Astrocyte RNA in relation to neuronal RNA depletion in Alzheimer's disease

Summary A new double-staining procedure, in which the techniques of immunocytochemistry of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and quantitative microdensitometry of azure B-RNA were combined, was used to study nucleic acid alterations in fibrous astrocytes in Alzheimer's disease (AD). RNA contents of GFAP-positive cells of the hippocampal endplate (Rose's H₃-H₅ fields) and the dentate gyrus molecular layer were determined in ten autopsy-proven AD patients (ages 51–88) and ten age-matched, non-demented control. In addition, RNA contents of pyramidal neurons of the endplate were examined. While there were no differences in RNA contents of astrocytes of either region between AD patients and controls, neuronal RNA was markedly depleted. These data suggest that astrocytes maintain protein synthetic capabilities in AD and that RNA loss is limited to the neuronal compartment.Supported by Grants 1P01-AG05119 and 1P50-AG05144 from the National Institutes of Health and by a Small Research Project Award from the University of Kentucky Medical Center     

丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒复制的研究

９例临床诊断为丙型肝炎患者，研究其外周血单核细胞中ＨＣＶＲＮＡ的存在及复制。９例患者血清标本抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ均为阳性，采用高敏感的逆转录一套式ＰＣＲ法测定其外周血单核细胞中ＨＣＶ正、负链ＲＮＡ，结果９例患者外周血单核细胞中７例ＨＣＶ正链ＲＮＡ阳性，３例ＨＣＶ负链ＲＮＡ阳性，证实部分丙肝患者外周血单核细胞中存在ＨＣＶ的复制，表明肝细胞并非为ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。     

田径运动员心缩间期的研究

<正> 近年来在运动医学领域中,心缩间期(STI)被认为是评定运动员心脏功能状况的指标之一。为了进一步探讨STI对于评定田径运动员的心脏功能状况的意义,我们进行了下列研究。     

Expression of IGF-I and IGF-II mRNA in breast tissue

Summary Expression of IGF-I and IGF-II was studied in human breast cancer tissues by in situ hybridization. IGF-I mRNA was detected only in stromal cells adjacent to normal breast epithelial cells. Stromal cells associated with the tumor cells did not contain IGF-I, nor did malignant or benign breast epithelial cells. In contrast, IGF-II mRNA was found in both the malignant epithelial cells and their adjacent stromal cells. These data imply that stromal cells associated with breast epithelium may switch expression from IGF-I to IGF-II during breast cancer evolution. This appearance of IGF-II expression may identify cancer-associated stromal cells that have a fetal phenotype.     

甲硫氨酸脑啡肽对抗体和白细胞介素－2的产生和基因转录的影响

甲硫氨酸脑啡肽对抗体的产生和Ｔ细胞免疫功能具有调节作用。为了明确这种作用机制，本实验观察了抗体和白细胞介素－２（ＩＬ－２）的产生和基因表达。甲硫氨酸脑啡肽对３Ｆ３杂交瘤细胞的抗体产生及其轻链和重链基因表达影响不明显。较高浓度的甲硫氨酸脑啡肽（０．１ｎｍｏｌ·Ｌ￣（－１）－１μｍｏｌ·Ｌ（－１））不仅促进ＩＬ－２的产生和ＩＬ－２ｍＲＮＡ的转录，而且能提高ＩＬ－２ｍＲＮＡ的稳定性。     

卵巢肿瘤细胞DNA及RNA含量的定量分析及其临床意义

本资料对９３例不同性质的卵巢肿瘤细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ含量进行了定量研究，其中５０例良性、４３例恶性。并对患者进行１～５年的随访。结果是卵巢良性肿瘤的异倍率（假阳性）为４４％，恶性肿瘤异倍率为８６．０％。以“标准ＤＩ”及“标准ＲＩ”为指标判断卵巢肿瘤性质的准确率较以“异倍性”为高，且双指标同时应用高于任一单指标：对卵巢良恶性肿瘤的诊断准确率分别为９０％和９５．３％。提出“标准ＤＩ”和“标准ＲＩ”是判断卵巢肿瘤性质的理想指标。且ＤＮＡ及ＲＮＡ含量与卵巢癌预后有密切关系。     

