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Objective To develop a method for absolute quantification of interleukin 8 (IL—8) mRNA by using real-time polymerase chain reaction
(PCR).
Methods The IL —8 mRNA and protein expression in 2 human lung cancer cell lines, H460 and A549, were evaluated by real-time PCR and
ELISA. The IL-8 mRNA expression in 9 cases of normal lung tissue and 44 cases of non-small cell lung cancer (NSCLC) were examined.
Results The IL—8 mRNA copy number in a given sample can be measured by real-time PCR. The gene expression of IL—8 is correlated with
its protein secretion. The normalized value of IL—8 expression was 4.87±1.69 (copies/ 104 GAPDH copies) in normal lung tissue and 17.04 ±23.96 in NSCLC, respectively. The difference between these two groups is statistically
significant (P=0.002). Using 9.74 and 19.48 as cut-off points for positive expression and overexpression of IL—8, 52.3%(23/44cases) of NSCLC
were found to express an increased level of IL-8, among which 29.5% (13/ 44cases) were defined as positive expression and
22.7%(10/44cases) as overexpression. Statistical analysis indicated that IL—8 overexpression was significantly increased in
female cancers, squamous carcinoma, and in late stages of disease (P<0.05).
Conclusion The IL—8 gene expression can be determined by a real-time PCR technique. IL -8 overexpression is correlated with gender, histopathology
and stages of the disease. 相似文献
82.
目的 探讨WT 1基因表达水平与急性白血病 (AL)预后的关系及在微小残留病 (MRD )检测中的意义。方法 采用荧光定量RT PCR法 (FQ RT PCR ) ,测定 40例不同类型及处于不同疾病阶段 (2 6例初治、5例复发、9例CR >3年 )的AL患者WT1基因的表达。结果 对照组WT1基因均为阴性。 40例AL患者中有 2 6例WT 1基因表达阳性 ,阳性组与阴性组CR率分别为 3 4.6%和 78.5 % (P <0 .0 5 )。其中初治、复发与CR >3年的患者 ,WT 1阳性基因拷贝数的平均值分别为 4.14× 10 3 拷贝 /ml、8.5 8× 10 3 拷贝 /ml和 7.87× 10 1拷贝 /ml。CR后WT 1基因表达水平明显下降 ,复发后又显著升高。结论 FQ RT PCR实验方法客观准确 ,WT1基因的表达水平与AL患者的化疗效果及预后密切相关 ,可以作为检测MRD的标志 相似文献
83.
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85.
86.
为探讨急性早幼粒细胞白血病多药耐药基因mdrl与患者化疗疗效的关系利用反转录─聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测了31例APL患者mdrlmRNA的表达,同时检测了急性髓细胞白血病(AML)其他亚型37例及正常人20例。结果发现APL患者mdrl的阳性率,明显低于其他亚型(P<0.005),APL患者mdrlmRNA的表达水平(0.218±0.07)也低于其他亚型(0.556±0.25)(P<0.001)。12例初治APL患者mdrl全部阴性,完全缓解(CR)率为100%,4例复发ALP患者中3例mdrl阳性(75%)。在AML其他亚型,mdrl+与mdrlt-的CR1率分别为33.3%(3/9)和81.8%(9/11)。结果表明,mdrl的表达与患者化疗效果及预后密切相关,APL患者的mdrl为低表这。 相似文献
87.
食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化的意义 总被引:3,自引:1,他引:3
目的研究食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化与其mRNA表达的关系。方法选取4种食管癌细胞系OE21,OE19,OE33和TE7,经重亚硫酸钠处理后,采用限制性酶切图谱分析(COBRA)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,在DNA甲基转移酶抑制剂5-氮2^ -脱氧胞苷(5-aza-CdR)处理前后,对其MT-3基因CpG岛的甲基化情况及mRNA的表达情况进行对比研究。结果4种食管癌细胞系的MT-3基因均存在不同程度的CpG岛超甲基化。经5-aza-CdR处理后,超甲基化状态解除,mRNA的表达水平也较处理前明显提高(P=0.002)。结论食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛的超甲基化可抑制其mRNA表达。当其超甲基化解除后,MT-3基因的mRNA表达水平也会相应升高。 相似文献
88.
Survivin在AFB1高暴露地区肝细胞癌中的表达及其临床意义 总被引:13,自引:0,他引:13
目的:探讨Survivin在黄曲霉毒素B1(AFB1)高暴露地区肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用.方法:用逆转录聚合酶链反应检测来自广西南部黄曲霉毒素B1高暴露地区患者手术切除肝癌及其癌旁组织中Survivin mRNA的表达情况.结果:Survivin mRNA在55例HCC及其癌旁组织中的检出率分别为85.5%(47/55)及40.0%(22/55),两者差异有显著性(P<0.01).Survivin mRNA在HCC组织中的表达率与临床分期(P<0.05)和肿瘤直径(P<0.05)相关.结论:Survivin在HCC发生发展过程中起重要作用,HCC组织中的Survivin mRNA可作为AFB1高暴露地区HCC预后不良的参考指标. 相似文献
89.
90.