胃癌中医证型与胃癌转移相关基因E-cadherin的关系研究

目的:从基因蛋白表达上探索胃癌患者中医证的本质.方法:将收集到的术前胃癌患者病例资料按中医辨证分型标准确定其证型归属;用免疫组化EnVision二步法检测术后胃癌肿瘤标本中E-cadherin基因蛋白表达情况.结果:E-cadherin在100例胃癌患者中的阳性表达率为90%,证型间表达差异存在显著性(P<0.01);进一步两两比较示,痰湿凝结型、气血双亏型与脾胃虚寒型之间无明显差异,表达较高;瘀毒内阻型与肝胃不和型无明显差异,表达较低.结论:瘀毒内阻型与肝胃不和型胃癌患者的E-cadherin表达偏低,此两种证型肿瘤转移形成的途径可能与E-cadherin,即与肿瘤细胞间同质性黏附力降低相关.     

Detection of CK-19 mRNA-positive cells in the peripheral blood of breast cancer patients with histologically and immunohistochemically negative axillary lymph nodes.

BACKGROUND: To investigate the incidence of direct hematogenous spread of cancer cells in patients with early-stage breast cancer by studying the presence of occult tumor cytokeratin-19 (CK-19) mRNA(+) cells in the peripheral blood in relation to the status of sentinel (SLNs) and (ALNs) axillary lymph nodes. PATIENTS AND METHODS: SLNs and ALNs from 111 patients with operable stage I-II breast adenocarcinoma were evaluated for the presence of tumor cells by hematoxylin-eosin (H&E) staining and, if negative, by immunohistochemistry (IHC) using an anti-CK-19 antibody. Peripheral blood was also analyzed for the presence of CK-19 mRNA(+) cells by nested RT-PCR, before the initiation of adjuvant treatment and in CK-19 mRNA(+) patients following the completion of adjuvant chemotherapy and hormonal treatment. RESULTS: After both H&E staining and IHC analysis, 29 (26%) patients were ALN negative (N0). In 78 (70%) patients H&E staining and in four (3.6%) IHC analysis revealed tumors cells, and these patients were considered as ALN positive (N+). Peripheral blood CK-19 mRNA(+) cells were detected in nine (31%) out of 29 N0 and in 31 (38%) out of 82 N + patients (P=0.5) before any adjuvant treatment. Adjuvant chemotherapy and hormone treatment resulted in the disappearance of the CK-19 mRNA(+) cells in all N0 patients and in 15 out of 31 N + patients. After a median follow-up of 40 months, all the N0 CK-19 mRNA(+) patients were relapse-free whereas four (13%) N + CK-19 mRNA(+) patients had relapsed. CONCLUSIONS: Direct hematogenous dissemination of occult tumor cells may occur in a substantial proportion of patients with early-stage breast cancer. The prognostic implication of the detection of these cells requires long follow-up periods and further studies.     

RAS相关家族1A基因在胃癌中的表达和启动子甲基化

目的分析散发性胃癌中RAS相关家族1A基因(RASSF1A基因)的表达、突变和启动子甲基化状况,探讨RASSF1A基因在胃癌发生、发展中的意义.方法采用定量PCR、RT-PCR和SSCP的检测90例胃癌组织和30例相应癌旁正常组织中RASSF1A基因表达水平以及基因突变的情况;采用甲基化特异性PCR (MSP)方法检测RASSF1A基因启动子甲基化情况.结果 90例胃癌中有52例(57.8%)RASSF1A无表达或表达低下.RASSF1A无表达或表达低下和肿瘤细胞的分化(P<0.05)以及分期(P<0.001)相关,但是和肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移不相关(P>0.05).90例胃癌中52例启动子发生甲基化(57.8%),其中90.3%(47/52)的RASSF1A无表达或表达低下组织中检测到RASSF1A基因启动子的甲基化,然而癌旁正常组织未发现有RASSF1A基因启动子的甲基化,SSCP没有发现任何突变.结论胃癌中存在较多的启动子异常甲基化造成RASSF1A基因失活,这可能是胃癌发生发展的因素之一.     