逆转录病毒介导的c-met-小干扰RNA抑制肝癌转移的体内研究

我们对c-met与肝癌的临床病理因素的关系进行了分析，明确了c-met与肝癌转移有关联。此前也通过逆转录病毒载体介导，成功建立了表达c-met-siRNA的肝癌细胞株MHCC97-H／c-met-siRNA，并证实逆转录病毒载体能长期、稳定表达针对靶基因c-met的siRNA，因此，本研究拟进一步在体内研究c-met-siRNA对肝癌生长、转移的影响，以期为c-met-siRNA应用于临床防治肝癌转移复发提供实验依据。     

短发卡RNA对人胃癌细胞STAT3基因的沉默作用

目的:探讨STAT3基因小发夹RNA（shRNA）表达质粒对胃癌MKN-45细胞STAT3基因的干扰作用。方法:根据STAT3 mRNA 编码序列，设计RNA干扰靶点，构建STAT3基因的特异性小RNA干扰质粒（psiRNA-H1/STAT3），使用脂质体转染人胃癌细胞系（MKN-45细胞）。实验分为对照（A）组，psiRNA-H1转染（B）组和psiRNA-H1/STAT3转染（C）组。通过RT-PCR和Western Blot检测STAT3特异性小RNA干扰基因对胃癌细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达的影响。结果:psiRNA-H1/STAT3经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确，并经测序证实。将其成功转染MKN-45细胞后，该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05)。 结论:将成功构建的针对STAT3基因的shRNA表达载体转染MKN-45细胞，能有效抑制该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达，为STAT3基因靶向治疗提供一定的实验依据。     

大隐静脉曲张微创外科治疗

目的　总结外科微创方法治疗大隐静脉曲张的经验。方法　采用大隐静脉高位结扎微创剥脱术治疗 465例 ( 5 72条患肢 )及静脉腔内激光治疗 6例 ( 7条患肢 )下肢静脉曲张患者。结果　在 471例患者中 ,随访到 42 7例 ,随访率 90 .7% ,平均随访时间 3 .8年。结果显示手术创伤小、并发症少、复发率低 ( 1.41% )。结论　此两种微创手术操作简单、合理、易于掌握 ,且疗效理想 ,值得推广。     

沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤作用的体外实验研究

目的初步观察用小分子干扰RNA(siRNA)沉默树突状细胞(DCs)恒定链(Ii)后,DCs疫苗的体外抗肿瘤效果。方法从小鼠骨髓分离骨髓前体细胞,细胞经100 ng/ml GM-CSF和100 ng/ml IL-4诱导培养6 d后,转染针对DCs Ii链特异的Ii-siRNA,转染后加用50 ng/ml TNF-α继续诱导细胞成熟48 h,然后分别用Western blot检测沉默效果及CCK-8试剂盒检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力;此外,DCs共转染Ii-siRNA和小鼠胃癌前体细胞MFC的总RNA后,与同种异体淋巴细胞共培养,通过ELISA检测培养上清IFN-γ/和IL-4的水平,并收集致敏淋巴细胞进行体外杀伤实验。结果Ii-siRNA明显抑制DCs Ii的表达。沉默Ii链能够增强DCs的淋巴细胞增殖能力,并促使淋巴细胞向Th1的方向漂移[IFN-γ:(5107±351)pg/ml,IL-4:(65±13)pg/ml,P＜0．05]。淋巴细胞经共转染Ii-siRNA和MFC RNA的DCs激活后,明显而特异地杀伤靶肿瘤细胞(杀伤百分率: 66．94%±2．75%,P＜0．05)。结论通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。