miR-149-5p通过靶向AEBP1调控胃癌细胞的迁移侵袭

目的：探讨miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响及分子机制。方法：qRT-PCR检测胃癌细胞株和组织标本中miR-149-5p的表达,分析其表达水平与胃癌患者临床病理特征参数及预后的相关性,建立过表达和干扰miR-149-5p的胃癌细胞株,Transwell实验检测miR-149-5p表达水平对胃癌癌细胞迁移侵袭能力的影响;生物信息学网站预测miR-149-5p的靶基因,采用荧光素酶报告基因实验加以验证。结果：miR-149-5p在胃癌组织和细胞株中均低表达（均P<0.05）。miR-149-5p的表达水平与胃癌患者的浸润深度（P=0.016）、淋巴结转移（P=0.001）和TNM分期（P=0.023）相关。miR-149-5p低表达是胃癌患者总生存期的独立危险因素。与对照组相比,miR-149-5p mimics明显抑制胃癌细胞的迁移侵袭能力（均P<0.01）,而转染miR-149-5p inhibitors后得到了相反的结果（均P<0.05）。miR-149-5p靶向调控脂肪细胞增强结合蛋白1(Adipocyte enhancer binding pro...     

Circ_0000003通过调控miR-338-3p/IRS2轴调控甲状腺癌细胞增殖、转移和凋亡

目的 探究circ_0000003对甲状腺癌(TC)细胞增殖、转移和凋亡的影响及其机制.方法 CGTH W-3细胞分为转染组-1(转染空白质粒)、转染组-2(转染pcDNA-circ_0000003)、转染组-3(共转染miR-338-3p mimics和pcDNA-circ_0000003);TPC-1细胞分为转染组...     

LncRNA MYLK-AS1调节miR-141-3p/STMN1轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的：探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肌球蛋白轻链激酶反义RNA1(myosin light chain kinase antisense RNA1,MYLK-AS1)调节miR-141-3p/微管不稳定蛋白1(stathmin 1,STMN1)轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法：将HGC27细胞分为NC组、si-NC组、si-MYLK-AS1组、si-MYLK-AS1+inhibitor NC组、si-MYLK-AS1+miR-141-3p inhibitor组。双萤光素酶报告基因实验检测LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p、STMN1的关系;qRT-PCR检测HGC27细胞中LncRNA MYLK-AS1、miR-141-3p表达;CCK-8法检测HGC27细胞增殖情况;流式细胞术检测HGC27细胞凋亡;使用Transwell实验评估了HGC27细胞的侵袭和迁移能力,并统计了穿透基质膜的细胞数量;同时采用Western blot技术检测了HGC27细胞中STMN1、E-cadherin、Vimentin及N-cadh...     

CircRNA＿000809通过miR-200c-3p对子宫内膜异位症间质细胞的增殖、迁移及上皮间质转化的影响

目的：探讨circRNA＿000809通过靶向mi R-200c-3p调控子宫内膜异位症间质细胞增殖、迁移及上皮-间质转化（EMT）的作用。方法：收集2020年1月至2022年1月于温州医科大学附属第二医院育英儿童医院行卵巢囊肿剥除术患者的卵巢巧克力囊肿组织25例,设为子宫内膜异位症组;收集25例正常子宫内膜组织,标本来自于因早期宫颈癌行子宫切除术或者行宫腔镜检查术的育龄期非子宫内膜异位症患者,设为正常子宫内膜组。采用qRT-PCR法检测正常子宫内膜、异位内膜组织中circRNA＿000809、miR-200c-3p的表达量;分别采用EdU实验和Transwell实验检测异位子宫内膜间质细胞的增殖及迁移;采用蛋白质印迹法（Western blot）检测相关蛋白表达水平。结果：与正常子宫内膜组织比,异位子宫内膜中circRNA＿000809表达上调（P<0.05）,而miR-200c-3p的表达下调（P<0.05）;且Pearson相关性分析显示在异位子宫内膜组织中circRNA＿000809与miR-200c-3p的表达量呈负相关（P<0.05）;分别用siNC+in...     

止咳平喘方辅助布地奈德雾化对支气管哮喘患儿肺换气功能及血清miR-155、miR-21的影响

目的:探讨止咳平喘方辅助布地奈德雾化对支气管哮喘患儿肺换气功能及血清miR-155、miR-21的影响.方法:将支气管哮喘患儿90例随机分为对照组与试验组,每组45例,对照组给予常规治疗及布地奈德雾化,试验组在常规治疗基础上采用止咳平喘方辅助布地奈德雾化治疗,观察治疗前后患儿中医证候积分变化,咳嗽消失时间、憋喘消失时间...     

抑制miR-204表达对宫内发育迟缓新生大鼠学习记忆能力的影响及相关机制

目的探讨抑制miR-204表达对宫内发育迟缓（intrauterine growth restriction，IUGR）新生大鼠学习记忆能力的影响及机制。方法采用低蛋白饮食法建立IUGR大鼠模型，将3日龄IUGR幼鼠设为模型组、miRNA拮抗剂对照组（antagomir-NC组）和miR-204拮抗剂组（antagomir组），另取正常幼鼠设为对照组，每组10只。Morris水迷宫实验测定大鼠学习与记忆能力；qRT-PCR检测各组大鼠海马组织中miR-204和脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）mRNA表达水平；尼氏染色、Tunel法观察海马组织尼氏小体数量和细胞凋亡水平；Western blot检测海马组织中BDNF/TrkB信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组比较，模型组大鼠逃避潜伏期增加，跨台次数减少；海马组织中细胞凋亡率和miR-204表达水平升高，而尼氏小体数量、BDNF mRNA，以及BDNF、p-TrkB和p-CREB蛋白表达水平降低（P<0.001）。抑制miR-204表达后，IUGR大鼠海马组织中尼氏小体数量、BDNF mRNA，以及BDNF、p-TrkB和p-CREB 蛋白表达水平升高，细胞凋亡率和miR-204表达水平降低，逃避潜伏期减少，跨台次数增加（P<0.001）。结论抑制miR-204可改善IUGR新生大鼠学习及记忆功能，其作用机制可能与靶向激活BDNF/TrkB信号通路有关。     

