Urantide对动脉粥样硬化大鼠肝功能及组织形态学的影响

目的:探讨urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠肝功能及组织形态学的影响。方法:采用腹腔注射维生素D3(VD3)及高脂饮食的方法复制Wistar大鼠AS模型,随机分为正常对照组、AS模型组、阳性药组和uran-tide组。生化分析仪检测各组大鼠肝功能指标;HE染色观察大鼠胸主动脉和肝脏的病理学变化;RT-qPCR和Western blot法检测大鼠肝脏中尾加压素Ⅱ(UII)及其受体GPR14的mRNA和蛋白表达水平。结果:AS模型组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)和碱性磷酸酶(ALP)水平较正常对照组显著升高(P <0.05);urantide组大鼠上述各项指标较模型组均显著降低(P <0.05);各组血清中直接胆红素(DBIL)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)和白蛋白(ALB)水平均无显著变化。Urantide可延缓AS大鼠肝细胞脂肪变性,修复肝细胞损伤。AS组大鼠肝脏中UII和GPR14mRNA及蛋白表达水平均较正常组显著增高(P <0.05);随着给药时间的延长,urantide治疗组大鼠肝脏中UII和GPR14 mRNA及蛋白表达水平较AS模型组显著降低(P <0.05)。结论:Urantide可明显减轻AS大鼠肝脂肪变性所引起的肝功能损伤。     

尾加压素及其受体在大鼠肺缺血-再灌注损伤中的表达

目的研究尾加压素Ⅱ及其受体UT在大鼠肺缺血-再灌注损伤中的表达。方法采用免疫组织化学方法观察UⅡ及其受体UT在缺血及再灌注不同时段大鼠肺组织中的变化,同时应用酶联免疫吸附方法测定相应时段血浆中的UⅡ的浓度。结果 UⅡ及UT在肺组织多种细胞中广泛分布,缺血及再灌注后,UⅡ及UT在肺组织各种细胞中表达增强,相应血浆UⅡ的浓度变化与之一致。结论缺血及再灌注损伤可以促使肺组织中多种细胞合成、分泌、释放UⅡ,同时上调UT的表达。     

早期糖尿病大鼠肾组织尾加压素Ⅱ表达的实验研究

目的：探讨早期糖尿病大鼠肾组织中尾加压素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）的表达及其意义。方法：用链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型,将实验动物分为正常对照组（C组）、糖尿病组（D组）和胰岛素干预组（Y组）。5周后收集肾组织,观察各组肾脏病理情况及UⅡ在肾组织中的表达。结果：处理5周后,与C、Y组比较,D组肾小球肥大、肾小球表面积显著增大,小管扩张,上皮细胞肿胀;D组肾小管上皮细胞UⅡ表达明显升高（与C组比较,P〈0.05）;Y组肾小管上皮细胞UⅡ表达有不同程度的下降（与D组比较,P〈0.05）。结论：STZ诱导的早期糖尿病大鼠肾小管上皮细胞UⅡ表达明显上调;应用胰岛素严格控制血糖可部分下调肾组织UⅡ的表达。UⅡ在STZ诱导的早期糖尿病大鼠肾脏病变的发展过程中可能起一定作用。     

Urotensin II evokes neurotransmitter release from rat cerebrocortical slices

Urotensin II (UII) has been reported to modulate rapid eye movement (REM) sleep via activation of brainstem cholinergic neurons and REM sleep is regulated by locus coerleus (LC)-cerebrocortical noradrenergic neurons. We hypothesized that UII may activate LC-cerebrocortical noradrenergic neurons. To test this hypothesis, we have examined the effects of UII on norepinephrine release from rat cerebrocortical slices. In addition, the effect of the putative UT receptor antagonist [Pen(5), DTrp(7), Dab(8)]UII(4-11) (UFP-803) was assessed. We have compared this with other wakefulness-promoting neurotransmitters such as dopamine, glutamate, serotonin and histamine. We also studied the effects of UII and UFP-803 on intracellular Ca(2+) ([Ca(2+)]i) in HEK293 cells stably expressing rat UT receptor (HEK293-rUT cells). UII produced a time- (peaking at approximately 10 min following stimulation with 10nM) and concentration-dependent increase in norepinephrine release with pEC(50) and E(max) (% of basal) values of 8.78+/-0.17 (1.65 nM) and 138+/-2%, respectively. UII also evoked dopamine, serotonin and histamine release with similar pEC(50) values. UII increased glutamate release but only at high concentrations (<100 nM) and this failed to saturate. UII markedly increased [Ca(2+)](i) in HEK293-rUT cells in a concentration-dependent manner with pEC(50) of 8.26+/-0.24. The UT antagonist UFP-803 reversed both UII-increased norepinephrine release from the cerebrocortical slices (pK(B)=8.98) and [Ca(2+)](i) (pK(B)=8.87) in HEK293-rUT cells. Collectively these data suggest that UII evokes the release of norepinephrine via UT receptor activation and produces similar effects on other wakefulness-promoting neurotransmitters: these neurochemical actions of UII may be important for the control of the sleep-wake cycle.     

