奥沙利铂对不同p53状态肝癌细胞中DNA损伤修复基因GADD45β的诱导差异及调控机制

目的 探索奥沙利铂对不同p53状态肝癌细胞的DNA损伤修复基因(GADD45β)诱导差异及可能调控机制.方法 转染p53全序列建立Hep3B+p53.体外合成GADD45β近端启动子序列群(-618至-314),构建荧光素表达质粒,转染肝癌细胞株HepG2、Hep3B和Hep3B+p53.以实时荧光定量PCR比较奥沙利铂对GADD45β表达诱导及其近端启动子活性影响差异;比较对DNA合成和细胞克隆形成能力抑制差异;通过Caspase-3的表达变化测定凋亡的发生和发展.结果 奥沙利铂对Hep3B中GADD45β诱导并不明显.转染p53全基因序列后,Hep3B+p53对奥沙利铂的敏感性明显增加,并呈现出剂量-效应的正相关关系.荧光素分析提示奥沙利铂作用Hep3B+p53后的启动子NF-κB(-618/+6)和E2F-1(-470/+6)活性较Hep3B明显增强约1.5倍和0.8倍.奥沙利铂能够更加明显地抑制Hep3B+p53的DNA合成能力和细胞克隆形成能力,100 μmol/L奥沙利铂作用后Hep3B+p53DNA合成率为30.41％,对细胞克隆形成能力的抑制率则达到75.60％,与Hep3B相比差异显著.奥沙利铂作用后Hep3B+p53的Caspase-3能够迅速地启动凋亡的发生和发展.结论 p53对铂类化疗药物对肝癌细胞的GADD45β诱导具有重要作用,增强转录调节因子的表达水平是其可能的作用机制.     

倾斜种植术在上颌后牙区骨量不足患者中的应用效果

目的 探究倾斜种植术在上颌后牙区骨量不足患者中的应用效果。方法 选取2020年3月-2022年3月于我院行种植牙手术治疗的86例上颌后牙区骨量不足患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和研究组,每组43例。对照组采用常规种植术治疗,研究组采用倾斜种植术治疗,比较两组临床疗效、心理状况、牙周指标及治疗满意度。结果 研究组治疗总有效率为93.02%,高于对照组的86.05%（P＜0.05）;研究组SAS评分、SDS评分均低于对照组（P＜0.05）;研究组PD、GI、SBI、MD均优于对照组（P＜0.05）;研究组治疗满意度为95.35%,高于对照组的88.37%（P＜0.05）。结论 倾斜种植术在上颌后牙区骨量不足患者中的应用效果确切,可有效改善患者的牙周指标,减轻其焦虑、抑郁情绪,有利于提升治疗满意度。     

股骨外侧壁形态对股骨转子区骨折内固定失效的预测研究

目的：探讨外侧壁形态与股骨转子区骨折早期内固定失效的关系。方法：选取2015年1月至2020年1月行内固定治疗的295例股骨转子区骨折患者,根据术后是否出现早期内固定失败将患者分为两组,即失败组19例和正常组276例。对两组患者性别、患侧、年龄、AO分型、身体质量指数（body mass index,BMI）、术前血红蛋白、X线测量下外侧壁厚度、术前合并内科疾病、术中失血量、术后尖顶距（tip apex distance,TAD）、术后颈干角、手术时间等资料进行比较。比较两组外侧壁形态,对外侧壁形态与股骨转子区骨折早期内固失效进行相关性分析。结果：两组患者术后随访1年以上。两组患者在术中失血量、手术时间、术后TAD、术后颈干角等方面比较,差异无统计学意义（P>0.05）。末次随访失败组视觉模拟评分（visual anague scale,VAS）高于正常组（P<0.01）,失败组Harris评分小于正常组（P<0.05）。绘制外侧壁形态与股骨转子区骨折早期内固定失败之间的受试者工作特征（receiver operator characteristic,ROC）曲线,中...     

