甘草酸对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能的影响

目的:探讨甘草酸对免疫诱导再生障碍性贫血(再障)小鼠骨髓造血功能的影响,寻求治疗免疫诱导再障的方法。方法:BALB/c小鼠72只,适应性喂养1周后,随机分为实验组(64只)及正常对照组(8只)。实验组小鼠首先制造再障模型。将制模后小鼠再分为模型对照组(40只)及甘草酸组(24只)。将甘草酸组再分为低、中、高剂量组,每组8只,低、中、高剂量组小鼠每天经灌胃分别给予10、20、30mg/(kg.d)甘草酸,连续14 d,于第15天脱臼处死小鼠,分别检测血象、骨髓单个核细胞(BMNC)、CFU-GM、BFU-E,用原位末端标记法(TUNEL)测定胸腺淋巴结混合细胞、骨髓单个核细胞、外周血单个核细胞凋亡率。其余40只模型对照组小鼠每天经灌胃给予等体积生理盐水,并分别于第3、5、7、10、15天各处死一批次小鼠。8只正常对照组小鼠只给予等体积生理盐水。检测指标同上。结果:甘草酸组WBC、Hb、BMNC、CFU-GM、BFU-E明显高于模型对照组(P<0.05,P<0.01),且具有剂量-效应关系。模型对照组骨髓单个核细胞凋亡率、胸腺淋巴结混合细胞凋亡率、外周血单个核细胞凋亡率均高于正常对照组(P<0.01)。甘草酸组骨髓单个核细胞凋亡率高于正常对照组(P<0.01)而低于模型对照组(P<0.01),外周血单个核细胞凋亡率高于正常对照组及模型对照组(P<0.05,P<0.01),胸腺淋巴结混合细胞凋亡率高于正常对照组(P<0.01)。结论:甘草酸通过促进成熟淋巴细胞凋亡而有助于免疫诱导再障小鼠骨髓造血功能的恢复。     

慢性再生障碍性贫血中西医结合优化治疗方案临床研究

目的评价补肾方联合雄激素及免疫抑制剂治疗慢性再生障碍性贫血（CAA）的临床疗效,以确立中西医结合治疗CAA的优化治疗方案。方法将39例CAA患者随机分为3组,对照组（16例）采用司坦唑醇片联合环孢素A（CsA）,试验一组（11例）辨证采用补肾Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方治疗,试验二组（12例）在对照组基础上加用补肾Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方治疗,疗程6个月。分别观察各组临床疗效及治疗前后患者外周血清促红细胞生成素（EPO）、干扰素-γ（IFN-γ）水平的变化情况。结果 3组在临床疗效、外周血象改善方面差异无统计学意义（P〉0.05）,但试验二组在贫血症状及中医证候的改善方面明显优于另外2组（P〈0.05）,并能显著降低IFN-γ水平（P〈0.05）。结论补肾方联合雄激素及免疫抑制剂治疗CAA在临床疗效、改善症状及提高血常规计数方面均优于单用中药或单用西药治疗。     

补血合剂对慢性再生障碍性贫血患者造血细胞调节因子的影响

目的:研究补血合剂对慢性再生障碍性贫血患者造血细胞调节因子的影响。方法:对慢性再生障碍性贫血患者随机分组后,治疗组西药加补血合剂,对照组单纯西药治疗。抽取骨髓,对骨髓细胞分离培养,收集培养上清液和骨髓单个核细胞,用双抗夹心ELISA法测定培养上清液中造血细胞调节因子(IL-3、TNF-α、IFN-γ)的活性并比较其水平变化。结果:造血细胞调节因子水平:治疗组与对照组治疗前IL-3水平明显低于正常对照组,P<0.05,TNF-α、IFN-γ水平明显高于正常对照组,P<0.05;治疗后IL-3水平升高,与治疗前相比有显著性差异,P<0.05;治疗后TNF-α、IFN-γ水平降低,与治疗前相比有显著性差异,P<0.05。治疗后治疗组IL-3水平高于对照组,P<0.05;TNF-α、IFN-γ水平低于对照组,P<0.05;IL-3水平升高的差值与TNF-α、IFN-γ水平下降的差值,肾阳虚组均高于肾阴虚组,有显著性差异,P<0.05。结论:补血合剂能提高正调节因子IL-3的水平,降低负调节因子TNF-α、IFN-γ的水平,肾阳虚型患者的治疗效果优于肾阴虚型患者,为中药治疗慢性再生障碍性贫血的作用机制提供依据。     

