微小RNA-150对急性ST段抬高型心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术后6月内主要不良心血管事件的预测价值

目的探究微小RNA-150(miR-150)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者行经皮冠状动脉介入术(PCI)后主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选取我院2016年1月至2019年1月收治的130例确诊为STEMI并行急诊PCI治疗患者,依照患者PCI术后6月是否发生MACE分为MACE组(n=36)和非MACE组(n=94)。比较2组患者miR-150表达水平及临床一般资料。Logistic回归分析急性STEMI患者PCI术后6月发生MACE的危险因素。Spearman相关性分析miR-150与各危险因素的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-150对急性STEMI患者PCI术后6月内MACE的预测价值。结果 2组患者在性别、年龄、合并症(糖尿病、高血压、冠心病、高脂血症)、梗死部位、术后用药、急诊PCI时间、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、甘油三酯、血红蛋白比较差异无统计学意义(P0.05)。MACE组心率(HR)、收缩压、舒张压、血小板、C反应蛋白(CRP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)显著高于非MACE组,左心室射血分数(LVEF)、miR-150水平显著低于非MACE组,差异具有统计学意义(P=0.000)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、高血压史、HR、LVEF、CRP、CK-MB、NLR、miR-150均为急性STEMI患者PCI术后6月发生MACE的独立危险因素。相关性分析结果显示,miR-150与高血压史、HR、CRP、CK-MB、NLR水平呈明显负相关性,与年龄、LVEF呈明显正相关性(P=0.000)。ROC曲线表明,miR-150诊断急性STEMI患者PCI术后6月内发生MACE的切点为0.23,曲线下面积为0.905(95%CI 0.871～0.939)。结论低水平miR-150为急性STEMI患者PCI术后6月内发生MACE的独立危险因素,检测miR-150水平可帮助评估急性STEMI患者预后。     

Expression of miR-1304 in patients with esophageal carcinoma and risk factors for recurrence

BACKGROUND Esophageal carcinoma is a malignant gastrointestinal tumor with a very poor prognosis.MicroRNA(miR)-1304 is a newly discovered non-coding RNA,which shows differential expression in other cancers,and its clinical value in esophageal carcinoma remains unclear.AIM To explore the expression of miR-1304 in patients with esophageal carcinoma and its clinical value.METHODS The expression of miR-1304 in patients with esophageal carcinoma was analyzed based on the data on miR in esophageal carcinoma downloaded from The Cancer Genome Atlas database.Quantitative real-time polymerase chain reaction was adopted to determine the expression of miR-1304 in the tissues and serum of patients.The clinical diagnostic value of miR-1304 and independent factors for recurrence and prognosis of esophageal carcinoma were then analyzed.The potential target genes of miR-1304 were predicted,and then analyzed based on gene ontology,Kyoto Encyclopedia of Genes,and Genomes,and protein-protein interaction.RESULTS The expression of miR-1304 in the tissues and serum of patients with esophageal carcinoma increased,and was also increased according to the database.Patients with high expression of miR-1304 suffered increased rates of tumor≥3 cm,low differentiation and stage II+III.miR-1304 had a diagnostic value in identifying esophageal carcinoma,tumor size,differentiation and TNM stage.Tumor size,differentiation,TNM stage,and miR-1304 were independent risk factors for recurrence of esophageal carcinoma,and they had certain predictive and diagnostic value for the recurrence of esophageal carcinoma.Seventy-eight patients showed a 3-year survival rate of 38.46%,and patients with high expression of miR-1304 had a relatively lower survival rate.Multivariate analysis revealed that tumor size,differentiation,recurrence and miR-1304 were independent factors for the prognosis of patients.MiRTarBase,miRDB,and Targetscan predicted 20 target genes in total.Gene ontology enrichment analysis found 18 functions with aP<0.05,and Kyoto Encyclopedia of Genes,and Genomes analysis found 11 signal pathways with aP<0.05.String analysis of protein co-expression found 269 relationship pairs,of which co-expression with epidermal growth factor was the most common.CONCLUSION miR-1304 can be used as a potential indicator for the diagnosis and recurrence of esophageal carcinoma and for survival of patients with this disease.     

