Molecular diagnostics for the detection of Bokeloh bat lyssavirus in a bat from Bavaria,Germany

A brain sample of a Natterer's bat tested positive for rabies with classical virological techniques. Molecular techniques confirmed the presence of Bokeloh bat lyssavirus (BBLV) in Germany for the second time. Sequence analysis revealed a close genetic relationship to the initial German BBLV case. Using a TaqMan RT-PCR specific for BBLV viral RNA was detected in various other organs albeit with differences in the relative viral load.     

实时荧光定量PCR检测不孕不育患者解脲支原体感染

目的了解女性不孕不育症患者泌尿生殖道解脲支原体感染情况。方法随机抽取60例不孕症患者和正常生育妇女的60例女性,并采集宫颈黏液以FQPCR法进行Uu检测。结果不孕不育症患者和正常生育妇女对照组Uu阳性检出率分别为72.0%（36/60）和28.0%（11/60）,不孕不育患者妇女Uu阳性检出率显著高于对照组妇女（P〈0.01）。结论生育期女性在排除其他非感染性因素基础上发生的不孕症与Uu感染有密切的病因学关系。     

5α还原酶抑制剂对老年大鼠5α还原酶mRNA表达的影响

目的 探讨5α还原酶抑制剂对老年大鼠5α还原酶mRNA表达的影响.方法 取50只健康的20周龄雄性SPF级SD大鼠,分为依立雄胺组（20只,喂饲依立雄胺3mg·kg^-1·d^-1）、非那雄胺组（20只,喂饲1 mg·kg^-1·d^-1）、正常对照组（10只,喂饲0.9%氯化钠溶液）.检测所有大鼠前列腺组织中Srd5a1、Srd5a2基因及bcl-2的表达情况,并作组间比较分析.结果 依立雄胺组、非那雄胺组、正常对照组Srd5a1的表达相对量分别为1.46±1.98、2.18±2.53、1.97±2.43,Srd5a2的表达相对量分别为1.31±0.37、1.29±0.47、1.05±0.36,bcl-2的表达分别为148±42、152±59、216±52;3组间Srd5a1、Srd5a2基因的表达并无明显差异（P〉0.05）,而依立雄胺组及非那雄胺组bcl-2的表达均明显低于正常对照组（均P〈0.05）,但依立雄胺组与非那雄胺组并无明显差异（P〉0.05）.结论 5α还原酶抑制剂可以减少凋亡抑制因子bcl-2的表达,从而促进前列腺增生组织细胞凋亡的发生,但可能并不能影响5α还原酶mRNA的表达.     

辛伐他汀对骨关节炎模型软骨细胞保护作用的研究

目的通过体内和体外实验研究辛伐他汀对骨关节炎模型(OA)膝关节软骨细胞的保护作用。方法取30只6月龄雄性新西兰大白兔,随机分为假手术组(SHAM组,10只)、造模组(ACLT组,10只)和辛伐他汀组(ACLT+SIM组,10只),采用右膝关节前交叉韧带切断术(ACLT)制作骨关节炎模型,ACLT+SIM组每天予辛伐他汀10 mg/kg灌胃。实验持续8周,所有动物在最后一次灌胃的第2天处死。采用酶消化法提取右膝关节软骨细胞进行体外培养,另取SHAM组左侧关节软骨细胞进行IL-1β(10μg/L)诱导的单纯体外关节炎细胞模型制作并予以辛伐他汀(1×10-6mol/L)干扰,分别作为IL组及IL+SIM组。培养2周后提取所有细胞RNA,采用实时荧光定量PCR(Realtime RT-PCR)方法检测骨关节炎发生与保护相关的基因MMP-1、MMP-3、MMP-13a、ggrecan mRNA的表达,同时ELISA法检测细胞上清中及Western Blotting法检测细胞MMP-1的表达,15~19 d CCK-8法检测各组细胞增殖能力。结果体内部分:Aggrecan mRNA的表达在SIM+ACLT组、ACLT组均显著低于SHAM组,余检测mRNA的表达在SIM+ACLT组、ACLT组均显著高于SHAM组;MMP-1的表达在SIM+ACLT组、ACLT组均显著高于SHAM组;细胞增殖的检测结果IL+SIM组与IL组均显著低于SHAM组,余组间无差别。体外部分:IL+SIM组Aggrecan的mRNA表达显著高于IL组,余mRNA的表达在IL+SIM组显著低于IL组(P<0.05),ELISA、Western Blotting检测MMP-1蛋白量与此一致。IL+SIM组与IL组均显著低于SHAM组,但IL+SIM组与IL组无差别。结论口服辛伐他汀不能显著影响兔膝关节不稳定诱发的骨性关节炎模型关节软骨细胞中与骨关节炎发生及保护相关的部分基因的表达,体外给药则可以降低关节炎模型软骨细胞促进骨关节炎发生的相关基因MMPs的表达。辛伐他汀在体内体外均不能刺激软骨细胞的增殖。     

淋病奈瑟菌核酸的不同提取方法比较及评价

目的比较评价磁珠法、柱子吸附法和煮沸裂解法3种不同的核酸提取方法对淋病奈瑟菌(淋球菌)DNA提取效率的差异。方法对已确诊的淋球菌培养基挑取20个小菌落制成悬液,做1︰1～1︰100 000稀释度稀释,分别使用磁珠法、柱子吸附法和煮沸裂解法进行DNA提取,用实时荧光定量PCR对其提取效率进行评价。结果在不同浓度淋球菌的DNA提取中,以磁珠法的敏感性和重复性最高,而柱子吸附法和煮沸裂解法次之,<1×105copies/mL以下的拷贝数,3种DNA提取方法之间重复性和敏感性差异明显,磁珠法的提取效率最高,柱子吸附法次之,煮沸裂解法最差;>1×105copies/mL的细菌拷贝数的样本,3种方法差异随浓度增高不断缩小。结论磁珠法提取淋球菌DNA的效率、敏感性和重复性最高,在实际临床科研工作中,各实验室可根据自身实际情况选择不同的DNA提取方法。