尼古丁对人牙龈成纤维细胞中抑癌基因WWOX表达的影响

目的观测不同浓度尼古丁培养液对体外培养的人牙龈成纤维细胞（hmu-na gingival fibroblast,HGF）内抑癌基因WWOX转录水平的影响,从分子水平探讨吸烟对口腔肿瘤发生的影响。方法取第5代HGF,以FBS作为空白对照组,实验组分别加入终浓度为0.01、0.1、1μg/mL的尼古丁,标准条件下培养4天,提取细胞总RNA进行RT-PCR反应,测量基因转录水平。结果WWOX基因mRNA在空白组的比值为0.89 720,加入尼古丁培养液后HGF中WWOX基因mR-NA表达水平降低,低浓度组为0.88 650,中浓度组为0.75 320,高浓度组为0.61 760。结论尼古丁影响了HGF中WWOXmRNA的转录,随着尼古丁浓度的增加WWOXmRNA合转录水平降低。     

WWOX与P53在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的分析WWOX与P53蛋白在食管鳞癌中的表达,探讨它们与食管鳞癌临床病理特征的关系。方法用免疫组化法检测40例正常食管黏膜、癌旁食管黏膜及癌组织标本的WWOX与P53蛋白产物的表达情况,并结合临床病理特征进行分析。结果在食管鳞癌组织中,中分化组与低分化组WWOX蛋白阳性表达率、P53蛋白阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05);II期与III~IV期间WWOX蛋白异常表达差异有统计学意义(P<0.05),I期或II期均与III~IV期间P53蛋白异常表达差异有统计学意义(P<0.05);有、无淋巴结转移WWOX蛋白阳性表达率、P53蛋白阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05)。食管鳞癌组织中,WWOX蛋白阴性表达与P53蛋白阳性表达呈正相关(R s=0.514,P<0.001)。结论WWOX蛋白与P53蛋白异常表达与食管鳞癌的癌组织分化程度、临床分期及转移有关。在食管鳞癌中WWOX蛋白与P53蛋白表达密切相关。联合检测WWOX蛋白与P53蛋白,可以为食管鳞癌的诊断、治疗及判断预后提供有意义的生物学指标。     

WWOX基因在贲门腺癌中的异常甲基化及其表达

目的:探讨贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中WWOX( WW domain-containing oxidoreductase)基因启动子区及第1外显子区的甲基化状态及其对表达的影响,并分析贲门腺癌中WWOX与Smad4(mothers against decapentaplegic homolog 4)蛋白表达之间的关系.方法:分别应用甲基化特异性PCR和免疫组织化学法检测贲门腺癌组织及其相应癌旁组织中WWOX基因的甲基化和蛋白的表达情况:应用免疫组织化学法检测贲门腺癌组织及其相应癌旁组织中Smad4蛋白的表达.结果:贲门腺癌组织中WWOX基因启动子区(- 382～- 41 bp)及第1外显子区(- 27～+344 bp)的甲基化率[26.4％ (33/125)和23.2％ (29/125)]显著高于其相应的癌旁常组织(0％和0％)(P＜0.01),并与贲门腺癌TNM分期和上消化系统肿瘤家族史有关(P＜0.05).贲门腺癌组织中WWOX蛋白的表达阳性率显著低于相应癌旁组织(P＜0.01),WWOX蛋白的表达与WWOX启动子区和第1外显子区甲基化状态之间呈负相关(r=-0.216,r=-0.255,P＜0.05).贲门腺癌组织中Smad4蛋白表达的阳性率(47.2％)显著低于相应癌旁组织(94.4％)(P＜0.01),且与WWOX在贲门腺癌中的表达呈明显的正相关(r=0.622,P＜0.01).结论:WWOX基因启动子区及第1外显子区的高甲基化导致的基因表达下调可能在贲门腺癌中发挥重要作用.     

NDRG-1、WWOX及P53基因在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤相关基因NDRG-1（N—myc downst ream related gene1）、WWOX（WW domain—containing oxidoreductase）及P53在胃癌组织中的表达情况及其与临床、病理因素之间的关系．方法用免疫组织化学染色的方法分别检测NDRG-1、WWOX及P53基因在31例胃癌组织及15例正常胃粘膜组织中的表达情况．结果WWOX、NDRG-1基因在胃癌组织中的表达明显降低,与正常组织比较差异有统计学意义（P〈0．05）．且二者均与肿瘤的侵润深度、淋巴结转移情况密切相关（P〈0．05）．WWOX与癌组织的分化程度密切相关（P〈0．05）,而NDRG-1与癌组织的分化程度无关（P〉0．05）．P53（突变型）基因在胃癌组织中的表达明显高于正常组织,二者比较差异有统计学意义（P〈0．05）,其表达与癌组织的分化程度、侵润深度、淋巴结转移情况密切相关（P〈0．05）．以上3种基因的表达情况均与患者的年龄、性别无关（P〉0．05）．WWOX与NDRG-1基因在胃癌组织中的表达呈正相关（r=0．561,P=0．001）;而二者与P53基因的表达均呈负相关（WWOX与P53组：r=-0．411,P：0．022;NDRG-1与P53组：r=-0．360,P=0．047）．结论WWOX、NDRG-1、P53（野生型）基因同为抑癌基因,且三者之间在胃癌的发生、发展及转移过程中有着明显的协同作用．因此,联合评价其功能具有更重要的临床意义．     

WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义

WWOX基因是近年来发现的一个新的抑癌基因,位于染色体16q23．3-24．1区域,跨越了整个常见染色体脆性位点FRA16D,该脆性位点易在香烟等物质作用下发生基因变异,故WWOX基因一出现就成为肺癌发病机制研究的热点。我们从非小细胞肺癌组织及相应癌旁正常组织中提取蛋白,采用免疫组化及免疫印迹分析方法检测WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达,并探讨其与非小细胞肺癌临床病理指标之间的关系。     

WWOX基因在脑胶质瘤中的表达

目的 探讨抑癌基因WWOX在胶质瘤发生发展中的作用以及与胶质瘤病理分级的关系.方法 采用半定量RT-PCR方法检测31例胶质瘤手术切除标本和3例正常脑组织WWOX mRNA的表达情况,用琼脂糖凝胶电泳PCR产物,凝胶图像分析系统检测基因的相对量.最后实验数据采用SAS软件行x2检验,分析WWOX mRNA的表达与胶质瘤病理分级的关系.结果 31例胶质瘤组织中共有17例(54.8%)发生WWOX基因表达缺失,3例正常脑组织均无基因表达缺失.胶质瘤组织和正常脑组织中WWOX mRNA失表达水平存在明显差别(P＜0.05).各病理分级组间WWOX mRNA失表达水平无明显差别(P＞0.05).结论 WWOX mRNA在胶质瘤中表达缺失率较高,且胶质瘤组织和正常脑组织中WWOX mRNA失表达水平存在明显差别(P＜0.05).但恶性程度高的胶质瘤组织与恶性程度低的胶质瘤组织WWOX mRNA失表达水平无明显差异,这表明WWOX基因缺失或低表达在胶质瘤发生过程中起重要作用,但可能对胶质瘤的进一步发展作用不明显.     

WWOX 抑癌基因研究进展

WWOX 基因定位于染色体16q23.3-24.1,在卵巢癌、乳腺癌、肝细胞癌、前列腺癌及其他肿瘤中检测到其杂合性缺失及染色体重排.该基因位于染色体普通脆性位点16D, 包含9个外显子,编码414个氨基酸相对分子量为46 000大小的蛋白.原发肿瘤组织及细胞系的研究证明该基因为肿瘤抑制基因,其失活可能导致肿瘤的发生,基因敲除实验证实了上述假设.WWOX可能和c-Jun, TNF, p53, p73, AP-2γ,及E2F-1等相互作用而发挥凋亡作用.目前对于该基因是否为肿瘤抑制基因仍存在不同观点,随着研究结果的积累,WWOX基因的功能会日渐明了,并对肿瘤的诊断、治疗和预防产生积极的影响.     

非小细胞肺癌中Bmi-1和WWOX蛋白的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中BMi-1与WWOX蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组化和Western blot检测86例非小细胞肺癌中Bmi-1蛋白和WWOX蛋白的表达水平,分析BMi-1与WWOX蛋白与临床患者特征的关系,并对患者生存影响因素进行分析。结果 Bmi-1蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平显著高于癌旁正常组织中表达水平(0.01),而WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平(0.52±0.05)则显著低于癌旁正常组织中表达水平(0.01)。Bmi-1和WWOX蛋白表达水平均与淋巴结转移有关(0.05)。结论 Bmi-1的高表达和WWOX蛋白的低表达均与淋巴结转移有关。     

WWOX对肝内胆管细胞癌转移的影响

目的 :检测包含WW域的氧化还原酶(WW domain containing oxidoreductase,WWOX)在肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)组织及细胞的表达情况,分析其表达水平与ICC临床特征的相关性,并探索其对ICC细胞迁移、侵袭能力的影响。方法:采用半定量/定量PCR测定ICC组织及细胞中WWOX的表达水平;转染重组质粒pc DNA3.1B-WWOX-Flag,过表达ICC细胞内的WWOX水平;采用细胞划痕及侵袭实验,观察过表达WWOX对ICC迁移、侵袭能力的影响;蛋白免疫印迹检测迁移、侵袭通路相关分子。结果:WWOX在ICC组织及细胞中表达下调,其下调与ICC的转移明显相关(P<0.05);转染pc DNA3.1B-WWOX-Flag质粒可上调ICC细胞WWOX蛋白的表达;过表达WWOX抑制ICC细胞迁移、侵袭能力(P<0.001);过表达WWOX可激活细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)磷酸化,进而下调基质金属蛋白酶9的活性,最终抑制ICC的转移过程。结论:WWOX在ICC中表达下调,体外实验证实过表达WWOX抑制ICC的迁移、侵袭能力。