紫苏叶水提物对阿霉素致HK-2细胞氧化损伤的保护及机制

目的:探讨阿霉素(ADR)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)发生氧化损伤后,紫苏叶水提取物(PFAE)对其细胞活性、氧化损伤标记物及细胞凋亡等关键因子的影响。方法:ADR刺激HK-2细胞建立损伤模型,使用N-乙酰半胱氨酸(NAC)或不同浓度PFAE(5,15,45 g·L~(-1))干预后,采用细胞增殖/毒性检测(CCK-8)法检测细胞存活率,结合光镜下细胞形态变化,筛选出PFAE保护细胞的最佳浓度。后续实验分为6组:空白组,ADR(0.05 g·L~(-1))组,PFAE(15 g·L~(-1))组,ADR+PFAE(0.05+15)g·L~(-1)组,NAC(0.81 g·L~(-1))组,ADR+NAC(0.05+81)g·L~(-1)组。检测细胞匀浆中的丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)和细胞总抗氧化能力,2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,流式细胞术及脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TUNEL)染色法检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞线粒体凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9和3(Caspase-9,Caspase-3),聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)包括其剪切体的表达,及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路中p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 MAPK),细胞外信号调节激酶(ERK),c-Jun氨基端激酶(JNK)及其磷酸化蛋白的表达。结果:与空白组比较,ADR组的细胞活性显著降低(P0.01),与ADR组比较,5,15 g·L~(-1)的PFAE和NAC能促进细胞的增殖(P0.01)。与空白组比较,ADR组抗氧化能力和SOD水平显著降低(P0.01),MDA和ROS的水平显著增高(P0.01),与ADR组比较,ADR+PFAE组和ADR+NAC组抗氧化能力和SOD水平显著升高(P0.01),MDA和ROS的水平显著下降(P0.01)。与空白组比较,ADR组细胞凋亡率上升(P0.01),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2,cleaved Caspase-9/Caspase-9,cleaved Caspase-3/Caspase-3,cleaved PARP/PARP水平显著上升(P0.01),MAPKs通路中的p38 MAPK,ERK和JNK的磷酸化蛋白表达明显增高(P0.05,P0.01);与ADR组比较,PFAE或NAC干预后减轻了细胞凋亡率,降低了凋亡蛋白的相对比值,并且抑制了MAPK信号通路中p38 MAPK,ERK蛋白的磷酸化(P0.01),但对磷酸化的JNK蛋白表达无影响。结论:PFAE可以减轻ADR诱导的HK-2细胞氧化损伤,并发挥抗氧化作用,通过线粒体凋亡途径和ERK/p38 MAPK信号通路来抑制细胞凋亡。     

紫杉醇化疗方案对乳腺癌患者血清Th1/Th2细胞因子水平的影响

目的探讨紫杉醇化疗方案对乳腺癌患者血清Th1/Th2细胞因子水平的影响。方法将100例乳腺癌术后辅助化疗患者随机(1︰1)分为2组,常规组行AC(阿霉素-环磷酰胺,每3周1次)-P(紫杉醇80mg·m~(-2),每周1次)方案化疗,剂量密集组,行AC(阿霉素-环磷酰胺每2周1次)-P(紫杉醇175mg·m~(-2),每2周1次)方案化疗,化疗前后观察患者血清细胞因子水平变化。结果常规组及剂量密集组化疗后患者血清IL-2、TNF-α及IFN-γ浓度均显著增高(P<0.05),血清IL-4、IL-6及IL-10水平显著降低(P<0.05)。结论常规组及剂量密集组均能够改善乳腺癌患者细胞免疫功能;剂量密集组较常规组具有更强的恢复细胞免疫为主的抗肿瘤免疫能力,且未显著增加毒性和不良反应。     

心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用

目的 :研究心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用。方法 :采用MTT比色法 ,观察阿霉素中毒心肌细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的活力。结果 :心肌肽素及 5个分离组分均显示了促进琥珀酸脱氢酶活力的作用 ,其中P1组分活力较强 ;各组分相加亦显示促进酶活力的作用 ,但未见显示相加效应。结论 :心肌肽素对阿霉素所致心肌细胞损伤的促进修复作用 ,系各组分所含物共同作用的结果。     

茶多酚抑制MDA生成及对阿霉素在小鼠肝细胞内蓄积的影响

荧光光度法测定 MDA及阿霉素在小鼠肝细胞内的含量 ;研究茶多酚抑制 MDA的生成与阿霉素胞内蓄积的关系。结果表明 ,茶多酚浓度为 1 0 ,2 0 ,40 ,80 ,1 60 mg/L时对 MDA生成的抑制率分别为 44.87% ,1 1 5.1 7% ,1 77.2 5% ,1 81 .98% ,1 82 .37% ,且与剂量成正相关。在·OH诱导下 ,茶多酚浓度为 40 mg/L时 ,可明显增加阿霉素在小鼠肝组织细胞内的蓄积     