Busuishengxue ranules mediate their effects upon non-severe aplastic anemia via mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase pathway

OBJECTIVE：To observe the clinical efficacy of Busu- ishengxue granules on non-severe aplastic anemia（NSAA） and investigate its effect on the mitogen-ac- tivated protein kinase/extracellular signal-regulat- ed kinase（MAPK/ERK） pathway. METHODS： Sixty NSAA patients were divided equally into two groups. Subjects in the experimen- tal group were treated with Busuishengxue gran- ules, and the control group with Zaizaoshengxue tablets.The treatment course was 6 months and cu-rative efficacy was compared between the two groups as well as with 10 healthy individuals. Flow cytometry（FCM） was used to detect the intracellu- lar concentration of Ca2 ＋（[Ca2 ＋]i）. Western blotting was employed to detect the expression of enzymes in the MAPK/ERK pathway. RESULTS： The efficacy of Busuishengxue granules was significantly better than that of Zaizaoshengx- ue tablets（P0.05）. Before treatment, expression of JNK, phospho-ERK 1/2 and p-JNK was higher, and [Ca2 ＋]i higher, than that of the control group（P 0.05）. After treatment with Busuishengxue gran- ules, expression of all enzymes related to signal transduction pathways in the blood cells of NSSA patients were altered to different degrees. CONCLUSION： Busuishengxue granules had a bet- ter effect with regard to improving symptom scores, increasing the number of blood leukocytes, and increasing hemoglobin levels than Zaizaosh- engxue tablets, and they differed slightly in terms of increasing the number of platelets.     

误诊为特发性血小板减少性紫癜的儿童再生障碍性贫血临床分析

目的通过对误诊为特发性血小板减少性紫癜(ITP)的再生障碍性贫血(再障)患儿临床特点和误诊原因的分析,提高临床医师对儿童再障的认识,减少早期误诊。方法收集我院1992年1月-2010年8月收治的曾误诊为ITP、入院后确诊为再障的20例患儿的临床资料,分别按照实验室检查、疗效及误诊原因进行回顾性分析。结果在所有再障患儿中,误诊为ITP者占16%,在被诊断为ITP时:(1)多数患儿已经出现明显的外周血二系或三系下降,而并非单纯血小板减少。(2)5例患儿行骨髓检查,但结果并不符合ITP骨髓象。(3)绝大部分患儿未进行必要的血小板抗体检查,或检查结果并不典型。(4)按ITP进行糖皮质激素和大剂量免疫球蛋白治疗,疗效欠佳,未能进一步检查以核实诊断。(5)所有患儿均不符合ITP诊断标准,经过进一步检查均符合再障诊断标准。经抗胸腺细胞免疫球蛋白、环胞素A和雄性激素等治疗后,参照再障疗效标准,总有效率和显效率分别为75%和62%。结论再障和ITP均存在明显的血小板减少和出血倾向,ITP发病率明显高于再障,临床容易发生误诊。因此,临床上发现血小板降低,在考虑ITP诊断时,必须同时考虑可导致血小板减少的其他疾病的可能性,严格参照中华医学会制定的"再生障碍性贫血诊断标准"和"特发性血小板减少性紫癜诊断标准",以明确诊断和进行必要的鉴别诊断。     

益元生血方对慢性再生障碍性贫血患者外周血γ-干扰素与肿瘤坏死因子-α的影响

目的 :探讨益元生血方对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者外周血γ 干扰素 (γ IFN)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)的影响。方法 :36例CAA患者分为肾阴虚组 ( 2 1例 )和肾阳虚组 ( 15例 ) ,采用微量细胞病变抑制法及L595细胞毒法 ,检测使用益元生血方前后外周血γ IFN、TNF α水平 ,并与正常组 ( 15名 )比较。结果 :外周血γ IFN、TNF α水平 ,治疗总组与正常组比较 ,治疗前有明显差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,治疗后无明显差异 (P >0 0 5 ) ,肾阴虚组与肾阳虚组比较 ,治疗前后均有明显差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,且有效率肾阳虚组高于肾阴虚组。结论 :益元生血方是通过降低CAA患者体内γ IFN、TNF α水平 ,调节紊乱的免疫状态而发挥治疗作用。     

