Effects of low, subinhibitory concentrations of antibiotics on expression of a virulence gene cluster of pathogenic Escherichia coli by using a wild-type gene fusion

S fimbrial adhesins (Sfa) represent virulence factors of E. coli wild-type strains causing urinary tract infections and meningitis of the new born. In order to determine the influence of subinhibitory concentration of antibiotics on the expression of the sfa gene cluster, a wild-type strain carrying the lacZ gene, coding for the enzyme β-galactosidase fused to the sfa determinant was used. The expression of lacZ which was under the control of the sfa wild-type promoters, was now equivalent to the sfa gene expression of wild-type strain 536. With this strain the influence of subinhibitory concentrations of 28 antibiotics on the expression of the sfa determinant was studied. The expression was strongly suppressed by a treatment of the wild-type fusion strain by aztreonam, gentamicin, clindamycin and trimethoprim; the latter had a dramatic effect on sfa expression. It was further shown for clindamycin and trimethoprim that the reduction of sfa gene expression was dependent on the concentration of the antibiotics. In contrast imipinem, amphotericin B and rifampicin weakly stimulated sfa expression. We conclude that gene fusions between virulence-associated loci and indicator genes in wild-type pathogens are useful to study virulence modulation due to subinhibitory concentration of antibiotics on the genetic level.     

合肥地区产超广谱β-内酰胺酶菌株的分布及药敏分析

目的：了解合肥地区产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌分布及耐药特点。方法：应用纸片扩散法对合肥地区4家较大的综合性医院从临床标本中分离的254株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行ESBL的确诊试验。结果：254株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共检出69株产ESBL菌株（27.2%）,其中,血液感染ESBL检出率为54.5%（6/11）、烧伤科ESBL的检出率为48.6%(18/37）。亚胺硫霉素对产ESBL的大砀埃希菌和肺炎克雷伯菌的敏感率分别为94.5%和80%。头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁对产ESBLs的大肠埃希菌和产ESBLs的肺炎克雷伯菌的敏感率在40%-70%之间,阿米卡星对产ESBL的大肠埃希菌的敏感率为69.2%。结论：ESBL在血液感染的烧伤科标本中的检出率较高。治疗产ESBL菌株引起的感染可首选亚胺硫霉素,其次,选含酶抑制剂的复方制剂和头霉素类。对产ESBL的大肠埃希菌也可选阿米卡星。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌引起新生儿严重感染的治疗分析

目的:探讨新生儿病房产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药特点,指导临床用药。方法:经痰、血、脑脊液培养确诊为产ESBLs肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌引起新生儿感染23例,分析药敏试验结果及治疗情况。结果:产ESBLs菌对亚胺培南普遍敏感,对舒普深耐药率低,肺炎克雷伯菌耐药率为36.36％,大肠埃希菌为25.0％,对头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟及氨曲南耐药率高达75％～100％,且部分体外敏感菌株在体内却表现出临床意义的耐药,对磺胺类、氨基糖甙类、氟喹诺酮类均表现出较高的耐药性。结论:亚胺培南及含β-内酰胺酶抑制剂复合物为新生儿病房产ESBLs菌感染的首选药物。     

五味子和头孢氨苄对大肠埃希氏菌及金黄色葡萄球菌抑制作用的实验研究

目的 :观察五味子和头孢氨苄对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用。方法 :试管稀释法。结果 :五味子水煎剂 (1g/ml,pH =2 .8)对二株受试菌的MBC分别是 6 2 .5g/L和 31.2 5g/L ,而五味子水煎剂调pH为 7 0后 ,其MBC均大于 5 0 0g/L。头孢氨苄对大肠埃希氏菌的MIC和MBC分别是 4 88mg/L和 15 6 2 5mg/L ;对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别是 2 44mg/L和 78 13mg/L。pH为 7 0的五味子联用头孢氨苄对大肠埃希氏菌的MBC分别为大于 2 5 0g/L和 15 6 2 5mg/L ,部分抑菌浓度指数为 1 5。结论 :pH为 2 8的五味子水煎剂有一定抑制致病菌作用 ;pH为 7 0的五味子水煎剂与头孢氨苄联用 ,两药呈现无关作用。     

