Nuclear import strategies of high-risk HPV18 L2 minor capsid protein

We have investigated the nuclear import strategies of high-risk HPV18 L2 minor capsid protein. HPV18 L2 interacts with Kap α₂ adapter, and Kap β₂ and Kap β₃ nuclear import receptors. Moreover, binding of RanGTP to either Kap β₂ or Kap β₃ inhibits their interaction with L2, suggesting that these Kap β/L2 complexes are import competent. Mapping studies show that HPV18 L2 contains two NLSs: in the N-terminus (nNLS) and in the C-terminus (cNLS), both of which can independently mediate nuclear import. Both nNLS and cNLS form a complex with Kap α₂β₁ heterodimer and mediate nuclear import via a classical pathway. The nNLS is also essential for the interaction of HPV18 L2 with Kap β₂ and Kap β₃. Interestingly, both nNLS and cNLS interact with the viral DNA and this DNA binding occurs without nucleotide sequence specificity. Together, the data suggest that HPV18 L2 can interact via its NLSs with several Kaps and the viral DNA and may enter the nucleus via multiple import pathways mediated by Kap α₂β₁ heterodimers, Kap β₂ and Kap β₃.     

重组hCGPx腺病毒对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧再复氧损伤的保护作用

目的:研究重组腺病毒介导的人胞质型谷胱甘肽过氧化物酶(hCGPx)转染对人肾小管上皮细胞缺氧再复氧损伤的保护作用。方法:将含hCGPXcDNA的质粒pGEM-T-hCG-Px和重组腺病毒穿梭质粒pACCMV-pLpA重组,构建pACC-MV-hCGPx穿梭质粒后,与包装质粒pJM17共转染293细胞,构建重组腺病毒AdCMV-hCGPx。以重组腺病毒载体AdCMV-hCGPx转染体外培养的人肾小管上皮细胞株HK-2,以转染空载体的HK-2细胞为对照组,检测转染细胞中CGPx的表达水平。将HK-2细胞经缺氧再复氧损伤处理后,分别检测细胞的存活率、凋亡率及死亡率。结果:各转染组细胞中CGPx的表达率显著高于对照组(P<0.01)。经缺氧再复氧损伤处理后,AdCMV-hCGPx转染组细胞的存活率较对照组明显增强,死亡细胞明显减少,细胞凋亡明显受到抑制。结论:重组腺病毒介导的hCGPx转染人肾小管上皮细胞可保护缺氧再复氧引起的损伤。     

小儿支气管肺炎患者中性粒细胞吞噬及细胞内杀菌功能与脂质过氧化关系的探讨

目的：探讨了小儿支气管肺炎患者血液中性粒细胞吞噬及细胞内杀菌功能与脂质过氧化的关系。方法：采用普通酵母菌对62例患者及35例正常人进行中性粒细胞吞噬和细胞内杀菌功能试验和化学比色法测定血浆丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）含量，放免法测超氧化物歧化酶（SOD），并与35名正常健康人作比较。结果：小儿支气管肺炎患儿在治疗前中性粒细胞吞噬及细胞内杀菌功能均明显低于正常人（P〈0．01），S01）、GSH-PX低于正常人组（P〈0．01），而MDA显著地高于正常人组（P〈0．01），相关分析显示，中性粒细胞吞噬及细胞内杀菌功能与MDA呈显著负相关（r=-0．3118，-0．3024，P〈0．05），经10d治疗后则与正常人比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：检测小儿支气管肺炎患儿血液中性粒细胞吞噬及细胞内杀菌功能与脂质过氧化的关系对临床诊断、治疗和预后观察有重要的临床价值。     

2型糖尿病肾病患者红细胞免疫功能与脂质过氧化的关系

目的：探讨了2型糖尿病肾病患者红细胞免疫功能的变化及其与脂质过氧化的关系。方法：应用红细胞酵母花环法对34例2型糖尿病肾病患者进行了红细胞免疫功能和化学比色法测定血清丙二醛（MDA）、超过氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）含量,并与35名正常健康人作比较。结果：2型糖尿病患者红细胞免疫复合物（RBC-IC）花环率和MDA水平明显升高（P〈0.05～0.01）,而红细胞C3b受体（RBCc3b-RR）、SOD、GSH-PX水平显著低于正常（P〈0.01）。相关分析显示：RBCc3b花环与MDA呈显著负相关（r=-0.4012,P〈0.05）,RBC-ICR与MDA呈显著正相关（r=0.5928,P〈0.01）。结论：2型糖尿病患者红细胞免疫功能降低与活性氧代谢紊乱密切相关。     

几种反应性氧代谢物逆转剂免疫佐剂作用的比较

目的 分析比较硫普罗宁(TIP)、还原型谷胱甘肽(GSH)、二氢氯组胺(DHT)3种反应性氧代谢物(ROM)逆转剂抗白血病细胞免疫治疗中的增效作用.方法 在K562细胞、NK细胞的混合培养系中分别加入单核细胞和白细胞介素-2,然后分别加入TIP、GSH、DHT,观察ROM水平及K562细胞抑制率(KIR)的变化.结果 加入E/MO=10/2、10/5、10/10三种浓度的MO,ROM水平分别为(389.79±43.83)U/L,(456.74±42.77)U/L,(601.42±21.92)U/L,KIR分别为82.36%,81.36%,48.09%:加入TIP、GSH或DHT后,当E/MO=10/2时,ROM水平从(389.79±43.83)U/L,分别减至(-1.20±60.70)U/L、(-3.58±9.49)U/L和(50.21 4-22.4)U/L(P＜0.05),随着TIP、GSH或DHT浓度的增加ROM水平逐渐减少,KIR从82.53%分别升至96.09%、96.39%和94.64%(P＜0.05).结论 TIP、GSH逆转ROM的效应强于DHT,提高NK细胞对K562的抑制率,其效应强度与DHT相似,但毒副作用轻微,两者均可能成为更理想的抗白血病的免疫佐剂.     

