五味沙棘散对卵清蛋白诱导的过敏性支气管哮喘大鼠的保护作用及机制

目的 探究五味沙棘散对卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导的过敏性哮喘大鼠的保护作用及机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松（0.5 mg/kg）组和五味沙棘散（0.5、2.0 g/kg）组,建立OVA诱导的大鼠早期支气管哮喘模型,苏木素-伊红（HE）和Masson染色观察支气管病理情况及纤维化程度;免疫组化检测支气管间隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）的表达和分布;ELISA检测血清中免疫球蛋白E（immunoglobulin E,IgE）和白细胞介素-13（interleukin-13,IL-13）水平;亚甲基蓝法和WSP-1荧光探针法测定血清中硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）水平。建立CdCl₂诱导的支气管上皮BEAS-2B细胞损伤模型,MTT法检测细胞活性;Hoechest 33342染色法观察细胞核形态变化;MitoSOX染色检测细胞线粒体活性氧（mitochondrial reactive oxygen species,mtROS）水平;Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3,Caspase-3）、核因子红细胞系2相关因子（nuclear factor erythroid 2-related factor,Nrf2）和Kelch样ECH关联蛋白1（Kelch like ECH associated protein 1,Keap1）蛋白表达。结果 五味沙棘散能够减少支气管黏膜上皮细胞脱落和黏液分泌（P＜0.001）,降低胶原纤维的沉积和Cx43的表达及分布（P＜0.05、0.01、0.001）,降低血清中IgE、IL-13水平（P＜0.05）,升高血清中H₂S水平（P＜0.05、0.01）。五味沙棘散含药血清呈剂量相关性地抑制CdCl₂诱导的BEAS-2B细胞凋亡及mtROS水平（P＜0.01、0.001）,上调Caspase-3和Nrf2蛋白表达（P＜0.05、0.01）,下调Keap1蛋白表达（P＜0.01）。结论 五味沙棘散对OVA诱导的哮喘大鼠和CdCl₂诱导的支气管上皮细胞凋亡均具有保护作用,其机制可能与调控Nrf2/Keap1信号通路有关。     

HPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS法鉴定森登-4味涂剂中化学成分

目的 采用高效液相色谱–四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱（HPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS）法鉴定森登-4味涂剂中化学成分。方法 色谱条件：Shim-pack GIST-HP C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈–0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量0.35 mL/min,柱温为40℃,进样量为5μL。质谱条件：检测方式Full MS/dd-MS2,扫描范围m/z110～1 200。电喷雾离子源（ESI）,正、负离子模式扫描,喷雾电压4.20 kV（+）、3.80 kV（-）,碰撞能量（CE）30 eV。通过全方化学成分信息库,结合多级质谱碎片信息、对照品保留时间,鉴定森登-4味涂剂中化学成分。结果 在森登-4味涂剂中共鉴定出60个成分,包括16个黄酮类成分、13个有机酸类成分、11个环烯醚萜类成分、10个鞣质类成分、4个氨基酸类成分、4个脂肪酸类成分、2个三萜类成分,并考察了山栀苷、槲皮素、阿魏酸、克里拉京、齐墩果酸、脯氨酸、亚油酸的MS2图和可能的裂解途径。结论 对森登-4味涂剂中化学成分进行了快速、准确的鉴定,为其质量标准建立、药...     

高效液相色谱法测定金钱草胶囊中槲皮素的血药浓度

目的建立金钱草胶囊中槲皮素的血药浓度测定方法,为临床应用和药代动力学研究提供技术参考。方法采用高效液相色谱-紫外检测方法测定,色谱柱为Kromasil C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.4%磷酸溶液(40∶10∶50),流速1 mL/min,柱温30℃,进样量20μL,检测波长360 nm。血样提取方法,以β-葡萄糖苷酸酶水解后,以乙酸乙酯提取,氮气流吹干后复溶进样。结果槲皮素保留时间约为8.8 min,金钱草胶囊中槲皮素的血药浓度线性范围0.08～12μg/mL,最低定量限为0.05μg/mL,检测限为0.02μg/mL。方法平均回收率为97.50%～102.50%,水解提取回收率为76.46%～87.43%,日内精密度RSD为4.18%～6.17%,日间精密度RSD为5.08%～8.63%。结论方法简便,分析速度快,灵敏度较高,重复性好,适用于临床血药浓度测定及药代动力学研究。     

高效毛细管电泳法同时测定红花中腺苷、芦丁和槲皮素的含量

目的 用高效毛细管电泳法对红花中的有效成分腺苷、槲皮素和芦丁同时进行含量测定。方法 采用熔融石英毛细管柱（66.5 cm×50 μm ID，有效长度58 cm）作为分离通道；以50 mmol·L^-1硼砂其中含18%甲醇的溶液（pH 9.7）为运行缓冲液；运行电压: 24 kV；毛细管柱温: 20 ℃；检测波长： 210 nm。结果 以利福平为内标，腺苷、芦丁和槲皮素分别在10～160 mg·L^-1，100～2 000 mg·L^-1和100～1 600 mg·L^-1 线性关系良好（R>0.998）；平均回收率分别为98.5%～100.5%， 96.9%～99.5%和99.1%～99.5%； RSD分别为6.5%，5.2%和5.6%(N=5)。结论 此法操作简便快速，回收率及重现性好，可作为红花质量控制的方法。     

