HSP72过度表达对脂多糖刺激的巨噬细胞中NF-kB活性的影响

目的研究过度表达的热休克蛋白72(heat shock protein,HSP72)对脂多糖(1ipopolysaccharide、LPS)刺激的巨噬细胞中NF-KB活性的影响。方法构建pCD-hsp72重组质粒,转染小鼠巨噬细胞RAW264．7,G418筛选稳定转染hsp72基因的细胞,Westem印迹检测转染细胞HSP72的表达水平及LPS刺激后RAW264．7细胞内HSP72的表达水平、LPS刺激后转染细胞中IKBot的含量和胞核中NF-KB的含量的变化。结果构建pCD-hsp72重组质粒并转入巨噬细胞,获得稳定转染hsp72基因的细胞株,LPS刺激细胞内HSP72表达增加；HSP72可通过减少LPS刺激的巨噬细胞中IkBα的降解而抑制NF-kB活性。结论HSP72能抑制LPS激活的巨噬细胞中NF-kB的活化。     

肾性高血压大鼠脑动脉瘤形成过程中NF-kB和MMPs表达的关系

目的 了解大鼠脑动脉瘤形成过程中NF-κB与MMPs的表达变化规律及其相互关系。方法 制作。肾性高血压大鼠脑动脉瘤模型，通过免疫组化、RT—PCR、EMSA法分别在基因表达及蛋白水平观察脑动脉瘤形成过程中NF-κB与MMPs表达的动态变化。结果实验组动脉壁在术后1周即可见NF-κB表达明显增加，随之MMPs表达也迅速增加。NF-κB在术后3周基本达最高峰并持续至术后1个月，其活性较正常对照组高5倍，从术后2个月逐渐下降，到术后4个月基本降至正常。MMP-2、MMP-9表达在术后1个月达最高峰，并一直持续至术后4个月。对照组动脉壁NF-κB、MMP-2、MMP-9仅有微弱表达。结论 NF-κB活性升高可能是MMPs被异常激活的一个重要启动因素，它们共同参与了。肾性高血压大鼠脑动脉瘤发生、发展的机制。     

抗RANKL多克隆抗体对P.gingivalis感染的大鼠牙周骨吸收的抑制作用

目的评价抗NF-кB受体活化因子配体(RANKL)多克隆抗体对P.gingivalis感染引起的牙周骨吸收的抑制作用。方法将大鼠重组的RANKL对兔进行免疫获得兔抗鼠RANKL多克隆抗体,应用兔抗鼠RANKLF(ab')2抗体片断以防止免疫抑制。实验用大鼠口腔连续4d感染活P.gingivalis(109/ml/d),第5、9及14天于腭侧牙龈乳头处注射兔抗鼠RANKLF(ab')2抗体片断(1μg/部位),OPG-Fc(1μg/部位)及不相关细胞因子L6-Fc(1μg/部位),第28天处死,取样待检。取实验当天、实验14天及28天血清,ELISA法测定血清抗P.gingivalis的特异性IgG抗体滴度及牙龈组织匀浆液中的可溶性RANKL(sRANKL)的表达水平,采用SPSS11.5统计软件包进行分析。结果口腔感染P.gingivalis后血清抗P.gingivalis的特异性IgG抗体滴度明显升高,且一直持续到第28天;局部注射抗RANKL抗体并不降低血清中抗P.gingivalis的特异性IgG抗体滴度。注射抗体组和OPG-Fc组的sRANKL的表达明显下降(<0.05),与对照组相比具有统计学意义,而注射L6-Fc组sRANKL的表达无改变;牙周骨吸收的水平变化与牙龈组织匀浆液中RANKL的表达水平相一致。结论抗RANKL多克隆抗体可降低牙龈组织中的可溶性RANKL的含量,抑制P.gingivalis感染的牙周骨吸收,为改善牙周骨吸收提供了一种免疫治疗方     

肾安Ⅱ号对体外培养大鼠GMC增殖及NF-kB表达的影响

目的:观察不同浓度肾安Ⅱ号对LPS刺激的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖及NF-kB表达的影响.方法:应用细胞培养技术进行大鼠GMC传代培养,分别用台盼蓝染色计数法和四甲基偶氮唑盐法观察肾安Ⅱ号对大鼠GMC的毒性作用及增殖水平,并用免疫细胞化学技术法观察各组标本中大鼠肾小球系膜细胞表达NF-kB的情况.结果:肾安Ⅱ号24小时和48小时对LPS刺激的大鼠GMC的增生抑制作用与浓度呈显著的正相关关系(r=0.979和0.991,P<0.05);肾安Ⅱ号各浓度组大鼠GMC增生水平明显低于LPS组(P<0.01).免疫细胞化学染色(48 h组)显示:三组标本中均有不同程度的NF-kB的阳性表达;LPS组NF-kB表达明显强于GMC组与肾安Ⅱ号组(P<0.01);肾安Ⅱ号组NF-kB表达与GMC组无显著性差异(P>0.05).结论:肾安Ⅱ号能明显抑制LPS刺激培养条件下的大鼠肾小球系膜细胞增殖;且能够下调LPS刺激培养条件下大鼠GMC增殖和下调NF-kB的表达,具有阻缓肾纤维化作用.     

Treatment with green tea extract attenuates secondary inflammatory response in an experimental model of spinal cord trauma

In this study, we evaluated the effect of green tea extract (that was administered 25 mg/kg intraperitoneal at 1 and 6 h after injury) in experimental animal model of spinal cord injury. The spinal cord trauma was induced by the application of vascular clips to the dura via a four-level T5–T8 laminectomy. Spinal cord injury in mice resulted in severe trauma characterised by oedema, neutrophilic infiltration and apoptosis. Also, immunohistochemical examination demonstrated a marked increase in immune reactivity for nitrotyrosine. All parameters of inflammation were attenuated by green tea extract. The degree of spinal cord inflammation, nitrotyrosine, poli (ADP-ribosio) synthetase (PARS) and neutrophilic infiltration was markedly reduced. Green tea extract significantly ameliorated the recovery of limb function. Values shown are mean ± SE mean of ten mice for each group. *p < 0.01 versus sham, °p < 0.01 versus spinal cord injury. Taken together, our results clearly demonstrate that green tea extract treatment ameliorates spinal cord injury oxidative stress. Irene Paterniti, Tiziana Genovese and Salvatore Cuzzocrea contributed equally to this work.     

YTHDF2 inhibition potentiates radiotherapy antitumor efficacy

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