还原型谷胱甘肽对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用

目的探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对缺氧／复氧（A／R）心肌细胞的保护作用及机制。方法建立大鼠心肌细胞A／R损伤模型，随机分为5组：A组为正常对照组；B组为A／R组，缺氧2h。复氧1h；C、D、E组为处理组，加入GSH分别使其终浓度为40、80、160mg／L后A／R。用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性，硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛含量，荧光法测定细胞内钙离子浓度变化，采用RT-PCR检测白介素-1βmRNA和肿瘤坏死因子-αmRNA表达变化。结果与A组相比，B组心肌细胞内钙离子浓度明显升高，差异有非常显著性（P〈0．01）；心肌细胞培养液中超氧化物歧化酶活性下降、丙二醛含量升高，差异有非常显著性（P〈0．01）；白介素-1βmRNA和肿瘤坏死因子-αmRNA表达迅速增强，差异有非常显著性（P〈0．01）。与B组比，D、E组上述变化明显减轻，差异有非常显著性（P〈0．01）。结论GSH对A／R心肌细胞有保护作用，其作用在一定范围内呈剂量依赖关系。     

Nitric oxide donors offer protection to RBC from storage lesion

BackgroundRed blood cell (RBC), which is the most commonly transfused blood component, due to its ability to save a life in absence of any other blood components, can be stored up to maximum 6 weeks by following standard preservation procedure. During storage, RBC undergoes various biophysical and biochemical changes (commonly known as storage lesion) for which blood transfusion with “old RBC” shows a lot of clinical problems especially relevant to critically ill patients. Recent research on S-nitrosylation of haemoglobin to improve oxygen delivery of banked blood revealed the important role of nitric oxide (NO) in protecting storage lesion.Materials and methodsIn the present study, we used various “NO donating” chemicals with different NO release dynamics and chemistries in RBC storage cocktails to test the effects of NO on storage lesion. Changes in different storage markers were evaluated after 7 days storage of pre-treated RBC.ResultsAll the NO donors have shown protection against hemolysis. However, S-nitroso glutathione (GSNO) ranks first in shielding RBCs from storage lesion and additionally, it helps in elevating the value of 2, 3-di phosphoglycerate (2, 3-DPG), improving the RBC membrane fluidity and decreasing the adhesion towards endothelial monolayer.DiscussionPresent study reveals that NO released from NO donors confers protection against storage lesions of the RBC. Further, the study confirms that pre-treatment with GSNO, a NO donor and a nitrosylating agent, ensures the best protection to RBC during low temperature storage, when compared to other NO donor treatments.     

复方甘草酸苷联合还原型谷胱甘肽治疗酒精性肝硬化43例临床疗效分析

目的 探讨复方甘草酸苷联合还原型谷胱甘肽治疗酒精性肝硬化临床疗效及安全性.方法 将85例酒精性肝硬化患者随机分成两组,其中对照组42例,观察组43例.两组患者均给予常规治疗,对照组在常规治疗的基础上加用还原型谷胱甘肽静脉滴注治疗;观察组在对照组的基础上再加用复方甘草酸苷静脉滴注治疗,两组疗程均为3周.观察并记录治疗前后两组患者的临床体征、病症改善情况、肝功能及肝纤维化相关指标水平改变情况,并比较两组的临床疗效.结果 治疗后观察组体征及病症改善情况显著优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后两组肝功能及肝纤维化相关指标水平均得到显著改善,且观察组改善情况显著优于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);观察组总有效率为93.0％,显著高于对照组(66.7％),差异有统计学意义(P＜0.05);两组治疗期间均未有明显不良反应.结论 复方甘草酸苷联合还原型谷胱甘肽治疗酒精性肝硬化可有效缓解患者的临床症状,改善患者肝脏功能,抑制肝纤维化,其疗效显著、安全可靠,值得在临床上推广.     

α-硫辛酸对实验大鼠变态反应性脑脊髓炎作用

目的:研究α-硫辛酸(ALA)对实验大鼠变态反应性脑脊髓炎(EAE)的作用。方法:用豚鼠6只制备实验用免疫抗原。选择Wistar大鼠30只,随机分为5组(n=6):(1)正常对照组(NC组);(2)EAE-7 d和(3)EAE-14 d组,于皮下注射抗原匀浆观察7 d和14 d;(4)ALA-7 d和(5)ALA-14 d组,于第1次发病时给予ALA腹腔注射,连续用7 d和14 d。在研究时间点处死大鼠,HE染色观察病理学改变,免疫细胞化学染色观察白介素-17(IL-17)的表达,同时测定大鼠脑组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)。结果:HE染色显示,在α-硫辛酸治疗的ALA-7 d和14 d组,均能减轻脊髓组织的炎性反应和髓鞘损伤。免疫细胞化学染色表明,EAE大鼠IL-17蛋白表达明显增加(P0.05~0.01),经α-硫辛酸处理后IL-17蛋白表达降低并于14 d接近对照水平。与NC组比较,EAE组大鼠MDA含量明显升高,GSH则明显降低;经ALA处理后,MDA显著降低,而GSH则明显增加(P0.05~0.01)。相关性分析表明,IL-17表达与MDA含量呈正相关(r=0.466,P0.05),而与GSH含量则呈负相关(r=-0.478,P0.05)。结论:在EAE大鼠模型中ALA可以改善和缓解炎症反应,其保护作用可能通过调节IL-17表达实现,并表现为MDA和GSH含量的变化。