Novel flavonoid-based biodegradable nanoparticles for effective oral delivery of etoposide by P-glycoprotein modulation: an in vitro,ex vivo and in vivo investigations

Abstract

A receptor level interaction of etoposide with P-glycoprotein (P-gp) and subsequent intestinal efflux has an adverse effect on its oral absorption. The present work is aimed to enhance the bioavailability of etoposide by co-administering it with quercetin (a P-gp inhibitor) in dual-loaded polymeric nanoparticle formulation. Poly-lactic-co-glycolic acid (PLGA) nanoparticles were optimized for various parameters like o/w phase volume ratio, poly-vinyl alcohol concentration, PLGA concentration and sonication time. The cytotoxicity studies (MTT assay) revealed a 9- and 11-fold decrease in the IC 50 values for etoposide-loaded nanoparticles (ENP) and etoposide?+?quercetin dual-loaded nanoparticles (EQNP) when compared to that of free etoposide, respectively, and the results were further supported by florescent-activated cell sorter studies. The confocal imaging of the intestinal sections treated with ENP and EQNP containing fluorescent probe (rhodamine) showed the superiority of the EQNP to permeate deeper. Furthermore, pharmacokinetic studies on rats revealed that EQNP exhibited a 2.4-fold increase in bioavailability of etoposide than ENP with no quercetin. The developed loaded nanoparticles have the high potential to enhance the bioavailability of the etoposide and sensitize the resistant cells.     

水溶性槲皮素的研究

水溶性槲皮素的研究佘戟１）莫丽儿康铁邦梁念慈（广东医学院化学教研室、医用生物化学研究所，湛江５２４０２３）槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ；３，３′，４′，５，７－ｐｅｎｔａｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ）存在于许多植物体内，它的提取和纯化已有大量的报道．国...     

槲皮素对在体大鼠心肌缺血再灌性心律失常的保护作用

本文用在体Wistar大鼠心肌缺血再灌注模型,观察槲皮素对缺血再灌性心律失常的保护作用。在再灌前1min至再灌后2min静脉滴注槲皮素(0.5mmol/L,10ml/kg),可显著缩短心律失常的持续时间,降低室颤的发生率、再灌注区心肌组织中MDA的含量及XOD的活性,而对SOD具有明显的保护作用。结果提示槲皮素的抗心肌缺血再灌性心律失常作用可能与抑制心肌组织中OFR的形成和保护心肌组织中SOD或直接清除OFR有关。     

槲皮素对人卵巢癌细胞-3增殖和凋亡的影响

目的:探讨槲皮素对人卵巢癌细胞-3(ovarian carcinoma cell,OVCAR-3)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:将对数生长期的OVCAR-3细胞随机分为对照组和槲皮素组。对照组细胞给予培养基常规培养,而槲皮素组细胞加入槲皮素(160μmol·L~(-1))。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖;流式细胞仪检测人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞凋亡,RT-PCR检测细胞受体型酪氨酸激酶2(JAK2),信号传导与转录激活因3(STAT3),B细胞淋巴因子2(Bcl-2),人Bcl-2相关X蛋白(Bax)信使mRNA表达水平。免疫蛋白印记法检测各组OVCAR-3细胞中STAT3,磷酸化受体型酪氨酸激酶2(p-JAK2),磷酸化信号传导与转录激活因3(p-STAT3),Bax,Bcl-2蛋白的变化,Caspase3活性试剂盒检测Caspase3活性。结果:MTT检测结果显示槲皮素组与对照组相比,人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖率明显下降(P0.05)。流式细胞仪检测显示槲皮素组OVCAR-3细胞凋亡率较对照组明显升高(P0.05)。RT-PCR检测显示槲皮素组与对照组JAK2和STAT3信使mRNA表达水平无明显差异,而槲皮素组Bax信使mRNA水平比对照组明显增高,槲皮素组Bcl-2信使mRNA水平比显著低于对照组。Western blotting检测显示,槲皮素组的JAK2和STAT3蛋白表达与对照组比较,无明显差异(P0.05),而槲皮素组的p-STAT3,p-JAK2和Bcl-2蛋白表达水平显著低于对照组(P0.05),槲皮素组的Bax表达显著高于对照组(P0.05)。Caspase3活性试剂盒检测结果显示,槲皮素组Caspase3活性表达水平显著高于对照组。结论:槲皮素能明显抑制人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞增殖,促进人卵巢癌细胞株OVCAR-3细胞凋亡,其作用机制可能是通过激活JAK2/STAT3信号传导通路。     

槲皮素和黄芪甲苷对多药耐药铜绿假单胞菌抗菌活性的研究

目的：测定槲皮素和黄芪甲苷对多药耐药铜绿假单胞菌是否具有抑菌活性。方法微量稀释法药敏试验TTC染色用于定量检测中药单体对多药耐药铜绿假单胞菌的体外最低抑菌浓度MIC。结果槲皮素MIC为63．5μM,黄芪甲苷对铜绿假单胞菌无明显抑制作用。结论槲皮素对于耐药铜绿假单胞菌具有良好的抑菌活性,且呈浓度依赖性。对于槲皮素的进一步开发利用,在临床治疗和新药研制方面都具有深远意义。