人眼小梁细胞体外表达表皮生长因子mRNA和表皮生长因子受体

目的 了解培养的小梁细胞分泌表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＥＧＦ）及细胞膜上表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＧＦＲ）的情况。方法 进行人眼小梁细胞体外培养。用ＥＧＦ ｃＤＡＮ探针,α＾－３２ｐ同位素标记及斑点杂交放射自显影法,检测小梁细胞分泌ＥＧＦｍＲＮＡ的情况。结果 人眼小梁细胞体外培养成功。免疫组化染色显示小     

Cytotoxicity of urushiols isolated from sap of Korean lacquer tree (Rhus vernicifera stokes)

Cytotoxicities of four urushiols, congeners isolated from the sap of Korean lacquer tree (Rhus vernicifera Stokes), to 29 human cancer cell lines originated from 9 organs were evaluated. Their values of 50% growth inhibition were below 4 microg/ml, and showed cell line specific cytotoxicity. The present result is the first report on the cytotoxicity of urushiols suggesting that they would have an anticancer activity to human cancer cells.     

多种中药成分诱导大鼠骨髓间质干细胞转变为神经元样细胞

目的　体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法　通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。结果　大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD1 4、CD1 1α、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性 ,CD2 9、CD44、CD90、CD1 0 5、CD1 66呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导 1～ 3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (nestin)呈阳性 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阴性。结论　多种传统中药成分及中药制剂体外能诱导大鼠MSCs分化为神经元样细胞     

Thrombopoietic factors potentially useful in the treatment of acute leukemia

Thrombocytopenia is a major cause of morbidity following intensive chemotherapy for acute leukemia. Over recent years, there has been an increasing use of platelet transfusions which, although generally efficacious to prevent severe hemorrhage, have associated risks of transmitting blood-borne disease and of alloimmunization. Therefore, there is a clinical requirement for a drug that will reliably alleviate the thrombocytopenia associated with leukemia therapy. The c-mpl ligand thrombopoietin is the most interesting factor for the treatment of thrombocytopenia because of its lineage specificity. Phase I and II studies confirm its biological efficacy to induce rise in platelet count in patients with solid tumors and acute leukemia. Several other pleiotropic hematopoietic growth factors are also currently in clinical trials. These include interleukin-6, interleukin-3, interleukin-11, PIXY321 and stem cell factor. The effects of these cytokines appear to be modest at most and, with the exception of interleukin-11, their side effects are likely to limit their clinical application. Combinations of factors may prove more efficacious approaches to enhance platelet recovery.     

增强型绿色荧光蛋白基因转染及TGFβ3诱导前软骨干细胞向成软骨方向分化

目的　探讨增强型绿色荧光蛋白基因 (EGFP)转染前软骨干细胞 (PSCs)的效果及TGFβ3 诱导PSCs向成软骨方向定向分化的可行性。方法　利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(FGFR 3)表面标志的PSCs。采用脂质体介导法将EGFP基因转染PSCs,G4 18筛选得到EGFP基因修饰PSCs。用免疫组化及免疫荧光检测EGFP基因修饰PSCs的FGFR 3表达。采用藻酸盐凝胶培养 ,以TGFβ3 诱导分离纯化的PSCs向成软骨方向定向分化。应用免疫组化、RT PCR检测PSCs向成软骨方向分化过程中特异性软骨基质成分的表达情况。结果　EGFP基因转染PSCs后 ,2 4hGFP开始表达 ,4 8～ 72hGFP表达最强。G4 18筛选后 ,EGFP基因修饰PSCs体外培养 6周仍有较强GFP表达。在含TGFβ3 的藻酸盐凝胶培养 7、14、2 1d均有II型胶原表达 ;诱导2 1d的PSCs免疫组化检测可见细胞及周围均有X型胶原、Aggrecan、COMP表达 ;RT PCR检测显示在培养早期 ( 8d内 )开始出现Aggrecan、X型胶原、COMP等的表达 ,中期 ( 8d后...     

