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51.
目的:构建含有目的基因kring5的真核植物细胞穿酸表达载体。方法:应用RT-PCR方法,从正常人肝脏组织中获得kringle5基因,测序后,再通过DNA重组技术,将kringle5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI121和pCAMBIA3301上。结果:得到的kringle5基因序列测定结果与文献相符,重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确,含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论:重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制,而且可以在植物细胞中表达。 相似文献
52.
C_3基因在BXSB小鼠主要脏器中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
用同位素标记cDNA探针的分子杂交方法检测了BXSB小鼠肝、肾、脾、胸腺各脏器中补体C_3mRNA的表达情况,结果表明3~4月龄雄性BXSB小鼠肝、肾、脾各脏器C_3mRNA的表达量较正常对照鼠显著增加。C_3基因的过度表达可能参与BXSB小鼠SLE多脏器非感染性炎症的发生,同时提示该鼠存在M系统的大量扩增及活化。 相似文献
53.
探查乳腺肿瘤组织中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的表达,并比较乳腺恶性肿瘤组织与良性纤继腺瘤及正常组织中PAI-1的差异。用免疫组织化学和原位杂交的方法,确定了乳腺癌、乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织中PAI-1的分布;用发色底物法检测组织提取液中PAI-1的活性;用图象分析的方法对组织切片上的PAI-1进行灰度定量。结果:PAI-1主要分布在乳腺正常腺上皮细胞、瘤上皮细胞和腺癌细胞的胞浆中,但恶性组织中的成纤维细胞、巨噬细胞以及癌旁纤维组织也有染色。癌组织中PAI-1的活性(P<0.001)和含量(P<0.005)均高于良性乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织。结论:PAI-1在乳腺恶性肿瘤组织中明显升高,PAI-1的检测可能为临床乳腺肿瘤的诊断、预后提供新的指标。 相似文献
54.
目的 :探讨Erk信号传导通路调控乙醛刺激的肝星状细胞 (HSC)Na /Ca2 泵mRNA表达的影响。方法 :用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流 ,Metrizamide密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞 ,采用RT PCR测定PD980 5 9阻断乙醛激活的肝星状细胞Erk活性后Na /Ca2 泵mRNA表达。结果 :乙醛刺激后 ,HSC后明显促进Na /Ca2 泵mRNA表达 (P<0 0 1) ,不同剂量PD980 5 9对肝星状细胞Na /Ca2 泵mRNA表达的影响无统计学意义。结论 :Erk信号传导通路可能对乙醛刺激的肝星状细胞激活状态的启动无明显影响 相似文献
55.
目的:建立一种应用T7 RNA聚合酶体外转录合成大量siRNA的方法。方法:以萤火虫荧光素酶为靶标,应用T7 RNA聚合酶体外转录合成siRNA,脂质体转染法将其导入HepG2细胞中,通过测定荧光素酶的量,评价siRNA对萤火虫荧光素酶基因表达的抑制作用。结果:合成了以萤火虫荧光素酶为靶标的siRNA,合成的siRNA能特异性地抑制荧光素酶基因的表达,抑制率为80%。结论:建立了一种经济简便的体外合成siRNA的方法。 相似文献
56.
环氧合酶-2及其选择性抑制剂塞来昔布对结肠癌肝转移瘤VEGF、FGF-2影响的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :研究环氧化酶 2及其选择性抑制剂塞来昔布和血管生成因子VEGF、FGF 2间的关系 ,从而探讨环氧化酶 2对结肠癌肝转移瘤血管形成的影响。方法 :以细胞培养法建立稳定的结肠癌细胞株HT 2 9和HCT 116 ,利用脾切除法建立结肠癌肝转移动物模型 ,免疫组化检测结肠癌肝转移瘤VEGF、FGF 2蛋白表达。结果 :结肠癌肝脏转移率 ,HT 2 9组、HCT 116组、塞来昔布组分别为 83 33%、16 6 7%、33 33%。肝脏转移瘤VEGF、FGF 2的表达 ,HT 2 9组与HCT 116组、塞来昔布组比较均表达增强 ,有显著统计学意义 (P <0 0 1~ 0 0 5 ) ;塞来昔布组与HCT 116组比较无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :环氧合酶 2与结肠癌肝转移瘤血管生成密切相关 ,其高表达促进了结肠癌肝转移瘤新生血管生成。其机制可能是上调促血管生成因子VEGF、FGF 2的表达 相似文献
57.
Objective To characterize a possible retention function of unique sequence in the 5'end of rat testis GABAA receptor β3t splicing variantMethods Rat testis GABAA receptor β3t splicing variant cDNA was cloned and two eukaryotic expression recombinant plasmids of pEGFP-N1 and pEGFP-C1 were constructed respectively by fusing green fluorescent protein to the N or C-terminus of β3t isoform. The recombinant plasmids were transfected into CHO cells by calcium phosphate co-precipitation method. Fluorescence microscope and laser confocal microscope were used to analyze localization of β3t in the transfected cells. ConA-Texas-Red was used to label cell ER and the localization of rat testis β3t splicing variant in CHO cells was determined.Results When rat testis β3t splicing variant was expressed in CHO cells, two expression patterns were delineated, the distributions of uniform and mainly discrete intracellular compartments respectively. The chimera product failed to be translocated into the cell surface when expressed in CHO cells; whereas the β3 subunit of rat brain was incorporated into the plasma membrane.Conclusion The inability of β3t to target into the ER may be a consequence of the unique 25 specific amino acid segments in the N terminus. 相似文献
58.
59.
本实验建立了兔腹主动脉球囊扩张(BA)动物模型。以地高辛标记的C一fos、C一myc,N一ras癌基因探针进行BA术后血管段组织的原位杂交,以生物素标记的C一fos、c一myc、N一ras探针对经BA组织培养液刺激的、培养的血管平滑肌细胞(SMC)进行细胞的原位杂交。结果显示:(1)BA术后再狭窄的血管段中c一fos、c一myc、N一ras三种癌基因表达均增高,而且表达颗粒主要分布于粥样斑块中,中膜平滑肌层颗粒稀少。正常血管段无这三种癌基因表达。(2)经BA组织培养液刺激的SMC胞浆中充满c一fos,c一myc癌基因表达颗粒。N一ras癌基因表达主要位于细胞核膜部位。未给BA组织液刺激的SMC未见以上癌基因表达。γ—干扰素可以部分抑制其表达。 相似文献
60.
Dr. Shosaku Nakahara M.D. Hideaki Itoh M.D. Ryuichi Mibu M.D. Shinichi Ikeda M.D. Yoshihiro Oohata M.D. Kamesaburo Kitano M.D. Yoshihiko Nakamura M.D. 《Diseases of the colon and rectum》1988,31(10):762-766
Anorectal function was evaluated in eight patients who had low anterior resection of the rectum with a low anastomotic line,
using an EEA™ stapler, with determination of function based on periodic manometric studies and clinical symptoms. Immediately following
surgery all patients suffered from frequent bowel actions and soiling. These symptoms improved with time and most patients
could enjoy almost normal daily life by the sixth postoperative month. One month after surgery, anal canal resting pressure
and maximum squeeze pressure were significantly reduced and rectoanal inhibitory reflex was absent; neither showed a distinct
tendency to improve thereafter. Rectal sensation and reservoir capacity, which also were seriously impaired, recovered satisfactorily
by the time of the six-month examination. This suggests that an improvement of clinical symptoms following this operation
is dependent upon the recovery of reservoir capacity and sensation of the neorectum, and that this operative procedure is
a functionally acceptable option for low rectal cancer. 相似文献