小鼠肾脏缺血-再灌注损伤miRNAs差异表达谱研究

目的  筛选小鼠肾脏缺血-再灌注损伤（IRI）差异性表达的微小核糖核酸（miRNAs）,为进一步深入阐明肾脏IRI发生、发展的分子机制奠定基础。方法  应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉制备急性肾缺血损伤模型,将15只小鼠分为IRI组和假手术组（E组）,IRI组再分为A组（缺血时间45 min,再灌注时间24 h）、B组（缺血时间25 min,再灌注时间24 h）、C组（缺血时间45 min,再灌注时间4 h）、D组（缺血时间25 min,再灌注时间4 h）,每组3只。采用肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果来鉴定各组小鼠的IRI程度;采用miRNAs芯片聚类分析对小鼠IRI特定缺血时间（25、45 min）和再灌注时间（4、24 h）下肾脏差异性表达差异表达的miRNAs进行筛选鉴定;采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）对小鼠IRI后差异表达miRNAs芯片miR-695与miR-145进行验证。结果  肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果显示成功建立IRI模型。与假手术组相比,肾脏IRI组共检出71种差异性表达显著的miRNAs,其中30种下调表达,41种上调表达。qRT-PCR法检测结果表明,以E组特定miRNAs的表达量标准化为1,miR-695及miR-145在肾脏IRI组的相对表达量分别为11.82和0.31（均为P＜0.05）,与芯片结果基本一致。结论  肾脏IRI后,miRNAs表达谱发生差异性改变,这些差异性表达的miRNAs将可作为肾脏IRI的分子标志物而具有潜在的临床及科研应用价值。     

长链非编码RNA FAM201A靶向miR-488-3p对胃癌细胞生物学行为及放射敏感性的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)序列相似性家族201-成员A(family with sequence similarity 201-member A,FAM201A)靶向mi R-488-3p对胃癌细胞生物学行为及放射敏感性的影响。方法:选取2014年1月至2017年1月间于莱阳中心医院确诊并进行胃癌根治性切除手术(术前均未经过放疗和化疗治疗)的胃癌患者的肿瘤组织标本和配对的非癌性黏膜标本63例,采用q RT-PCR检测63例胃癌组织和与其对应的癌旁组织中FAM201A及mi R-488-3p的表达水平。构建抑制FAM201A表达的MGC803胃癌细胞株。四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力。用不同辐射强度(0、2、4、6和8 Gy)射线照射抑制FAM201A表达的MGC803细胞,克隆形成实验检测细胞存活分数,绘制单击多靶模型拟合曲线。双荧光素酶报告基因实验和q RT-PCR验证FAM201A和mi R-488-3p的靶向关系。结果:与癌旁...     

奥沙利铂通过调控miRNA-7-5p/RAF-1促进胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的探讨奥沙利铂如何调控MAPK通路,抑制胃癌细胞的增殖。方法 NCBI检索文献,利用TargetScan、StarBase和miRBase数据库,进行GO分析与KEGG通路富集,找到相关miRNAs,预测靶基因。应用Real-time PCR、MTT、Hoechst33258、流式细胞术、细胞划痕实验、Western blot等方法分析人胃癌SGC-7901细胞的增殖、细胞周期、侵袭及蛋白表达情况。结果胃癌细胞中miR-7-5p显著低表达,RAF1与miR-7-5p存在互靶关系。miR-7-5p mimics与奥沙利铂均可促进SGC-7901细胞的凋亡,提高G1期细胞百分率(P<0.05),降低侵袭、迁移速度。caspase3、caspase9蛋白表达升高,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。结论过表达mi R-7-5p与奥沙利铂均可促进胃癌SGC-7901细胞的凋亡,提示奥沙利铂可能通过上调mi RNA-7-5p促进SGC-7901细胞的凋亡,降低侵袭、迁移速度。     

miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系。方法选取122例肝细胞癌患者作为本研究对象。聚合酶链式反应检测miR-96和miR-103表达水平,采用单因素和多因素Cox回归模型,探讨肝癌患者中位生存时间的危险因素并建立预测模型。结果肝癌组织中miR-96和miR-103相对表达水平均显著高于癌旁正常组织;肝癌组织中miR-96和miR-103的表达与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期及分化程度均有关(均P<0.05),而与性别、年龄及合并肝硬化等无关(P>0.05);所有患者随访60月,中位生存时间为37.8月。单因素分析结果显示:肝细胞癌患者中位生存时间与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期、病理分化程度、miR-96和miR-103表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素分析结果显示:TNM分期为Ⅲ～Ⅳ、低分化、淋巴结转移、miR-96和miR-103高表达是肝癌患者中位生存时间独立危险因素。结论肝癌组织中miR-96和miR-103的高表达是患者预后差的独立影响因素,可作为原发性肝癌患者预后评估指标。