海洋岩虫抗菌肽筛选及抗癌活性的初步研究

将岩虫匀浆液经反相浓缩、凝胶过滤和亲和柱层析获得活性组分，在体外用MTS／PMS(氮兰四唑盐／吩嗪硫酸甲酯)方法筛选抗菌肽，再分别用MTS／PMS方法和ELISA—AFP(甲胎蛋白)方法检测其对人肝癌细胞株HepG2增殖、AFP分泌及对正常大鼠成骨细胞株MC3T3-E1增殖的影响。结果表明，纯化的岩虫抗菌肽为组成型碱性蛋白(MW8．1kDa，pI8．6)，不同浓度抗菌肽对肝癌细胞增殖和AFP的分泌均有抑制作用，抑制作用大小与抗菌肽浓度呈正相关性；对正常成骨细胞未见明显的抑制和杀伤作用。     

小肠无管法动力位双对比造影的价值分析

目的　介绍一种简易的小肠双对比造影法———小肠动力位无管法双对比造影。方法　口服钡剂进入小肠后再服产气粉 ,通过改变体位及配合促胃肠蠕动药物的使用 ,使气体进入小肠形成双对比相。对照组采用传统方法。结果　试验组小肠疾病阳性检出率显著高于对照组。结论　小肠动力位无管法双对比造影是小肠疾病检查的首选方法     

实时定量PCR检测体外诱导条件下小鼠骨髓基质细胞S100mRNA表达水平变化

目的:检测S100 mRNA含量,初步探讨骨髓基质细胞体外诱导条件下向雪旺细胞样细胞分化的可能性。方法:采用差速贴壁的方法分离、培养小鼠骨髓基质细胞。经β-ME,ATRA,Forskolin,bFGF,PDGF,HRG体外诱导后,利用实时定量PCR检测S100 mRNA水平的变化。结果:诱导后,骨髓基质细胞S100 mRNA水平上升,诱导前后水平变化有统计学意义(P<0.05)。结论:实时定量PCR检测S100 mRNA含量具有较高的灵敏度和特异性。体外诱导后骨髓基质细胞S100 mRNA表达量增多。     

Neuroprotective Effect of Melatonin on Retinal Ganglion Cells in Rats

Glaucoma , the fourth blindness-causing ill-ness in the world, is mainly manifested by twosymptoms : elevated intraocular pressure (IOP)and loss of visual field. Though the IOP of manypatients with glaucoma can be li mited to a properor low level ,it can' t prevent the i mpaired nervefrom deteriorating and therefore , with the condi-tionit is i mportant to protect optic nerve .In addi-tion, the progressive apoptosis of RGCs is thepathological basis for the glaucoma to i mpair thevisual func…     

Effects of PDTC on the Proliferation and PCNA Expression of Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Proliferative vitreoretinopathy (PVR) is oneof the most common eye diseases that couldlead tosevere vision i mpairment and tend to cause blind-ness .It has beenfound that the abnormal prolifer-ation of retinal pigment epithelium(RPE) plays akey role in the onset and development of PVR.Under pathologic status ,such as rhegmatogenousdetachment of retina and severe ocular trauma ,RPE cells may migrate and proliferate because ofthe sti mulations of cytokines or chemokines ,thusmay lead to path…     

Vascular Endothelial Growth Factor165-regulated Nasopharyngeal Carcinoma Cell Lines Invasion and Migration Involve Expression and Activation of Matrix Metalloproteinase-2

The effect of vascular endothelial growth factor （VEGF） overexpression on matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） in nasopharyngeal carcinoma （NPC） cells in vitro and the possible mechanism involved were investigated, and the correlation between the expression of VEGF and MMP-2 in NPC evaluated. The NPC cells were transfected with PAd-trackVEGF165 plasmid. The expression levels of VEGF and MMP-2 mRNA and protein in NPC cells were detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blot respectively. It was found that the expression of VEGF and MMP-2 mRNA and protein was significantly increased in NPC cells after transfection of VEGF 165. It was concluded that the expression of VEGF was correlated to the in vitro invasion of NPC cells, and the induction of MMP-2 by VEGF was a key process of NPC cell invasion.     