民族地区农村留守老人社会支持及护理服务需求现状研究

目的了解民族地区农村留守老人社会支持与护理服务需求情况,为探索适宜的社区护理模式提供参考。方法采用社会支持评定量表及社区护理服务需求评定量表对恩施土家族苗族自治州3个乡镇的235名留守老人进行调查。结果该民族地区农村留守老人社会支持总分为(31.35±3.24)分,护理服务需求总分为(4.55±0.28)分,得分最高的3个条目是紧急救护(4.95±0.22)、上门基础护理(4.93±0.26)、转诊介绍和协助转诊(4.87±0.33),得分最低的3个条目是临终护理(2.09±0.55)、心理护理(4.28±0.48)、饮食营养指导(4.36±0.48);代管孙辈数目、年龄、客观支持是留守老人社区护理服务需求的影响因素(调整R2=0.696)。结论该民族地区农村留守老人社会支持较少,社区护理服务认识不够,寻求一种既经济方便又行之有效的社区护理模式对该民族地区农村留守老人的健康照护至关重要。     

Feline mitochondrial DNA sampling for forensic analysis: When enough is enough!

Pet hair has a demonstrated value in resolving legal issues. Cat hair is chronically shed and it is difficult to leave a home with cats without some level of secondary transfer. The power of cat hair as an evidentiary resource may be underused because representative genetic databases are not available for exclusionary purposes. Mitochondrial control region databases are highly valuable for hair analyses and have been developed for the cat. In a representative worldwide data set, 83% of domestic cat mitotypes belong to one of twelve major types. Of the remaining 17%, 7.5% are unique within the published 1394 sample database. The current research evaluates the sample size necessary to establish a representative population for forensic comparison of the mitochondrial control region for the domestic cat. For most worldwide populations, randomly sampling 50 unrelated local individuals will achieve saturation at 95%. The 99% saturation is achieved by randomly sampling 60–170 cats, depending on the numbers of mitotypes available in the population at large. Likely due to the recent domestication of the cat and minimal localized population substructure, fewer cats are needed to meet mitochondria DNA control region database practical saturation than for humans or dogs. Coupled with the available worldwide feline control region database of nearly 1400 cats, minimal local sampling will be required to establish an appropriate comparative representative database and achieve significant exclusionary power.     

武警南疆某部新兵健康教育需求调查评估

 目的 调查并评估南疆武警某部新兵的健康教育需求。方法 通过自编调查问卷的方法,调查了南疆武警某部480名新兵的健康教育需求内容、健康需求方式、健康知信行现状,并按不同学历、不同户籍对新兵的健康教育需求进行综合分析、评估。结果 武警南疆某部新兵健康知信行现状中健康知识总知晓率为70.25%,健康态度总持有率为88.46%,健康行为总持有率为62.35%;对健康教育知识的需求广泛,健康教育需求内容居前5位的依次是反恐维稳自我防护(100%),反恐维稳心理调节(100%),民族地区生活习俗(87.95%),沙漠地区降温防寒知识(83.93%),战伤的救护知识(83.09%)和沙漠地区气候特点(83.09%);新兵处理应激与社交障碍的需求最低(43.97%)。健康教育需求方式排在前2 位的分别是录像、幻灯等多媒体和上网自学,分别为84.24%和 60.44%;不同学历、不同户籍新兵在性生理与性心理需求方面差异有统计学意义。结论 南疆武警新兵对于健康教育突出的需求是反恐维稳自我防护、反恐维稳心理调节和民族地区生活习俗,喜欢的健康教育方式为录像、幻灯等多媒体和上网自学。     

急性重度狗马尾束缢和鞘内注射脑源性神经生长因子对背根神经节的影响

目的设计下腰骶部背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）中央突束缢的多重狗马尾束缢模型并致马尾综合征的实验研究,分析鞘内注射可生物降解的脑源性神经生长因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）在DRG内感觉神经元损伤中的修复作用。方法成年雄性杂种犬（n=18）随机均分成I组（假手术组）、Ⅱ组（对照组）和Ⅲ组（实验组）。Ⅱ组和Ⅲ组动物行多重马尾束缢（multiple cauda equina constrictions,MCEC）48h后解除马尾压缢,同时Ⅲ组鞘内注射可生物降解（PLGA）的纳米微球BDNF（15mg,内含有活性BDNF2．5mg）。术后1周、2周和4周分别取相应DRG行HE染色及BDNF的免疫组化分析,并行神经功能评估和半定量评分。结果MCEC48h后持续观察4周,相比较Ⅱ组、Ⅲ组相应DRG神经元群体内BDNF免疫反应性更强且其神经功能评估、半定量评分改善更明显（P〈0．05）。,结论鞘内注射持续缓慢释放的BDNF纳米粒,在治疗急性重度马尾综合征的狗模型中疗效明显。     