补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的实验研究

目的观察中药补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法建立免疫介导型再生障碍性贫血动物模型,观察中药补肾活血方的疗效,并从造血祖细胞集落培养和骨髓基质细胞黏附功能,造血调控因子等方面探讨其作用机制。结果中药补肾活血方可改善免疫介导型再障小鼠的外周血象,增加骨髓有核细胞计数,延长其生存期,促进红系造血祖细胞 CFU-E、BFU-E 的增殖、分化,调节 T 细胞亚群,抑制 Ts 的活性,促进白细胞介素-10(IL-10)的分泌,抑制造血负调控因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性。结论中药补肾活血方通过促进 CFU-E、BFU-E的增殖、分化以及调节细胞免疫功能而达到治疗的目的。     

慢性再生障碍性贫血中医证型与多因素相关性研究

目的:探讨免疫、内分泌系统多个指标与慢性再生障碍性贫血(CAA)中医辨证分型的关系。方法:对60例CAA患者进行辨证分型,分为肾阳虚型、肾阴虚型、肾阴阳两虚型3组,并行免疫、内分泌系统的多个指标的实验室检查。结果:(1)与肾阳虚证组相比,肾阴虚证组CD8+、C3、C4、皮质醇(COR)、睾酮(T)、游离甲状腺素(FT4)显著升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.01),CD4+、雌二醇(E2)显著下降(P<0.01,P<0.01)。肾阴阳两虚证组COR、T、E2、FT4较肾阳虚证组显著升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05)。(2)与肾阴虚证组相比,肾阴阳两虚证组E2显著升高(P<0.01),CD8+、C3、C4、COR、T显著下降(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。结论:CD4+、CD8+、C3、C4、COR、T、E2、FT4等指标可作为CAA临床辨证分型的客观依据。     

复方雷公藤颗粒对再障小鼠骨髓T细胞亚群的影响

目的:观察复方雷公藤颗粒对再生障碍性贫血(简称再障)小鼠的疗效及对骨髓CD4+,CD8+,CD4+/CD8+T淋巴细胞表达的影响.方法:建立再障小鼠模型,分为5组,正常组及模型组小鼠(给予同体积的生理盐水ig),复方雷公藤低、高剂量组(分别为生药10.63,13.29 g·kg-1,ig)、十一酸睾酮(22 mg·kg-1,ig),连续给药35 d,取骨髓单个核细胞培养24 h后,流式细胞术检测CD4+,CD8+,CD4 +/CD8+T淋巴细胞的表达水平.结果:模型组CD4+,CD8+,CD4 +/CD8+各指标均较正常组下降,其中CD4+,CD4 +/CD8+T淋巴细胞明显低于正常组(P＜0.05);十一酸睾酮组与模型组相比,CD4+,CD8+均有所下降,但CD4 +/CD8+T细胞较之上升,但统计学均无明显差异,复方雷公藤颗粒低、高剂量组与模型组相比,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+均升高,其中CD4+,CD4+/CD8+升高有统计学意义(P＜0.05),与十一酸睾酮组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:复方雷公藤颗粒能调节骨髓T细胞的异常状态,恢复T细胞及其亚群之间的平衡,促进骨髓造血功能的恢复.     

补肾填精法对再生障碍性贫血模型大鼠外周血细胞的影响

目的：观察补肾填精法对再生障碍性贫血（AA）模型大鼠血常规和网织红细胞的影响和作用。方法：将清洁级Wistar大鼠36只随机分为对照组、模型组、治疗组（补肾填精中药）3组,每组各12只;对照组正常饲喂,模型组和治疗组用5-氟尿嘧啶（5-FU）与马利兰合用诱导建立大鼠AA模型,之后治疗组每天给予补肾填精中药10g/kg.d灌胃,连续4周,4周后观察各组大鼠外周血WBC、RBC、Hb、PLT及网织红细胞的变化。结果：模型组与治疗组外周血细胞以上各值水平显著低于对照组,治疗后治疗组外周血细胞以上各值水平提高,差异有统计学意义。结论：补肾填精法能够提高再障模型大鼠的外周血细胞的数量,对再生障碍性贫血具有肯定的治疗作用。