B组轮状病毒WH-2株vp7基因的原核表达与抗体的制备

目的：在大肠杆菌中表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白并制备其兔抗血清。方法：根据B组轮状病毒（GBRV）WH-2株vp7基因的全序列设计引物,用PCR的方法扩增得到vp7基因的编码区。将其克隆到原核GST融合表达载体pGEX-KG内,转化大肠杆菌E.coliDH5α,IPTG诱导表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白,经SDS-PAGE分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白抗血清。结果：经鉴定确认,vp7基因以正确的方式插入到载体中,此重组表达载体经IPTG诱导后,可表达相对分子量为53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白。制备的抗血清经同样诱导表达的表达载体pGEX-KG表达产物吸收后1：500倍稀释后用Western Blot分析,与53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白获得特异性显色信号。结论：人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白成功在大肠杆菌中GST融合表达,所表达的蛋白和制备的抗体不但为研究结构与功能提供了物质基础,也为GBRV所引起的疾病预防、诊断和治疗等流行病学研究和临床诊断奠定了基础,具有重要实际应用价值。     

微胶囊化胰岛移植研究进展

胰岛移植是治疗糖尿病的一种理想方法 ,但由于存在免疫排斥反应 ,胰岛移植物不能长期存活。为提高移植物和患者的存活率 ,必须使用免疫抑制剂 ,而免疫抑制剂的大量应用 ,会带来一定的不良反应。为此 ,国内外学者一直在努力开发不良反应小的新一代免疫抑制剂和免疫隔离技术。 1 980年Ｌｉｍ等[1 ] 首先报道用海藻酸钠 聚赖氨酸生物膜包裹鼠胰岛进行移植具有免疫隔离作用。这种无毒副反应的生物膜具有特殊的通透性 ,允许小分子的营养物质、激素和代谢产物等自由通过 ,阻止免疫细胞、补体和免疫球蛋白等大分子物质通过 ,从而抑制受体对移植物…     

二氮杂菲法测定铁的试验条件研究

二氮杂菲分光光度法是GB5 75 0 - 85《生活饮用水水质标准检验方法》(以下简称国标法 )中测铁的首选方法 ,该法灵敏度高 ,操作简单且不需要昂贵的仪器 ,但误差较大 ,最低检测浓度为 0 0 5mg/L ,由于所用缓冲溶液含有大量的醋酸刺激性很大。王朝辉等〔1〕对该法的加热方法进行了改进 ;竹渭行〔2〕为了降低试剂空白的吸光度 ,改用浓氨水调节溶液的pH值 ;尽管能降低试剂空白的吸光度 ,提高精密度和准确度 ,但引入了刺激性大的氨水 ,并且由于不同样品溶液的盐酸含量不同 ,导致调节pH值的时间较长。本文研究了二氮杂菲分光光度法测定水中铁的…     

严格药品贮存条件保障用药安全有效

药品是一种特殊的商品 ,它质量的优劣、疗效的高低、副作用的大小 ,直接关系到医疗的质量和患者的身体健康以及生命安全 ,国家早已颁发《药品管理法》 ,明确加强药品的监督、管理、保证药品的质量、增进药品的疗效、保障人民用药安全 ,维护人民身体健康。国家又于 2 0 0 1年 12月 1日颁布实施了新修订的《药品管理法》 ,新的“药品管理法”在原有的基础上 ,着重严格了药品的监督管理 ,并明确指示要上升到国家的一级管理 ,特别提到要严历打击假冒伪劣药品 ,保证用药安全、稳定、有效等 ,再次引起我们对药品管理方方面面的高度重视 ,现就目前…     

聚丙烯微波炉烹调容器检测条件适用性

目前 ,市场常见的微波炉专用食品烹调容器主要有聚丙烯材质塑料制品、瓷制品及玻璃制品三大类产品。由于塑料制品保温性强、价格便宜、重量轻、不易破碎等优点 ,它的市场占有率为 80 %以上。目前我国没有微波炉专用食品烹调容器的专用卫生标准。在实际工作中 ,参照相同材质的食品包装容器卫生标准。此方法是模拟烹调后的食品放入容器中的使用条件 ,但微波炉烹调食品时温度远远高于此温度 ,显而易见 ,样品处理条件并不符合实际情况。为了解聚丙烯微波炉专用食品烹调容器的卫生安全性及制定其专用卫生标准提供依据 ,以日常生活中使用微波炉烹…     

诺氟沙星的药理及其注射剂的制备

诺氟沙星属广谱杀菌药，能抑制细菌细胞ＤＮＡ促旋酶的活性，且与β－内酰胺类抗生素无拮抗作用。制成０．２％诺氟沙星葡萄糖注射液，质量稳定，使用方便，安全有效，广泛适用于多种细菌感染性疾病。