D3形态学低评分胚胎囊胚形成的影响因素分析

目的：探讨取卵后第3天（D3）形态学低评分胚胎体外囊胚培养的发育潜能,分析影响囊胚形成的临床及胚胎因素。方法：通过序贯培养将D3低评分胚胎继续培养至囊胚期,观察囊胚形成率及优质囊胚形成率。分析年龄、基础窦卵泡数、基础卵泡刺激素（bFSH）、促性腺激素（Gn）总剂量、人绒毛膜促性腺激素（hCG）日雌二醇（E2）水平、获卵数、D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片与囊胚形成的关系。结果：共收集422个取卵周期1 745个低评分胚胎进行囊胚培养,共形成1 046个（59.9%）囊胚,763个（43.7%）优质囊胚。不同基础窦卵泡、bFSH、Gn总剂量、hCG日E2水平、获卵数组间囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均无统计学意义（P＞0.05）;不同年龄组间囊胚形成率差异无统计学意义（P＞0.05）,但优质囊胚形成率差异有统计学意义（P＜0.05）;不同D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片组间囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：低评分胚胎有不同程度的发育潜能,D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片影响低评分胚胎的囊胚形成;年龄、D3卵裂细胞数、D3胚胎碎片影响低评分胚胎优质囊胚的形成。     

STI571对急性非淋巴细胞白血病细胞分化及CD117分化抗原影响的研究

目的探讨STI571对急性非淋巴(ANLL)白血病细胞CD117及原代细胞分化作用的影响.方法不同浓度STI571培养前后采用流式细胞仪测定CD117的表达,涂片吉姆萨、过氧化物酶染色观察细胞的分化情况.结果不同药物浓度组的粒、单核细胞均有不同程度的分化,随着药物浓度的增加,原早幼细胞逐渐减少,中晚幼和成熟细胞数增加,并且过氧化物酶染色阳性改变,有诱导向同系终末分化的作用.CD117的表达于STI571作用后下降,培养后各药物浓度组与培养前之间有显著性差异(P＜0.05),而空白对照组与培养前差异不显著(P＞0.05);培养后各浓度组与对照之间存在显著性差异(P＜0.05),且0.1μmol·L-1与10μmol·L-1的表达存在显著性差异(P＜0.05).结论 STI571对急性非淋巴细胞白血病原代细胞有诱导向同系终末分化的作用,对c-kit酪氨酸激酶有明显的抑制作用,且与药物浓度相关.     

电离辐射导致左半身照射小鼠非照射区域骨髓细胞DNA损伤

目的探讨局部电离辐射后非照射区域骨髓细胞的DNA改变。方法将6~8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、全身照射组、全身屏蔽照射组以及半身照射组4组,用铅屏蔽建立半身照射模型,以8.0Gy60Coγ射线照射,检测小鼠血清SOD、MDA、TNF-α变化,用彗星电泳、嗜多染红细胞微核形成率(fMPCE)等方法观察非照射区域骨髓细胞DNA损伤情况。结果半身照射条件下,小鼠血清TNF-α、MDA升高,SOD降低(P<0.01);非照射区域骨髓彗星样细胞比例明显增加,嗜多染红细胞微核形成率显著增高(与正常对照组比P<0.01)。结论局部电离辐射作用后,可导致非照射区域造血细胞产生损伤效应。TNF-α的增加和氧自由基的激活可能参与了该损伤过程。     

反油酸对人脐静脉平滑肌细胞活力的影响

<正>平滑肌细胞是血管壁中膜的主要细胞成分,是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)和血管成形术后再狭窄(restenosis after angioplasty,RAA)等病理过程形成和发展的重要部位,对血管壁的完整性和紧张性的调节也起重要作用,其异常增殖及形态学转变将导致动脉粥样硬化过程     

小鼠阴道黏膜干细胞生长相关因子的初步研究

目的对小鼠阴道黏膜干细胞培养上清中的细胞因子进行初步鉴定。方法收集稳定传代后的小鼠阴道黏膜干细胞培养上清,进行SDS-PAGE电泳和W estern-b lot检测,鉴定培养上清中阴道黏膜干细胞分泌的细胞因子。结果小鼠阴道黏膜干细胞培养上清中含有一种分子量约为84KD的细胞因子,经W estern-b lot方法检测该细胞因子为干细胞生长因子(HGF)。结论小鼠阴道黏膜干细胞可以分泌有活性的HGF。     

