罗布泊地区沙生植物根际放线菌多样性及生物活性的研究

目的研究罗布泊地区沙生植物根际放线菌多样性及其生物活性,以期发现新药用微生物资源。方法采用2种分离方法,6种分离培养基,从两种沙生植物24份根际土样中分离放线菌;对其中131株放线菌发酵液及乙酸乙酯提取液采用抗菌、杀线虫模型进行活性筛选,并根据活性测定结果结合菌株形态特征对其中66株进行16S rRNA基因序列分析。结果共分离到放线菌154株,53株在其中一个或两个活性筛选模型中都显示为阳性,总阳性率为40.46%,16S rRNA基因序列分析表明这66株放线菌分布在12个属,除了优势菌链霉菌(Streptomyces)外,还发现了拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis),拟无枝酸菌属(Amycolatopsis),疣孢菌属(Verrucosispore),喜冷杆菌属(Cryobacterium),异壁放线菌属(Actinoalloteichus),假诺卡氏菌属(Pseudonocardia),普氏菌属(Prauserella),链单孢菌属(Streptomonospora),贫养杆菌属(Modestobacter),放线产孢菌属(Actinomycetospora),芽生球菌属(Blastococcus)等稀有放线菌属,菌株CA15-2与GenBank数据库中最近种Nocardiopsis nikkonensis YU1183-22T(GenBank登录号:AB491226)的相似性约为94%,可能为潜在的新属或新种。结论罗布泊地区沙生植物根际存在较为丰富的放线菌资源并能产生多种活性次级代谢产物,值得进一步的研究。     

犹他游动放线菌中酰胺水解酶基因拷贝数增加对转化棘白菌素B效率的影响

目的:利用ΦC31整合酶介导的位点特异性重组方法,构建棘白菌素B酰胺水解酶基因拷贝数增加的犹他游动放线菌重组菌株。方法:构建含有棘白菌素B酰胺水解酶基因的基因整合型质粒pYGCQ-03-13,通过属间接合转移的方法将该基因片段转入犹他游动放线菌SIPI-T2001中;利用静息细胞转化法,考察其对转化效率的影响。结果:筛选得到的阳性重组菌株SIPI-GE.T2001,对棘白菌素B的转化效率最高达到61.7%。结论:增加棘白菌素B酰胺水解酶基因拷贝数,有效地提高了犹他游动放线菌对棘白菌素B的转化效率。     

放线菌对成人扁桃体切除术后疼痛及疗效影响

目的 探讨放线菌对扁桃体术后疼痛影响,总结扁桃体术后疼痛的病因和治疗手段.方法 回顾性分析58例成人扁桃体切除术患者的临床资料,其中术后病理找到放线菌患者23例为观察组[根据治疗药物不同分为头孢曲松钠治疗组(头孢曲松组)12例和青霉素治疗组(青霉素组)11例],未见放线菌患者35例为疼痛对照组.采用数字法评估两组患者疼痛程度并比较.结果 成人扁桃体术后疼痛延长与放线菌感染呈明显相关(x2=33.40,P＜0.05);青霉素治疗对治疗扁桃体术后疼痛效果缓慢,头孢曲松钠对治疗扁桃体术后疼痛效果明显(x2=17.32,P＜0.05).结论 扁桃体术后病理检查明确有放线菌,患者术后疼痛延长,头孢曲松钠治疗效果好.     

仿刺参共附生放线菌Kytococcus sp.中的环二肽成分

目的对仿刺参共附生放线菌Kytococcus sp.化学成分进行研究。方法用硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,反向高效液相柱层析(RP-HPLC)等分离手段对放线菌(Kytococcus sp.)乙酸乙酯提取物进行分离纯化,并利用1 H NMR、13 C NMR、质谱(MS)等手段并与文献对照相结合,鉴定化合物的结构。结果分离得到9个已知的环二肽类化合物,其结构分别为:环(L-脯-L-缬)二肽(1),环(L-脯-L-丙)二肽(2),环(L-脯-L-酪)二肽(3),环(L-脯-L-异亮)二肽(4),环(L-脯-L-亮)二肽(5),环(L-脯-L-苯丙)二肽(6),环(L-缬-L-亮)二肽(7),(L-亮-L-异亮)二肽(8),环(L-亮-L-亮)二肽(9)。结论这是首次从仿刺参中分离得到放线菌Kytococ-cus sp.,9个化合物均为首次从该属放线菌中分离得到。     