血清miR-29b、miR-126与老年糖尿病视网膜病变的关系

目的 探究老年糖尿病视网膜病变(DR)患者血清中miR-29b和miR-126水平及相关性研究。方法 选取2017年5月-2019年11月来台州市立医院接受治疗的126例老年DR患者作为研究对象,其中单纯2型糖尿病(DM)组42例,非增殖性糖尿病视网膜病变(NPDR)组40例,增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)组44例;另选取40例老年体检者作为对照组。采用实时荧光定量PCR方法检测血清中miR-29b和miR-126水平。比较各组间血清miR-29b、miR-126,血压、血糖及血脂等指标差异,将影响糖尿病患者视网膜病变的指标进行单因素分析,同时应用多因素Logistic逐步回归分析探讨糖尿病视网膜病变的危险因素。结果 四组血清miR-29b和miR-126水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),其中PDR组血清miR-29b水平明显高于对照组、DM组及NPDR组,且miR-126水平明显低于对照组、DM组及NPDR组;NPDR组血清miR-29b明显高于DM组和对照组,且miR-126明显低于DM组和对照组(P＜0.05);NPDR组及PDR组SBP、DBP明显高于对照组,NPDR组、PDR组及DM组FBG、2hPG、HbA1c、TG、TC、HDL-C水平明显高于对照组,PDR组FBG、2hPG、HbA1c、TG水平明显高于DM组(P＜0.05)。单因素分析显示,年龄、血清miR-29b、miR-126、HbA1c、FBG等因素具有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic逐步回归分析,结果显示患者年龄<75岁、血清miR-126<2.43ng/ul为老年糖尿病患者视网膜病变的保护因素,血清miR-29b≥8.38ng/ul、HbA1c≥6.00%、FBG≥8.15mmol/L为老年糖尿病患者视网膜病变的危险因素。结论 老年DR患者血清miR-29b水平升高,而血清miR-126水平降低,二者有望成为老年糖尿病视网膜病变的有效生物标志物。     

MicroRNA-494对胃癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

目的?探讨microRNA-494（miR-494）对胃癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法?选取2015年1月—2018年1月被陕西省肿瘤医院收治并行手术切除的60例患者的胃癌组织及对应癌旁组织（距肿瘤边缘>2?cm）标本。将胃癌细胞MGC803分为miR-494组和对照组。采用PCR检测胃癌组织及体外培养细胞中的miR-494表达水平。在MGC803细胞中过表达miR-494,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。PCR及Western blotting检测miR-494潜在靶点Cyclin D1的表达变化。结果?癌旁组织miR-494相对表达量较胃癌组织高（P?<0.05）。不同肿瘤直径、TNM分期miR-494相对表达量比较,差异有统计学意义（P?<0.05）。对照组MGC803细胞miR-494相对表达量较miR-494组低（P?<0.05）。miR-494组OD值较对照组低（P?<0.05）。对照组CyclinD1 mRNA和蛋白相对表达量较miR-494组高（P?<0.05）。miR-494与CyclinD1免疫组织化学评分呈负相关（r?=-0.469,P?<0.05）。结论?胃癌组织中miR-494表达水平降低,过表达miR-494能通过下调Cyclin D1的表达发挥抑制胃癌细胞增殖和细胞周期进展的作用。     

MicroRNA-184 promotes proliferation ability of glioma cells by regulating FOXO3

Objective:To investigate the effect of microRNA(miR-184)on regulating the genesis.development and prolifration of glioma cells.Methods:Lipidosome was used to transfect miR-184 mimic and inhibitor to glioma cell ling,and the cell proliferation ability changes were determined by MTT and plate cloning experiment after the transfection.WB test was used to measure the levels of cyclinD1,p27 and FOXO3.Meanwhile.QPCR was used to detect miR-184expression in glioma cell line.glioma tissues and adjacent tissues.Luciferase experiment was used to test 3'UTR gene targeting regulation of miR-184 and FOXO3.Results:QPCR results showed a significaat lower miR-184 expression level in glioma cell line and glioma tissues than that in juxtacancerous tissue.MTT and plate cloning experiments have shown that after overexpressing of miR-184,the cell proliferation capacity of glioma U87 and T98G was signifieantly increased,which was significantly inhibited after the inhibition of miN-184.WB results showed a lower expression level of p27 in U87 and T98G cells,and a higher expression level of cyclind1after over-expressing of miR-184 wss observed.However.a lower expression level of eyelinD1and a higher expression level of p27 after the inhibition of miR-184.The luciferase activity was inhibited after the over-expressing of miR-184.Conclusions:MiR-184 can affect the proliferation abilities of glioma cells and regulate the cell cycle related protein.It plays an important role in the occurrence and development of gliomas.     