电针结合经颅磁刺激对脑缺血大鼠神经干细胞增殖和电跳台的影响

目的研究电针结合经颅磁刺激（rTMS）对急性脑缺血大鼠神经干细胞激活、增殖以及学习、记忆能力的影响。方法将120只雄性Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、电针组、rTMS组和电针加rTMS组。复制急性大脑中动脉缺血模型，选取1日作为开始治疗的时间点，分别施以电针、rTMS和电针加rTMS方法处理，大鼠在各相应时间点处死前12h内每4小时腹腔注射溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）1次，分别于治疗第7、14、28日进行BrdU免疫组化检测，观察鼠脑梗死面积以及鼠脑BrdU阳性细胞数，并在治疗前后对大鼠行电跳台评测。结果电针组、rTMS组和电针加rTMS组梗死侧海马齿状回颗粒细胞层（SGZ）、室管膜下层（SVZ）周围BrdU在第7、14日表达较模型组增强（P〈0．05），尤其以电针加rTMS组明显，第28日各组差异无统计学意义，电针组、rTMS组和电针加rTMS组第7、14、28日电跳台实验评分均较模型组改善（P〈0．05），尤以电针加rTMS组明显。结论电针结合rTMS治疗能促进大鼠神经干细胞的增殖，改善大鼠学习记忆能力。     

莱菔硫烷对过氧化氢诱导牛眼小梁细胞氧化应激损伤的保护作用

背景 研究表明小梁网组织的氧化应激损伤是开角型青光眼的基本病理过程之一,莱菔硫烷(SFN)可通过激活Nrf2/ARE通路发挥其抗氧化应激作用,但其是否可对氧化应激损伤的小梁细胞发挥作用目前尚不清楚. 目的 探讨SFN对H2O2诱导的牛眼小梁细胞氧化应激损伤的防护作用. 方法 采用组织块培养法对新鲜摘取的黑牛眼球小梁组织进行小梁细胞原代培养,将第3代牛小梁细胞以1x 103/孔的细胞密度接种于96孔板中培养24 h后将细胞分为4个组,空白对照组加入100μl无血清培养基,H2O2组细胞在空白对照组的基础上加入100 μl终浓度为100 μmol/L H2O2建立细胞氧化应激损伤模型,SFN组在培养液中加入100μl终浓度为10μmol/L SFN,而SFN+H2O2组在SFN组的基础上加入100 μmol/L H2O2,细胞培养后6h采用CCK-8法检测各组牛眼小梁细胞活力,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率.结果 传至第3代的细胞呈梭形,形状和大小较均一,细胞质丰富,可见色素颗粒,核仁大.H2O2组和SFN+H2O2组相对细胞活力分别为空白对照组的(67.00±1.27)％和(80.00±6.25)％,其中SFN+H2O2组相对细胞活力低于空白对照组和SFN组,但明显高于H2O2组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).空白对照组、H2O2组、SFN组和SFN+H2O2组细胞凋亡率分别为(11.33±0.77)％、(32.31±1.03)％、(10.44±0.68)％和(17.68±0.21)％,各组间总体比较差异均有统计学意义(F-539.96,P＜0.01),其中SFN+H2O2组细胞凋亡率明显低于H2O2组但高于空白对照组和SFN组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 SFN可以增强H2O2诱导的牛眼小梁细胞的抗氧化应激能力,减轻氧化应激对牛眼小梁细胞的损伤.     

地黄脱毒技术研究

从地黄种茎育出的无菌幼苗上切取下的茎尖,用组织培养方法可诱导成去病毒幼苗。本试验还研究出适宜地黄茎段苗消毒的消毒剂为0.05％HgCl_2。适宜于茎段苗生长的MS培养基的琼脂浓度为0.7％,pH为7。诱导茎尖成苗的培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L。繁殖脱毒苗所用的MS培养基为1/4大量元素 1/2微量元素,并用1/2食用白砂糖代替蔗糖,可使快繁成本降低48.7％。     

Effects of point application on celiac mast cell degranulation in mice with allergic rhinitis: An experimental study

目的：研究不同处理方法对卵白蛋白（Ovum Albumin,OVA）变应性鼻炎小鼠模型腹腔肥大细胞脱颗粒的影响。方法：将60只雌性小鼠随机分为5组,每组12只,分别按不同方法处理后分离各组小鼠的腹腔肥大细胞,中性红染色后计算腹腔肥大细胞脱颗粒率。结果：正常对照组、OVA变应性鼻炎组、穴位敷贴组、激素对照组、磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer Saline,PBS）阴性对照组小鼠腹腔肥大细胞脱颗粒率分别为（15±6）％、（53±11）％、（37±13）％、（31±15）％、（47±14）％。OVA变应性鼻炎小鼠的腹腔肥大细胞有明显的脱颗粒现象：与OVA变应性鼻炎小鼠相比,穴位敷贴组及激素对照组小鼠的腹腔肥大细胞脱颗粒现象显著减轻;PBS对照组小鼠的腹腔肥大细胞脱颗粒现象没有明显变化。结论：推测穴位敷贴抗过敏机制为稳定肥大细胞膜,抑制肥大细胞脱颗粒,减少致炎介质产生。