Ki-67启动子的克隆及其转录活性

目的 克隆肿瘤特异Ki-67启动子,观察其在人肿瘤细胞中的转录活性.方法 提取肾癌Ketr-3细胞基因组总DNA作为模板,聚合酶链反应(PCR)获取1.6 kb的Ki-67启动子DNA片段.克隆到pGL3-Basic载体构建双荧光素酶检测质粒pGLB-Ki-67.将pGLB-Ki-67转染4种人肿瘤细胞及人脐静脉内皮Huvec细胞,使用双荧光素酶检测系统鉴定启动子活性及肿瘤特异性.结果 电泳与测序结果 显示克隆出的Ki-67启动子片段序列与Genbank中记录一致,pGLB-Ki-67质粒构建成功.其启动子活性在Hela、BIU-87、Ketr-3、A549 4种人肿瘤细胞内分别达到SV40 promoter/enhancer活性的21.0%、31.1%、23.9%和7.2%;在Huvec细胞内仅为0.5%.结论 克隆出I(5-67基因启动子(-820～+771),并证明其具有良好转录活性.     

人肠癌RKO细胞周期依赖性激抑制因子基因启动子区甲基化状态的研究

目的 探讨人结肠癌RKO细胞周期依赖性激酶抑制因子(CKIs)家族启动子区CpG岛甲基化状态及其甲基化可逆性特征.方法 应用特异性DNA甲基转移酶(DNMTs)抑制剂5-Aza-2]-deoxycytidine(5-Aza-CdR)处理肠癌细胞,甲基特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific PCR,MSP)、T-A克隆及DNA测序法分析RKO细胞CKIs家族抑癌基因p15ink4b、p16ink4a/CDKN2、p21/cip、p27/kip启动子CpG岛甲基化状态.结果 未经5-Aza-CdR作用的肠癌RKO细胞,其p15ink4b、p16ink4a/CDKN2基因组DNA胞嘧啶(C)保持不变,这提示在其单链DNA中胞嘧啶呈甲基化状态;而经5-Aza-CdR作用的肠癌RKO细胞,其p15ink4b、p16ink4a/CDKN2、p21/cip和p27/kip基因组DNA胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶,表明在DNA单链中胞嘧啶已呈去甲基化状态.结论 肠癌RKO细胞周期INK4家族(p15ink4b和p16ink4a/CDKN2)基因的启动子区处于异常的高甲基化状态,而KIP/CIP家族(p21/cip和p27/kip)基因未处于高甲基化状态;5-Aza-CdR能较好地逆转肿瘤细胞INK4家族基因DNA高甲基化状态.     

S腺苷蛋氨酸对肝癌细胞中GADD45β基因的表达诱导及其机制研究

目的 初步明确肝癌细胞中特异性表达缺失的GADD45β基因近端启动子活性调控中心,并探讨S腺苷蛋氨酸对肝癌细胞HepG2中GADD45β表达的影响及可能机制.方法 以30～50个碱基的间隔,于体外人工合成GADD45β近端启动子序列(-618～-520),分别插入pGL3 basic荧光素表达质粒的荧光基因上游,以电穿孔法转染HepG2,根据启动子活性强度结合TRANSFAC数据库,分析可能存在的转录调节因子结合位点;实时荧光定量PCR比较S腺苷蛋氨酸作用前后HepG2细胞GADD45β表达,并在此基础上进一步比较S腺苷蛋氨酸对GADD45β启动子活性的诱导作用,探讨其可能作用机制,并为GADD45β近端启动子研究提供功能性证据.结果 GADD45β近端启动子中含有3个NF-kB转录调节因子与启动子结合位点(-602/-593、-581/-572、-537/-528);S腺苷蛋氨酸能明显诱导HepG2中GADD45β的表达,并呈现出剂量一效应的正相关关系,同时其能相应明显诱导NF-kB的启动子活性.结论 S腺苷蛋氨酸能明显诱导肝癌细胞中特异性缺失的GADD45β基因表达,增强转录调节因子NF-kB的活性水平是其可能的作用机制,该研究为S腺苷蛋氨酸的肝脏保护作用提供了新的实验依据.