miR-125b通过TLR4/NF-κB信号通路对心脏成纤维细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨miR-125b通过Toll样受体4/核因子κB（TLR4/NF-κB）信号通路对心脏成纤维细胞增殖和迁移的影响,阐明miR-125b在心肌纤维化中的作用及机制。方法：将对数生长期HEH2细胞随机分为空白对照组、阴性对照组和miR-125b inhibitors组。miR-125b inhibitors组HEH2细胞转染miR-125b inhibitors,阴性对照组HEH2细胞转染阴性对照inhibitors,空白对照组HEH2细胞不进行转染。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定各组细胞中miR-125b水平,采用MTT法测定HEH2细胞增殖活性,Transwell小室测定HEH2细胞迁移能力,采用Western blotting法测定HEH2细胞中Ⅰ型胶原蛋白（Col Ⅰ）、Ⅲ型胶原蛋白（Col Ⅲ）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、TLR4和NF-κB蛋白表达水平。结果：与空白对照组和阴性对照组比较,miR-125b inhibitors组HEH2细胞中miR-125b水平降低（P<0.01）,细胞增殖活性和迁移细胞数降低（P<0.05）,Coll Ⅰ、Coll Ⅲ、α-SMA、TLR4和NF-κB蛋白表达水平降低（P<0.05）。空白对照组和阴性对照组HEH2细胞中miR-125b水平,细胞增殖活性,迁移细胞数,细胞中Coll Ⅰ、Coll Ⅲ、α-SMA、TLR4和NF-κB蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：下调miR-125b水平可抑制心脏成纤维细胞增殖和迁移,其机制可能与TLR4/NF-κB信号通路有关。     

胃癌患者血清中胃癌相关细胞因子检测及其在胃癌诊断中的应用价值

检测胃癌患者血清中17种胃癌相关细胞因子的水平,研究其与miR-10b水平的相关性,筛选在实验诊断中对胃癌诊断有意义的肿瘤标志物并探讨其对胃癌诊断的应用价值。     

血清miR-27与老年2型糖尿病下肢血管病变及25（OH）D3水平的关系

目的分析血清miR-27与老年2型糖尿病下肢血管病变及25(OH)D3水平的关系。方法选取2017年10月-2019年5月河北省沧州市人民医院内分泌科确诊老年2型糖尿病患者86例为T2DM组,并以有无下肢血管病变分为下肢血管病变(LLPAD)亚组44例和非下肢血管病变(Non-LLPAD)亚组42例;选择同期医院门诊健康体检者76例为对照组,测定比较各组血清miR-27 mRNA表达及TC、TG、HDL-C、LDL-C、HbA1c、FPG、25(OH)D3、hs-CRP、Fib水平。结果 T2DM组miR-27 mRNA、TC、TG、LDL-C、Fib、HbA1c、hs-CRP、FPG水平高于对照组,25(OH)D3、HDL-C水平低于对照组(t=13.371、13.036、25.364、19.698、29.326、38.489、95.524、66.547,66.241、8.698,P均=0.000);LLPAD亚组miR-27 mRNA、TC、TG、LDL-C、Fib、HbA1c、hs-CRP、FPG水平高于Non-LLPAD亚组,25(OH) D3、HDL-C水平低于Non-LLPAD亚组(t=5.275、13.541、26.541、8.965、20.146、14.548、14.369、23.654、7.711、9.491,P均=0.000);miR-27 mRNA与25(OH)D3、HDL-C呈负相关(r=-0.486、-0.483,P=0.039、0.039),与TC、TG、LDL-C、Fib、HbA1c、hs-CRP、FPG呈正相关(r=0.651、0.572、0.494、0.747、0.438、0.523、0.591,P均<0.05);高水平的miR-27 mRNA、TC及低水平的25(OH)D3均为老年2型糖尿病合并下肢血管病变发生的危险因素(OR=2.43.7、4.268、13.625,P<0.05);miR-27 mRNA、25(OH)D3两者的AUC相近,均小于TC;miR-27 mRNA、25(OH)D3诊断老年2型糖尿病下肢血管病变的敏感度、特异度相近(P>0.05),均小于TC(P<0.05)。结论老年2型糖尿病下肢血管病变患者血清miR-27 mRNA水平升高,与25(OH)D3呈负相关;miR-27、25(OH)D3诊断2型糖尿病下肢血管病变具有较高的敏感度、特异度,可作为判定2型糖尿病下肢血管病变的生物学标志物。     