吖啶橙染色法在膀胱癌无创诊断中的应用

[目的]运用吖啶橙染色荧光显微镜(acridineorenge,AO-F)检查法进行膀胱癌无创性诊断。[方法]采用AO-F检查法及巴氏染色分级(papanicolaousstaingradingsmethod,PG)检查法检测79例膀胱癌患者及80例非肿瘤患者的尿脱落细胞。[结果]两种染色法对诊断膀胱癌均有统计学意义,分层卡方检验,χMH2=173.461,P=0.000。巴氏染色法与吖啶橙荧光染色法比较,后者膀胱癌的检出率优于前者,χ2=19.606,P=0.000。巴氏染色法检出膀胱癌的敏感度为56.6%,特异度为100%。吖啶橙荧光染色法检出膀胱癌的敏感度为85.5%,特异度为100%。80例非膀胱癌患者两种尿脱落细胞检查的阳性检出率为0%。[结论]吖啶橙染色法比单从细胞形态上检测肿瘤细胞更具有重要的临床价值,可作为膀胱癌的辅助诊断方法。     

APA-3T3细胞微囊的深低温保存

目的:通过优选冻存液的成份和浓度,建立低温保存APA微囊化小鼠成纤维细胞(3T3细胞)的方法。方法:用海藻酸钙-多聚赖氨酸-海藻酸钙微囊(APA)包裹3T3细胞制成APA-3T3细胞微囊。以高糖DMEM培养液为基础冻存液,分别加入不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)或牛血清白蛋白(BSA)。分别将不同的冻存液加入APA-3T3中。按程序控制降温梯度,置于液氮中保存。快速复温后,光镜下观察APA-3T3的形态、细胞活率及膜通透性。结果:①10%DMSO组的微囊内细胞活率降低最少,细胞活率达(75.68±1.54)%,P<0.01。微囊完好率达到(94.48±0.90)%,P<0.01。②与其它组相比,4%BSA组的微囊内细胞活率降低程度最小,活率达(73±1.26)%,P<0.01。微囊完好率最高,为(85.1±0.82)%,P<0.01。③加入不同成份和浓度的冻存液对微囊的通透性没有明显影响。结论:在冻存液中加入10%DMSO和4%BSA,可在低温保存的过程中较好地保护细胞的存活及微囊的完整性。     

骨髓单个核细胞经冠状动脉移植治疗心肌梗死的实验研究

目的:观察同基因骨髓单个核细胞经冠状动脉植入心脏后的分布及分化状况。方法:用雄性近交系Lew is大鼠作为模型动物。首先,在大鼠颈部异位心脏移植模型基础上,以冷冻法制备急性心肌梗死模型。其次,心肌梗死模型建立2 d后,分离、纯化大鼠骨髓单个核细胞,并以PKH26红色荧光染料标记。然后,经移植心脏冠状动脉输注PKH26标记的同基因骨髓单个核细胞(实验组)和DMEM培养液(对照组)。最后,细胞移植7 d后,采集各标本,检测植入细胞分布及分化状况。结果:病理检查证实冷冻区域心肌变性坏死且界线清楚。利用该模型成功的模拟了临床经冠状动脉输注自体骨髓单个核细胞的治疗方法。PKH26红色荧光阳性细胞主要集中于实验组大鼠移植心脏的冷冻梗死区,脾脏、骨髓也可见少量阳性细胞分布,移植心脏的非梗死区及其余脏器组织切片均未见红色荧光阳性细胞;梗死区内PKH26标记的细胞部分表达CD34;梗死区内connexin43的表达明显高于对照组。结论:供者同基因骨髓单个核细胞经冠状动脉移植后,能够存活并定向迁移至心肌损伤区域,并且可能促使梗死区出现心肌再生。     

反义EGFR寡核苷酸对血管紧张素Ⅱ促VSMC增殖的影响

目的探讨脂质体介导的反义表皮生长因子受体寡核苷酸基因转染对血管紧张素Ⅱ促大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响．方法用反义表皮生长因子受体寡核苷酸脂质体复合物转染Sprague—Dawley大鼠血管平滑肌细胞，通过RT—PCR、Western—Bloting分别检测转染后EGFRmRNA及蛋白的表达情况，用^3H—Tdr掺入率实验检测经反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染再用血管紧张素Ⅱ刺激的血管平滑肌细胞的增殖情况，结果反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染大鼠血管平滑肌细胞后，EGFRmRNA及蛋白的表达较正义组及对照组明显减少（P〈0．05）；用血管紧张素Ⅱ刺激后，反义组细胞的^3H—Tdr掺入较正义组及对照组明显降低，经方差分析两者有显著差异（P〈0．05），结论脂质体介导的反义表皮生长因子受体寡核苷酸转染减弱了血管紧张素Ⅱ的促血管平滑肌细胞增殖效应，证明了表皮生长因子受体在血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖中起重要作用．