多种肿瘤标志物蛋白芯片在肺癌中的检测及其应用价值

[目的]探讨多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)在鉴别肺癌的临床分期、病理类型和预后评估中的价值.[方法]应用该芯片检测系统测定143例肺癌病人血清中12种肿瘤标志物(CA19-9,NSE,CEA,CA242,Fe,HCG,AFP,Free-PSA,PSA,CA125,HGH,CA15-3)的水平.[结果]不同病理类型的肺癌之间各项肿瘤标志物的阳性率、血清水平和C-12总阳性率均无显著性差异;不同分期的肺癌之间C-12总阳性率无显著性差异,但CA19-9阳性率及血清水平存在显著性差异(P＜0.05),而其他各项肿瘤标志物的阳性率及血清水平均无显著性差异.[结论]肺癌组织能够产生CA19-9,CA19-9与肺癌的临床分期有一定的相关性.该检测系统在鉴别肺癌的临床分期、病理类型和预后评估方面价值有限,尚需作某些肿瘤标志物的增减以便更有效地指导临床.     

癌细胞激活血液免疫反应路线图实验体系

癌细胞是抗原性细胞,能激活血液免疫反应,可用于构建血液免疫反应路线图实验体系,可观察多种免疫检测指标变化(包括血细胞粘附率,IL-8、IL-12、CD35、CD44、CD55、CD58、CD4、CD8、CD2、CXCR4、Fy6等).癌细胞(S180)激活免疫反应能创立有效的多种免疫学研究方法,用于研究血液免疫反应中血细胞与血浆,红细胞与白细胞之间的内在联系.为天然免疫与获得性免疫研究,为血液免疫反应路线图理论研究,为在临床上对肿瘤进行免疫治疗提供有效的研究方法.     

双向分化肿瘤血管生成拟态分子机制初步观察(英文)

目的研究肿瘤细胞分泌Ⅳ型胶原和 PAS 阳性物质在血管生成拟态(VM)中的作用以及 VM 对肿瘤细胞表达 VEGF 的影响。方法收集双向分化恶性肿瘤石蜡包埋样本158例,制作成组织芯片,进行 CD31和 VEGF 重复染色及Ⅳ型胶原染色。通过网格计数法,比较 CD31与 PAS 阳性图案围成的管道面积差别及分布特点,以及有 VM 的点阵和无 VM 的点阵 VEGF 表达的差别。结果 VM 的基底膜样结构表现为 PAS 及Ⅳ型胶原阳性;无 VM 的双向分化肿瘤 VEGF 表达高于有 VM 者,其中在恶性黑色素瘤及腺泡型横纹肌肉瘤中,二者 VEGF 的表达差异有显著性(P<0.05)。结论 PAS 阳性物质和Ⅳ型胶原参与构建了 VM 的管壁,VEGF 表达的差别表明 VM 的存在可以提供肿瘤细胞氧气和营养物质。     

化疗增敏剂影响 P-糖蛋白依赖多药耐药性肿瘤细胞~(99)Tc~m-MIBI 摄取的实验研究(英文)

目的观察化疔增敏剂对多药耐药性(Multi-drug resistance,MDR)肿瘤细胞 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响及伴随~(99)Tc~m-MI-BI 摄取动力学的变化,以建立用~(99)Tc~m-MIBI 来评价化疗增敏剂效果的方法。方法 MDR 人乳腺癌细胞 MCF-7/Adr 37℃培养。(1)实验组和对照组细胞培养基中分别加入化疗增敏剂维拉帕米(10 μmol/L)和等体积培养液 DMEM。~(99)Tc~m-MIBI 与细胞共同孵育2 h 后收集细胞,测定放射性活度和 P-gp 表达水平。(2)维拉帕米(10 μmol/L)加入细胞培养基中,与细胞孵育若干时间后~(99)Tc~m-MIBI 加入细胞培养基中,与细胞一起培养2 h 后收集细胞。测定放射性活度和P-gp 表达水平。结果 (1)维拉帕米作用2h 后,细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 较对照组显著增加(t=2.33,P<0.05),但 P-gp 表达水平差异无显著性(P>0.05)。(2)肿瘤细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 随维拉帕米作用时间的延长而增加,各时间点 UR 差异有显著性(F=58.2,P<0.05),并且,VRP 作用时间在80 min 内时,肿瘤细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 与 P-gp 的表达水平无相关性(r=0.16,P>0.05),VRP 作用时间大于8 h时,肿瘤细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 与 P-gp 的表达水平呈负相关(r=-0.73,P<0.01)。结论化疗增敏剂能够影响 P-gp 过度表达所致 MDR 肿瘤细胞对~(99)Tc~m-MIBI 的摄取。     

