅳ上调.DCFH探针标记后流式结果显示Pten-/-MEF 细胞活性氧荧光值显著高于对照Pten / MEF细胞(P＜0.05).结论:Pten基因敲除引起数种PRDXs表达下调,细胞内活性氧水平增高.     

铜对大鼠肝细胞凋亡的影响以及姜黄素的保护作用

目的：探讨铜对大鼠肝细胞（BRL细胞）凋亡的诱导作用及其机制，研究姜黄素对BRL细胞铜损伤时的影响。方法：对硫酸铜（CuSO4）和姜黄素干预培养的BRL细胞，采用荧光探针DCFH-DA进行活性氧(ROS)测定，MTT法检测细胞活力，Hoechst染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡。Western blot法检测磷酸化应激激活的蛋白激酶（JNK/SAPK）蛋白水平。结果：铜处理后6 h BRL细胞ROS和凋亡率达到高峰，分别为711.70±68.33，（45.08±1.87）%，铜处理后24 h JNK磷酸化率上升至（63.36±2.24）%，与正常对照组相比差异有显著性（P<0.01）；姜黄素组ROS、凋亡百分率和JNK磷酸化率均较相应对照组下降(P<0.01)。结论：一定浓度的铜可以诱导BRL细胞的凋亡且与活性氧的产生有关；姜黄素对铜损伤BRL的保护作用与抗氧化和抑制磷酸化JNK的表达有关。［中国当代儿科杂志，2007，9（6）：567-570］     

线粒体和细胞凋亡

线粒体在能量代谢和自由基代谢过程中占有十分重要的地位.线粒体产生大量超氧阴离子,并通过链式反应形成活性氧(reactive oxygen species,ROS),当ROS水平较低时,可促进细胞增生;而当ROS水平较高时,使得线粒体MPTP开放,不仅导致跨膜电位崩溃,也使细胞包素C外漏[1].     

应用荧光探针H2DCF-DA检测光照致细胞内活性氧产生的初步研究

目的应用荧光显微镜及新型荧光探针H2DCF-DA检测在光源照射过程中人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)内活性氧的产生情况。方法将ECV304细胞接种于35mm培养皿中,24h后加入H2DCF-DA,使其终浓度为10μmol/L,孵育30min。利用荧光显微镜的激发光源作为照射光源,在采集荧光图像的同时完成光源照射,光源输出波长范围为460～490nm,功率密度约为100mW/cm2。连续采集DCF的荧光图,观察细胞内DCF荧光的变化情况,采用计算机图像处理和分析技术,求得细胞内不同照射时间点DCF平均荧光强度,进而得到平均荧光强度-时间曲线。另外,使用线粒体特异标记探针MitoFluorRed589与H2DCF-DA共同孵育细胞,分别采集同一细胞的DCF的荧光图和MitoFluorRed589的荧光图,并利用像素-荧光强度分析方法来确定DCF荧光在细胞内的分布位置。结果在光源照射的开始阶段,ECV304细胞内的DCF荧光强度迅速增加,在第10s时便上升至第2s时的2.2倍,但是随着照射时间逐渐延长,荧光强度增幅逐渐变小,到第60s时上升至第2s时的4.7倍。观察时间进一步延长,DCF的荧光强度的变化似乎进入平台期,继而开始出现下降。考察DCF荧光在ECV304细胞内的分布位置主要通过比较细胞内不同区域的I1/I2值,通过图像分析与计算得到线粒体区、细胞核区以及细胞质非线粒体区内I1/I2值分     

癌的化学预防最前沿专辑（二）——苹果果胶的抑癌作用与活性氧抑制作用

膳食纤维摄取量的逐年减少已成为社会问题，据统计日本人1950年的膳食纤维摄取量为23g/日，而1985年则降至16g/日，已成为糖尿病、高脂血症及肥胖等疾病增加的重要因素之一。     

缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞活性氧与缺氧诱导因子1α在细胞增殖中的作用

活性氧可介导基因转录激活的启动和转录因子活性的调节。缺氧诱导因子1α（HIF-1α）是一种核转录因子，在缺氧性肺动脉高压（HPH）形成中起关键作用。我们观察缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）的活性氧变化，探讨其与HIF-1α和细胞增殖的关系。     

抗氧化性维生素与男性生殖

生殖系统内过多的活性氧 (ROS)产生可导致精子膜脂质过氧化损伤 ,而抗氧化性维生素对于清除ROS 避免精子脂质过氧化损伤具有一定保护作用。本文就抗氧化性维生素在男性生殖中的作用及其在男性不育治疗等方面进行了综述     

Attenuation of myocardial injury due to oxygen free radicals(OFR) by pretreatment with OFR or calcitonin gene-related peptide

目的：研究氧自由基（ＯＦＲ）及降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）预处置对ＯＦＲ所致离体大鼠心脏损伤的拮抗作用．方法：Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ法灌流心脏，电解ＫＨ液产生ＯＦＲ．结果：ＣＧＲＰ或ＯＦＲ预处置减轻ＯＦＲ所致心脏收缩功能下降，冠脉流量减少和肌酸激酶（ＣＫ）释放增加．蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｈ７可取消ＯＦＲ预处置的心脏保护作用（对照组，ＯＦＲ损伤组，ＯＦＲ预处置组，Ｈ７加ＯＦＲ预处置组及Ｈ７组的ＣＫ释放量分别是１１０±７，２１５±２３，１６９±１４，２４０±３０，１１３±１９Ｕ·Ｌ－１）．结论：ＯＦＲ或ＣＧＲＰ预处置对ＯＦＲ所致心肌损伤具有拮抗作用，该作用与ＰＫＣ激活有关．