一株海洋来源Streptomyces sp. SCSIO 1682中那西肽(nosiheptide)的分离鉴定及其生物合成基因簇分析

目的 对一株海洋来源的菌株SCSIO 1682进行16S rDNA分子生物学鉴定,对发酵产物中的抑菌活性化合物进行分离鉴定,并对抑菌活性化合物的生物合成基因簇进行分析。方法 通过构建基于16S rDNA序列的系统发育树来进行菌株鉴定;通过有机溶剂萃取、正相和反相硅胶层析等化学分离手段对菌株SCSIO 1682的次级代谢产物进行活性追踪分离纯化;运用HR-ESI-MS,₁H和₁₃C NMR等波谱手段对所得化合物进行结构解析;通过对菌株SCSIO 1682进行全基因组扫描测序鉴定所得化合物的生物合成基因簇。结果 该菌株被鉴定为Streptomyces sp. SCSIO 1682,所得抑菌活性化合物为那西肽,鉴定了那西肽的生物合成基因簇并进行生物信息学分析。结论 从海洋链霉菌Streptomyces sp. SCSIO 1682中分离鉴定了那西肽,那西肽生物合成基因簇的鉴定为利用组合生物合成和合成生物学技术对那西肽进行结构改造提供了新的基因资源。     

一株南海红树林底泥来源抗真菌放线菌No. 41-51发酵物的化学成分研究

目的 对一株来源于南海红树林底泥的抗真菌放线菌No. H 41-51发酵物中的化学成分进行研究。方法 对该菌株进行发酵培养,将发酵物进行离心分离成菌丝和菌液,菌液用乙酸乙酯萃取,并对具有活性的该乙酸乙酯部位进行成分分离和鉴定;发酵物菌丝体用95-80%乙醇提取,再用不同极性的溶剂萃取,对具有活性的石油醚部位进行成分分离和鉴定。整个提取和分离过程用纸碟片法进行活性追踪分离。通过硅胶柱、Sephadex LH-20柱色谱及HPLC制备方法分离纯化化合物样品,用NMR、MS等光谱方法,并结合文献数据比对鉴定化合物结构。 结果 分离得到14个化合物,并分别将其鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(1)、二(2-乙基己基)苯-1,2-二甲酸酯(2)、3,3-二吲哚-2-羟基-丙醇(3)、环(苯丙-丙)二肽(4)、环(R-脯-S-苯丙)二肽(5)、环(S-脯-S-苯丙)二肽(6)、环(D-苯丙-L-异亮)二肽(7)、dankasterone(8)、4-hydroxy-17R-methylincisterol(9)、Calvasterol B(10)、Calvasterol A(11)、抗霉素 A_1a(12)、抗霉素 A_1b(13)和甘油醇-1-单油酸酯(14)。体外活性实验表明：化合物8~11对MCF-7、SF-268和NCI-H460细胞株表现出程度不等的细胞毒活性,化合物12和13表现出抗白色念珠菌活性。结论 菌株H 41-51发酵可产生多种不同结构类型和生物活性的次生代谢产物。化合物8~11对MCF-7、NCI-H460和SF-268细胞株具有细胞毒活性,化合物12、13具有抗白色念珠菌活性。     

海洋放线菌—药物开发的新兴资源

近些年,海洋放线菌成为新药研发的重要来源,引起人们的关注,本文综述了海洋放线菌在分离方面取得的成绩,并介绍了通过传统筛选方法分离得到的生物活性代谢物,以及在与新化合物相关的基因挖掘和生物合成基因簇的异源表达方面取得的进展。     

海洋放线菌中具有抗肿瘤活性聚酮类化合物的研究进展

目的对海洋放线菌所产生的聚酮类化合物的结构特点与抗肿瘤活性进行阐述,为海洋放线菌的进一步研究与开发奠定基础。方法结合相关文献33篇,对近5年来海洋放线菌次级代谢产物中发现的结构新颖复杂的聚酮类化合物的结构特征和抗肿瘤活性研究进行综述。结果与结论聚酮类化合物结构新颖复杂,对多种瘤株都表现出较强的抑制作用,且部分化合物已经处于临床实验阶段。     

酪蛋白磷酸肽钙磷复合体对粘性放线菌产酸影响的实验研究

[目的]研究酪蛋白磷酸肽钙磷复合体(Casein phosphopeptide- Amorphic Calcium Phosphate,CPP-ACP)对粘性放线菌产酸的影响,探讨CPP-ACP作为一种生物防龋制剂的可行性. [方法]将粘性放线菌加入含不同浓度CPP-ACP的蔗糖培养基中,厌氧培养48 h,用精密pH计检测培养基上清液的pH值,计算pH的变化值△pH(初始pH值-终末pH值). [结果]随CPP-ACP浓度的升高,培养基上清液的pH值升高,△pH降低,即粘性放线菌的产酸量降低(P＜0.01). [结论] CPP-ACP对粘性放线菌产酸具有抑制作用,且随CPP-ACP浓度的升高抑制作用增强.     

西洋参锈腐病菌拮抗放线菌F05发酵培养基的优化

目的:从老参地土壤中分离得到一株对西洋参锈腐病菌具有良好拮抗作用的菌株F05,对该菌株的发酵培养基进行了初步研究,确定了其最佳培养基组成.方法:利用单因素试验和均匀设计试验优化培养基组分.结果:优化结果碳源为玉米秆粉,氮源为磷酸氢二铵,无机盐为硫酸镁、磷酸氢二钾,质量分数分别为3.720 6%,0.531 2%,0.035 5%,0.040 0%,优化后活菌生物量为1.57×10~9CFU·mL~(-1).