姜黄素与阿霉素联合用药的体外抗肿瘤作用

目的　了解姜黄素与阿霉素联合应用对人白血病K5 6 2细胞及人肝癌Bel 740 2细胞的杀伤作用。方法　采用MTT法测定药物的体外杀伤作用 ,应用金氏公式进行联合用药分析。结果　姜黄素 2 0 4μmol·L-1～ 16 2 9μmol·L-1,阿霉素 0 70 μmol·L-1～ 5 5 2 μmol·L-1同时给药对K5 6 2细胞及Bel740 2细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果。序贯给药法中先给姜黄素后给阿霉素结果为协同作用 ,先给阿霉素后给姜黄素为拮抗作用。结论　姜黄素与阿霉素同时联合用药可产生协同作用 ,序贯联合用药产生单向协同作用。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体─—阿霉素免疫交联物在荷瘤鼠体内药代动力学研究

 采用DextranT-40桥联法将抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39与肿瘤化疗药物氚标记阿霉素交联，制各成免疫交职物³H-Adr(阿霉素)-PAD(多醛葡聚糖)-MAb(单克隆抗体)SZ-39在荷瘤鼠体内研究免疫交联物药代动力学特征。结果显示Adr-MAbSZ-39在相关肿瘤内浓聚，发挥了单抗高选择性作用，为胶质瘤的治疗提供了高效低毒的新一代良药。但在肝内摄入较多，为其可能的副作用。血药浓度-时间曲线符合三室线性模型，T_1/2长于游离Adr，有效分布体积大于游离Adr，以2周问隔多疗程治疗为佳。     

伤肌宁胶囊对抗阿霉素所致心肌细胞凋亡及其相关基因BCL-2 BAX蛋白表达影响

目的：观察含伤肌宁胶囊的大鼠血清（SJNXQ）,对阿霉素（ADR）所致心肌细胞凋亡的抑制作用及其对相关基因BCL-2、BAX蛋白表达的影响。方法：血清药理学方法制备＂伤肌宁胶囊＂含药血清（SJNJN）;SD乳鼠心肌细胞做原代培养,复制ADR损伤心肌细胞模型,并运用流式细胞仪检测细胞凋亡及其相关BAX和BCL-2蛋白的表达。结果：心肌细胞给予ADR后,心肌细胞凋亡指数明显升高,BAX蛋白表达升高;BCL-2蛋白表达明显降低。含伤肌宁胶囊的血清,能显著抑制心肌细胞凋亡,降低BAX蛋白表达,提高BCL-2蛋白的表达水平,其效应呈剂量依赖关系。结论：伤肌宁胶囊具有拮抗阿霉素所致心肌细胞凋亡作用,其机制可能与SJNXQ提高BCL-2/BAX比值特性有关。     

多柔比星热敏脂质体穿越血脑/血瘤屏障的研究

 目的 建立体外血脑屏障（blood-brain barrier, BBB）模型和体外血瘤屏障（blood-brain tumor barrier, BTB）模型,检测多柔比星两种剂型（thermosensitive liposome adriamycin, ts-lip-ADM和多柔比星溶液）在37 ℃/42 ℃条件下对两种模型的穿透性,为多柔比星热敏脂质体脑靶向药物递送研究奠定基础。方法 人脐静脉内皮细胞系ECV304和星形胶质细胞（Astrocytes, As）接触共培养建立共培养BBB模型;ECV304细胞和胶质瘤细胞系C6非接触共培养建立共培养BTB模型。测定模型的跨内皮阻抗值（trans-endothelial electrical resistance, TEER）和多柔比星通透性确证模型建立。建模第7天,测定多柔比星两种剂型在37 ℃/42 ℃条件下对两种模型的透过性（P_app）。结果 BBB模型的TEER值显著高于BTB模型,对ADM的透过量低于BTB模型。42 ℃加热条件下热敏脂质体在BBB和BTB模型中的药物透过量显著高于多柔比星溶液。结论 热敏脂质体结合加热处理可以显著促进多柔比星穿越体外血脑/血瘤屏障。     

化疗药物对荷人胆管癌裸小鼠移植瘤的药效试验

目的：观察化疗药物对荷人胆管癌裸小鼠移植瘤的治疗效果。方法：采用人中分化胆管癌裸小鼠移植瘤模型。将45只荷人胆管癌裸小鼠分为各治疗组和对照组,裸小鼠治疗组每组5只,对照组10只。分组当天称鼠重,由尾静脉用药1次。给药剂量：丝裂霉素(MMC)4mg／kg,阿霉素(ADM)10mg／kg,长春新碱(VCR)0．20mg／kg,泰素(TAXOL)20mg/kg,顺铂(DDP)10mg／kg,环磷酰胺（CTX)120mg／kg,5-氟脲嘧啶(5-Fu)120mg/kg,NS为0．2mL／只。第21天处死裸小鼠,称鼠重,计算体重变化。治疗期间每周测肿瘤瘤径2次,计算相对肿瘤增殖率T／C(％)。结果：MMC,ADM,VCR,TAXOL,DDP和CTX组第21天相对肿瘤增殖率分别为：1％,23％,39％,47％,51％和86％,裸小鼠体重增加分别为：21％,0％,11％,1％,14％和8％。5-Fu组80％裸小鼠死亡,有药物毒性反应。结论：MMC,ADM,VCR,TAXOL,DDP对荷人中分化胆管癌裸小鼠的移植瘤有明显的抗癌作用,CTX无效。