大肠埃希菌耐药率及耐药趋势的探讨

目的 利用“ＷＨＯＮＥＴ４”软件监测大肠杆菌对几类常用抗生素在１９９５年～１９９８年４年间耐药性的变迁。方法 采用常规鉴定技术鉴定细菌,Ｋ－Ｂ法测定抑菌环直径,利用“ＷＨＯＮＥＴ４”软件对结果进行录入和分析。结果 大肠杆菌对丁胺卡那在１９９６年和１９９８年的耐药率有显著差异（Ｐ〈０．０５）,丁胺卡那其他年份的耐药率及其他六种抗生素各年份间的耐药率无显著性意义（Ｐ〉０．０５）。庆大霉素、先锋Ｖ、头孢     

大肠杆菌表达重组人IL-8分离纯化工艺的建立

目的　建立重组人IL - 8(rhIL - 8)大肠杆菌表达后的高效分离纯化工艺 ,以便获得高纯度的重组蛋白。方法　将已构建好的表达载体转化大肠杆菌HB10 1,经IPTG诱导进行高效表达。将离心收集到的菌体用超声破壁分离 ,收集包涵体和胞浆 ,其中包涵体部分经变性和复性处理后 ,与胞浆部分合并 ,进行肝素亲和层析柱分离 ,再经离子交换柱和凝胶层析柱过滤 ,得到最终纯品。蛋白纯度用SDS -PAGE鉴定 ,ELISA法检测重组IL - 8含量。检测纯化后重组蛋白的生物学活性和热源质。结果　用大肠杆菌HB10 1表达重组人IL - 8,具有较高的表达量 (2 5mg/ml) ,其分泌的重组蛋白以包涵体和胞浆的形式存在。经多步柱层析纯化后 ,可获得高纯度的重组IL- 8蛋白 (纯度 >95 % )。该蛋白在体外具有趋化中性粒细胞游走的作用 ,兔温法检测热源质含量符合要求。结论　大肠杆菌可高效表达rhIL - 8,该工艺流程可从大肠杆菌载体中获得具有生物学活性的高纯度rhIL - 8。     

大肠杆菌临床分离株多重耐药过程中的主动外排机制

目的　探讨临床分离大肠杆菌多重耐药机制。方法　应用荧光法测定临床分离大肠杆菌对环丙沙星的主动外排功能 ;PCR及Southernblot测定主动外排系统AcrAB结构基因acrAB ;RT PCR测定acrAB表达水平 ;自动荧光测序法测定acrAB基因扩增产物DNA序列。结果　临床分离大肠杆菌多重耐药株细胞内环丙沙星稳态浓度显著低于敏感株 (0 .73mg/L± 0 .0 4mg/L比 2 .0 0mg/L± 0 .0 7mg/LA660 ,P <0 .0 0 1) ;临床分离大肠杆菌无acrAB缺失 ;多重耐药株acrAB表达水平显著高于其他菌株 ;多重耐药株以及敏感株acrAB基因扩增产物无点突变和缺失。结论　主动外排系统acrAB的高表达导致临床分离大肠杆菌产生多重耐药性 ;acrAB的表达可能受多重耐药操纵子调控。     

Turcot's syndrome: Case report and review of the classification

Summary We report a case of association of a brain tumor with multiple colorectal polyposis and offer an analysis of the relevant literature with a view to revising the classification of the syndrome in relation to familial multiple polyposis and Gardner's syndrome. Differences emerged, depending on the brain tumor type, which suggests that this association may be classified as two distinct syndromes.     

不同抗生素杀菌过程导致细菌内毒素释放的异质性

目的初步了解各类抗生素杀菌过程导致细菌内毒素释放的不同特点。方法采用鲎基质偶氮法检测各类不同抗生素２倍最低抑菌浓度下对大肠埃希氏菌杀菌时细菌内毒素的释放量,计算杀菌开始至活菌数基本稳定阶段,平均每减少１个对数数量级（ｌｇ）菌落形成单位（ＣＦＵ）所导致的内毒素释放量（杀菌释放率）。结果各类抗生素致内毒素释放能力大致可以分为低、中、高三类,杀菌释放率的界限值分别为１０ｎｇ／ｉｇＣＦＵ和３０ｎｇ／ｉｇＣＦＵ。多粘菌素Ｂ具有低于所有品种的释放率。β－内酰胺类抗生素中的羟氨苄青霉素、棒酸和亚胺硫霉素具低释放率,氨苄青霉素、头孢氨苄、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢他啶、氨曲南具高释放率。喹诺酮类的环丙沙星具高释放率,氧氟沙星具中等释放率。氨基甙类均具中等释放率,品种间无显著差异。此外,磷霉素也具有中等释放率。结论具有相似临床杀菌作用的抗生素可以具有差异明显的致内毒素释放能力,此认识有助于指导全身炎症反应综合征时抗生素的选择