miR-203靶向Survivin抑制卵巢癌细胞增殖、迁移与侵袭

目的 探讨miR-203靶向抑制Survivin对卵巢癌SKOV3及OVCAR3细胞增殖、迁移及侵袭的影响。 方法 构建过表达miR-203、Survivin及空白对照组的慢病毒载体,转染卵巢癌SKOV3和OVCAR3细胞,嘌呤霉素筛选后构建空白对照组、过表达miR-203组、过表达Survivin组及过表达miR-203联合Survivin组卵巢癌细胞系。Western blotting方法测定各组卵巢癌细胞中Survivin及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达;MTT和平板克隆实验检测卵巢癌细胞增殖能力的改变;Transwell实验检测对细胞迁移和侵袭能力的影响。 结果 (1) 过表达miR-203抑制Survivin的表达及EMT(P<0.05);(2) MTT、平板克隆实验及transwell实验显示,与空白对照组相比,过表达miR-203组能够抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05);而过表达Survivin逆转了miR-203对卵巢癌的抑制作用(P<0.05)。 结论 miR-203通过靶向Survivin抑制EMT从而抑制卵巢癌的增殖、迁移及侵袭,miR-203/Survivin/EMT轴有望成为卵巢癌治疗的新靶点。     

miR-25-3p在40例子宫内膜腺癌组织中的表达及对KLE细胞生物学功能的影响

目的 探讨miR-25-3p在子宫内膜腺癌组织中的表达及其对KLE细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。 方法 选取2018年1月至12月在河北医科大学第四医院妇科行手术治疗的子宫内膜腺癌患者40例,采用Real-time PCR方法检测癌和癌旁正常组织中miR-25-3p的表达水平;应用细胞转染技术将miR-25-3p模拟物转染至子宫内膜腺癌细胞KLE中,转染后分为过表达组和对照组;采用Real-time PCR方法检测转染后两组KLE细胞中miR-25-3p的表达水平;分别应用流式细胞术、Transwell试验、基质胶试验及流式细胞Annexin v-PI 双染实验检测两组细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡能力。 结果 miR-25-3p在40例子宫内膜腺癌和癌旁组织中的相对表达量分别为0.38±0.91、0.17±0.51,癌组织表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=12.28,P=0.003);增殖实验检测结果显示,两组增殖指数分别为(59.41±0.78)%、(40.69±0.78)%,过表达组高于对照组,差异有统计学意义(各期两组间均值差异均有统计学意义: G0G1 期t=12.504, P<0.001; S 期t=6.902, P=0.020; G2M期t=4.203, P=0.014;PI期t=12.475,P<0.001);迁移实验检测结果显示,两组迁移细胞个数分别为(28.54±1.73)个、(19.21±1.62)个,过表达组高于对照组,差异有统计学意义(t=8.404, P=0.001);侵袭实验检测结果显示,两组的侵袭细胞个数分别为(36.66±1.53)个、(17.66±1.53)个,过表达组高于对照组,差异有统计学意义(t=15.234, P<0.001);凋亡检测结果显示,两组的细胞凋亡率分别为(2.75±0.58)%、(4.81±0.31)%, 过表达组低于对照组,差异有统计学意义(t=5.443, P=0.006)。 结论 miR-25-3p在子宫内膜腺癌组织中呈高表达。过表达miR-25-3p可能促进子宫内膜腺癌细胞KLE的增殖、迁移和侵袭,抑制细胞的凋亡。