尾加压素Ⅱ与GPR14 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的研究子痫前期患者胎盘组织尾加压素Ⅱ（UⅡ）及G蛋白偶联受体14（GPR14）mRNA的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法对25例子痫前期（子痫前期组,其中轻度15例,重度10例））患者和20例正常足月孕妇（正常妊娠组）和胎盘组织中UⅡ和GPR14 mRNA表达水平进行检测。结果胎盘组织UⅡmRNA表达水平在轻度子痫前期组,重度子痫前期组均明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。重度子痫前期组孕妇胎盘GPR14mRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论子痫前期患者胎盘UⅡ及其受体基因表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。     

UⅡ／UT系统对LPS刺激枯否细胞固有免疫炎症信号通路TLR4-IRF3的影响

目的：探讨Urotensin Ⅱ（ UⅡ）/UT系统对脂多糖（ Lipopolysaccharide ,LPS）刺激枯否细胞（ Kupffer cell ,KC）固有免疫炎症信号通路Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）-干扰素调节因子3（Interferon regulatory factor 3,IRF3）的影响。方法：体外分离培养大鼠肝KCs,KCs培养上清液促炎性细胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平采用ELISA分析检测,细胞表面TLR4的表达采用流式细胞技术分析,IRF3基因和蛋白表达情况分别采用real-time PCR和Western blot 分析方法检测。结果：LPS刺激后,KCs培养上清液IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平、细胞表面TLR4表达阳性细胞率及细胞内IRF3 mRNA表达水平均显著升高,UT拮抗剂urantide预处理抑制了LPS刺激诱导KCs对上述分子的上调表达;LPS的应用也造成了KCs胞核内IRF3蛋白表达水平升高,而使胞浆内IRF3蛋白表达水平降低,urantide预处理后,抑制了LPS诱导KCs核内IRF3蛋白上调和胞浆水平下调。结论：UⅡ/UT系统通过对TLR4-IRF3通路的正性调控作用,介导了或至少部分介导了LPS刺激KCs的免疫性炎症分泌效应。     

尾加压素基因多态性与妊娠期糖尿病关系的研究

目的研究尾加压素基因多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法应用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测GDM患者120例、正常孕妇100例的尾加压素基因rs228648位点。结果 GDM组患者尾加压素基因rs228648位点的A/A基因型频率为12.50%,均明显低于对照组的28.00%(P<0.05),A基因型频率为38.75%,均明显低于对照组的63.50%(P<0.05);GDM组患者尾加压素基因rs228648位点G基因型频率为61.25%,高于对照组的36.50%(P<0.05)。结论尾加压素基因rs228648位点多态性与GDM的遗传易感性有关联,rs228648位点的A型纯合子可能是GDM的重要保护因素。     

尾加压素Ⅱ对培养乳鼠心肌细胞内钙离子的影响及其机制

目的 观察尾加压素Ⅱ（UⅡ）对体外培养乳鼠心肌细胞内钙离子浓度的影响。方法把体外培养的SD乳鼠心肌细胞以Fluo3／AM荧光指示剂负载,分为4组：正常对照组;单纯UⅡ干预组;尼卡地平提前阻断＋UⅡ干预组;IP3受体拮抗剂XestsponginC＋UⅡ干预组。应用激光共聚焦显微镜技术检测心肌细胞钙离子浓度变化。结果正常对照组心肌细胞内钙离子荧光强度较低（31．65±2．37）;单纯UⅡ干预组钙离子荧光强度增加明显（87．13±5．72）;尼卡地平提前阻断＋UⅡ干预组以及IP3受体拮抗剂XestsponginC＋UⅡ干预组钙离子也有增加,分别为（59．43±4．76）、（54．79±5．18）。结论UⅡ可引起心肌细胞内钙离子浓度增高,其主要的机制可能与细胞外钙离子内流和肌浆网钙离子释放增加有关。     

尾加压索Ⅱ与糖尿病视网膜病变的相关性研究

目的:探讨尾加压索Ⅱ与糖尿病视网膜病变的关系.方法:采用放射免疫分析法检测糖尿病视网膜病变患者(DR)90例和正常对照组(D组)30例血浆中尾加压索Ⅱ的水平,DR患者行直接眼底镜和眼底荧光血管造影检查,按分期定为A、B、C组,检测并比较4组糖化血红蛋白(HbA1c)和尿白蛋白排泄率(UAER),并分析相互的相关性.结果:糖尿病视网膜病变各组患者血浆中尾加压索Ⅱ水平较正常对照组显著升高(P均＜0.01),与HbA1c、UAER呈显著正相关(P＜0.01).结论:血清尾加压索Ⅱ与2型糖尿病视网膜病变密切相关,其浓度的测定对判断2型糖尿病视网膜病变的发生、发展有重要的临床意义.