TRAIL与羟基喜树碱联用协同杀伤人肺腺癌A549细胞

目的：探讨羟基喜树碱与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand，TRAIL）联用对肺腺癌A549细胞是否具有协同杀伤作用，并对其机制进行初步研究。方法：MTT法检测细胞毒性作用，流式细胞仪检测细胞凋亡和线粒体膜电位，Western blot分析bcl-2和bcl-xl蛋白水平变化。结果：单用100ng／mL TRAIL，4、40和400μg／mL羟基喜树碱对A549细胞杀伤率分别为13．9％、3．0％、23．4％和76．7％，联合用药的抑制率分别为43．6％、52．5％和83．1%。100ng／mL TRAIL和4μg/mL羟基喜树碱有协同作用，可使细胞线粒体膜电住降低，但不影响bcl-2和bcl-xl蛋白表达。结论：TRAIL与羟基喜树碱联用对肺腺癌A549细胞有明显的协同杀伤作用，其机制可能与羟基喜树碱降低A549细胞线粒体膜电位有关。     

丹参酮I抗肿瘤作用及作用机制的实验研究

目的　通过丹参酮 I(tanshinone I)对肿瘤细胞的体内外实验研究 ,探讨丹参酮 I抗肿瘤作用及作用机制。方法　人肝癌细胞 (Hep G2 )培养液中加入不同浓度的丹参酮 I,培养 72小时 ,观察 Hep G2细胞的增殖率 ;倒置显微镜下观察 Hep G2细胞的形态变化 ;流式细胞仪 (FCM)检测 Hep G2细胞周期及凋亡率 ;免疫组化检测 Hep G2细胞的增殖凋亡调控相关基因 (Bax、Bcl- 2 )的蛋白表达。用 Hep G2细胞制作 Balb/c裸鼠荷瘤模型 ,每天腹腔注射丹参酮 I1次连续 10天 ,观察抑瘤率。结果　丹参酮 I抑制 Hep G2细胞生长 ;阻滞 Hep G2细胞周期于 G0 /G1 期并诱导细胞凋亡 ;通过下调 Bcl- 2基因表达 (P<0 .0 1) ,上调 Bax基因表达 (P<0 .0 1)诱导 Hep G2细胞凋亡 ;抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长 ,抑瘤率为 33.3%。结论　丹参酮 I具有抗肿瘤活性 ,其作用机制之一是诱导细胞凋亡。     

肺癌组织中黑色素瘤抗原-A3基因mRNA的表达及其序列点突变分析

目的检测肺癌组织中黑色素瘤抗原-3基因(MAGE-A3)mRNA的表达。方法用逆转录-套式聚合酶链反应(RT-PCR)对31例肺癌患者癌组织和相应癌旁组织MAGE-A3mRNA表达情况进行测定;PE-377DNA测序仪对5例10个RT-PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA序列测定。结果31例肺癌患者癌组织中26例表达MAGE-A3mRNA,阳性率为83.9%;相应的癌旁组织均未表达。DNA序列测定证明PCR扩增产物中目的基因片段均为MAGE-A3cDNA序列,所测5例样本中4例样本有两个相同位置的碱基发生了点突变(C2773→T2773;G2807→A2807),导致一个氨基酸残基改变(E143→K)。结论MAGE-A3mRNA在肺癌中呈高比例表达,提示此抗原有可能作为肺癌患者免疫治疗的靶抗原。我国肺癌患者中存在MAGE-A3基因个别位点的变异。