Café-au-lait macules and pediatric malignancy caused by biallelic mutations in the DNA mismatch repair (MMR) gene PMS2

A 14-year-old male presented with a T4 sigmoid adenocarcinoma, <10 colonic adenomas and multiple café-au-lait macules. Family history was not suggestive of a dominant hereditary form of colorectal cancer. Evaluation of the tumor revealed abnormal immunohistochemical staining of the PMS2 protein and high frequency microsatellite instability. Germline analysis identified biallelic PMS2 missense mutations. A new cancer syndrome caused by biallelic mutations in the mismatch repair genes, including PMS2, is now emerging and is characterized by café-au-lait macules, colonic polyps and a distinctive tumor spectrum.     

肝癌及癌旁组织中p53基因及AFP、CEA等表达异常及相关性研究

目的 :从分子生物学及病理学角度对肝癌中抑癌基因p5 3和肿瘤标志物甲胎蛋白 (AFP)、癌胚抗原 (CEA)的表达及相关性进行研究。方法 :收集 4 0例肝细胞癌 (HCC)患者癌组织连带部分癌旁组织 ,用免疫组织化学法检测p5 3基因、AFP、CEA等。结果 :p5 3基因癌内表达率为 80 % ,癌旁组织为5 0 % ;AFP癌内表达率为 87 5 % ,癌旁组织为 80 % ;CEA癌内表达率为 5 5 % ,癌旁组织表达不明显。结论 :检测p5 3基因表达 ,并与AFP、CEA一起 ,对诊断肝癌、估计预后及制定术后治疗方案等有重要作用     

Cyclins非时相性表达和MDR1与胃肠道恶性肿瘤分期的研究

目的：研究胃肠道恶性肿瘤的4种主要Cyclins的表达规律,以此为依据对恶性肿瘤进行分型,并结合肿瘤标本中MDR1（多药耐药基因）的表达情况,与肿瘤TNM分期进行相关性研究。方法：使用流式细胞术分析新鲜手术获取的肿瘤标本的CyclinD1,E,A,B1及与MDR1表达情况,再记录术后病理报告进行TNM分期。结果：根据4种主要Cyclins的表达情况对恶性消化道肿瘤分为Ⅰ～Ⅳ型cyclin非时相性表达类型,此Ⅰ～Ⅳ型细胞周期类型与TNM分期有一致性（Kappa值为0．599,P〈0．01）,Ⅰ～Ⅳ型细胞周期类型中MDR1的表达水平逐渐增高（Spearman相关系数0．495,P〈0．01）。结论：根据4种主要Cyclins（Cyclin D1,E,A,B1）的表达情况对胃肠肿瘤进行的分型具有与TNM分期相同的意义,可以说是对“分子分期”的一种探索。在消化道肿瘤中,MDR1与肿瘤细胞周期破坏类型有关,对治疗具有指导意义。     

Fos蛋白参与PGE2引起HepG2肝癌细胞中VEGF mRNA的表达上调

目的: 研究前列腺素E2 (PGE2) 对人肝癌细胞中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响.方法: 反义脱氧寡核苷酸(ASO)及反转录聚合酶链式反应 (RT-PCR) 技术. 结果: PGE2增强了c-fos及VEGF mRNA在肝癌细胞系HepG2中的表达.c-fos mRNA的表达在PGE2作用3 h时达到高峰,显著高于PGE2作用0 h时(P < 0.01).在PGE2作用6 h时,VEGF mRNA的表达水平达到最高,显著高于PGE2作用0 h时(P< 0.01).c-fos ASO能明显降低PGE2诱导的VEGF mRNA的表达上调(P < 0.01).结论: PGE2可能通过增强转录因子c- fos的表达,进而促进VEGF mRNA在肝癌细胞中的表达和分泌,促进肝癌新生血管的生成,参与肿瘤的生长.     

胃癌相关基因GCRG213真核表达载体的构建及其对胃癌细胞成瘤性的影响

目的:研究胃癌相关基因GCRG213正义、反义转染对胃癌细胞MKN45成瘤性的影响。方法:采用半定量RT-PCR及Western免疫印迹法比较转染不同质粒的MKN45细胞中GCRG213在mRNA和蛋白质水平上的表达差异。选取稳定转染不同质粒的MKN45细胞,绘制细胞生长曲线,平板克隆形成实验、裸鼠移植瘤实验分析转染细胞成瘤性。结果:平板克隆形成实验显示转染了GCRG213正向克隆的MKN45细胞其细胞克隆形成数量高于转染空载体的细胞,而转染了GCRG213反向克隆的MKN45细胞其细胞克隆形成数量低于转染空载体的细胞。在裸鼠体内进行的转染细胞的成瘤性实验可见,转染了GCRG213正向克隆的MKN45细胞在裸鼠体内成瘤性高于转染空载体的细胞,而转染了GCRG213反向克隆的MKN45细胞在裸鼠体内成瘤性低于转染空载体的细胞。结论:胃癌相关基因GCRG213可促进肿瘤细胞的生长,促进肿瘤细胞的成瘤性,GCRG213反义转染可抑制肿瘤细胞的生长,抑制肿瘤细胞的成瘤性。     