GCF低表达宫颈癌HeLa细胞系的构建及辐射对其调控IER5基因表达的初步探究

目的 构建GCF低表达的宫颈癌HeLa细胞系,在⁶⁰Co γ射线照射下初步探究其细胞增殖以及调控宫颈癌放射敏感基因IER5的表达。 方法 经带有荧光标记的GCF低表达的质粒稳定转染HeLa细胞, G418筛选,蛋白印迹法、实时定量PCR法鉴定得到GCF-shRNA-HeLa单克隆细胞系。倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法探究不同剂量照射后的细胞增殖情况,在不同照射剂量下用蛋白印迹法检测GCF-shRNA-HeLa及对照细胞中IER5蛋白的表达情况。 结果 成功构建稳定表达的GCF-shRNA-HeLa单克隆细胞系,显微镜下观察GCF-shRNA-HeLa细胞比正常HeLa细胞体积小,细胞间隙较大,其中梭形细胞较多。蛋白印迹法及实时定量PCR验证了GCF-shRNA-HeLa的蛋白表达及mRNA转录水平均低于对照组(P<0.05)。辐射情况下实验结果显示在同一照射剂量、同一时间下GCF-shRNA-HeLa细胞比control对照细胞增殖缓慢(P=0.014)。不同剂量照射情况下蛋白印迹法检测HeLa细胞、control-shRNA-HeLa与GCF-shRNA-HeLa细胞IER5蛋白表达情况,结果同一辐照剂量下GCF沉默的细胞系中IER5的表达量比对照细胞高, 4Gy照射的GCF-shRNA-HeLa的IER5表达量最高(P<0.05)。 结论 本实验构建了低表达GCF的HeLa细胞系,初步探讨GCF作为IER5基因抑制性转录因子的作用。结合临床基因靶向治疗,可寻求可以降低GCF表达的方式,通过上调IER5表达这一双效途径来加速宫颈癌细胞凋亡。     

维拉帕米逆转白血病祖细胞多药耐药性的实验研究

应用ＰＨＡ－ＬＣＭ二步法Ｌ－ＣＦＵ半固体琼脂培养体系，对１７例白血病患者进行体外药敏试验。结果显示，２．２μｍｏｌ／Ｌ的维拉帕米能增加高三尖杉酯碱（１．８３×１０－１μｍｏｌ／Ｌ）或柔红霉素（１．７μｍｏｌ／Ｌ）对Ｌ－ＣＦＵ的抑制作用，对Ｌ－ＣＦＵ抑制率分别增加２５．２６％和１４．９５％。２．２μｍｏｌ／Ｌ的维拉帕米本身对Ｌ－ＣＦＵ生长无明显影响。该研究为临床应用维拉帕米辅佐治疗白血病，特别是难治性白血病提供了实验依据。     

转染胰岛素样生长因子-1的骨髓基质细胞对心肌梗死后心功能的影响

目的:移植转染胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的骨髓基质细胞(MSC)到心肌梗死大鼠模型中,观察心肌细胞的凋亡和心功能的变化。方法:采用结扎法制作心肌梗死大鼠模型,用含pBabe-puro/IGF-1的病毒液感染MSC,移植MSC进入梗死心肌边缘。将实验分为心肌梗死组(MI)、心梗单纯移植细胞组(MI+MSC)、心梗移植感染空质粒细胞组(MI+MSC-pBabe-puro)、心梗移植感染IGF-1质粒的细胞组(MI+MSC-pBabe-puro/hIGF-1)。免疫组化检测炎性反应的时间,决定细胞移植的时间点。术后4周,通过TUNEL法检测心肌的细胞凋亡,超声心动图检测心功能的变化。结果:免疫组化结果显示梗死后第7天的ED1细胞的阳性数比第2天明显降低(P<0.05);转染IGF-1的MSC移植到心梗的心肌中,和转染空质粒的MSC以及未作转染的MSC组比较,明显减少心肌的细胞凋亡(P<0.05);且射血分数、左室壁厚度、左室短轴缩短率明显提高(P<0.05)。结论:转染IGF-1的MSC移植到心梗大鼠心肌内,可能是通过减少心肌的细胞凋亡来改善心功能。     

钼和硒对心肌细胞存活的协同作用

本文利用体外培养心肌细胞方法,通过直接观察钼和硒对心肌细胞生长发育及自发性收缩的影响,证明了钼和硒同时作用比钼和硒单独作用有更加明显之效果,即证明在这方面钼和硒具有协同作用。     

穿心莲中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯在茎和叶中的分布

采用薄层扫描法分别测定了12批穿心莲商品药材中茎和叶所含穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量,并进行了比较,结果其总量在茎中平均占0.29%,在叶中平均占2.26%.因此建议穿心莲中叶所占比例应不少于35%.