新疆多民族地区三阴性乳腺癌BRCA1基因突变分析

目的：研究新疆多民族地区三阴性乳腺癌( TNBC ) BRCA1基因的突变情况及突变者与未突变者临床、病理组织特征的差异。方法以新疆多民族地区130例TNBC患者为研究对象,从静脉血提取基因组DNA,采用PCR联合直接测序法检测BRCA1基因突变情况。结果130例TNBC患者BRCA1突变率为17．7%(23/130),其中汉族与少数民族 TNBC 患者 BRCA1突变率分别为20．5%(17/83)、12．8%(6/47),差异无统计学意义(χ2=1．856,P=0．869)。130例TNBC患者中发现23例BRCA1突变的19个位点,其中8个为新发现的位点;4个BRCA1基因突变“热点”;此外还发现了9例(6．9%,9/130)致病性突变,5例无义突变,4例移码突变。早发性 TNBC 组 BRCA1突变率28．3%(13/46)高于晚发性TNBC组11．9%(10/84),差异有统计学意义(χ2=5．460,P<0．05)。 BRCA1基因突变组与BRCA1基因未突变组相比,发病年龄早,腋窝淋巴结转移率高, TNM分期晚,差异均有统计学意义( P<0．05)。结论新疆多民族地区TNBC患者BRCA1基因突变率高;突变者与未突变者相比,存在临床病理组织差异。     

西安地区汉族亚甲基四氢叶酸还原酶的两种基因多态性

目的：了解西安地区汉族人MTHFR基因C677T和A1298C两个位点的遗传多态性．方法：应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)调查西安地区96个汉族人的基因型分布．结果：677T等位基因的分布频率为45％，TT纯合子占18％；1298C等位基因的分布频率为20％．CC合子占3％；双杂合子677CT，1298AC占21％．结论：调查显示这两个位点的遗传多态性与献报道不同，可能具有群体差异性．     

小鼠高迁移率族蛋白B1启动子的构建与转录活性检测

【目的】构建小鼠高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子全长序列的荧光素酶报告基因用于药物筛选。【方法】采用PCR技术扩增小鼠HMGB1基因启动子全长序列,用GV238载体构建报告质粒GV238-HMGB1-P-Luc,以pGL3-basic作为阴性对照质粒,与内参质粒pRL共转染Hela细胞,以内毒素(LPS,0.2μg/mL)作为激活剂,以正丁酸钠(SB,10 mmol/L)作为抑制剂,分组处理24 h后检测荧光素酶活性。【结果】经酶切、PCR及测序鉴定证实克隆的HMGB1基因启动子全长2 140 bp,DNA序列正确无突变。与pGL3-basic组比较,GV238-HMGB1-P-Luc组荧光素酶活性显著增强(P0.05);与GV238-HMGB1-P-Luc组比较,LPS组荧光素酶活性显著增强(P0.01);与LPS组比较,SB组荧光素酶活性显著降低(P0.01)。【结论】HMGB1基因启动子报告基因构建成功,LPS可以增强其表达,SB则可以抑制LPS刺激下的HMGB1启动子表达增强,可为下一步筛选具有调控HMGB1启动子活性的药物奠定基础。     

胶质母细胞瘤染色体13q上肿瘤抑制基因存在的可能性

目的寻找胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)13号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失 (LOH)区域,为发现和定位肿瘤抑制基因(TSG)提供线索和依据。方法应用聚合酶链反应(PCR)方法,采用 荧光标记的引物和377型DNA序列自动分析仪,分析了20例GBM13号染色体上14个微卫星多态性标记的 LOH。结果在60％GBM的13号染色体上观察到LOH,在45.8％可提供信息位点存在LOH。其中13q的 LOH率明显高于13p,13q和13p的LOH率分别为60％、27％。在13q上的下列位点上检测到较高的LOH率 (＞50％)13q14.1-14.3上D13S153,13q12-14.2上的D13S217-D13S263,13q21.2-32上的D13S156-D13S265。 结论13号染色体可能在GBM的分子发病机制中发挥着重要作用,在13q14.1-14.3上的D13S153位点、13q 12-14.2上的D13S217-D13S263和13q21.2-32上的D13S156-D13S265间区域可能存在多个与GBM相关的肿瘤 抑制基因,可能包括RB1以及不同于RB1的其他肿瘤抑制基因。