基于UPLC-Q-TOF-MS技术的刺五加叶血清药物化学初步研究

目的对刺五加Acanthopanax senticosus叶进行血清药物化学初步研究。方法大鼠ig给予刺五加叶提取液,采集含药血清。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,通过比较相同色谱、质谱条件下刺五加叶提取物、空白血清及给药血清图谱,并利用Peakview和MetabolitePilot数据处理软件,根据质谱所提供的保留时间、精确相对分子质量及二级质谱裂解碎片来鉴定和推测其血中移行成分。结果刺五加叶提取液ig给药后从血清中检测出19个入血成分,其中9个为原型成分,10个为代谢产物。结论初步确定了刺五加叶的入血成分,为阐明其药效物质基础提供依据。     

LC/MS/MS测定龙胆苦苷的尿药浓度

目的建立龙胆苦苷尿药浓度的液质联用测定方法(LC/MS/MS).方法以咖啡因作内标,固相萃取法处理尿样.色谱柱:RESCEK C8柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH=6.5)-乙腈(50:40:10),流速为0.2 mL·min-1.样品经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子监测方式测定龙胆苦苷(m/z 374.1→195.2)和咖啡因(m/z 195.2→138.2)浓度.结果尿液中龙胆苦苷在30～9000 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9980),方法回收率为91.10%～96.21%,提取回收率为100.52%～103.83%,日内、日间精密度均＜10%.结论该方法灵敏、准确、快速、特异性强.     

不同提取方法制备石菖蒲挥发性成分的GC-MS比较研究

目的:比较不同提取方法制备的石菖蒲挥发油中的挥发性化学成分。方法:采用传统的水蒸气蒸馏提取挥发油,超临界流体萃取挥发油和顶空进样直接采集挥发性成分3种方法,对石菖蒲中的挥发性成分进行GC-MS分析。结果:顶空进样技术鉴定出44种挥发性化学成分;水蒸气蒸馏法可鉴定出23种挥发性化学成分;超临界流体萃取可鉴定出25种化合物,经GC-MS分析,水蒸气蒸馏法与粉末顶空进样有14种化合物相同,超临界流体萃取与粉末顶空进样有8种化合物相同,相对含量均有一定的差异。结论:顶空进样技术分析石菖蒲中挥发性成分更简单、快速、无溶剂残留并节省药材。     

ICP-MS测定香芍软胶囊中砷 汞 铅 镉 铜的含量

目的：采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定香芍软胶囊（XSSC）囊心物中砷、汞、铅、镉、铜的含量。方法：样品经微波消解，以Re为内标，以茶叶、圆白菜标准物质为质控，采用ICP-MS测定上述5种元素。结果：对于所测5种元素，标准曲线的相关系数r〉0．9996，回收率为95．8-101．6％，RSD〈5．8％。结论：本测定方法快捷、准确、灵敏度高，适用于XSSC囊心物中上述5种元素的同时测定。     

基于质量标志物（Q-marker）的桂栀助眠方在食蟹猴体内药动学研究

目的基于中药质量标志物(Q-marker)概念,研究肉桂、栀子及两者配伍后的复方桂栀助眠方中主要成分在食蟹猴体内的药动学变化,为桂栀助眠方的Q-marker确定提供科学依据。方法建立UPLC-MS/MS方法,对桂栀助眠方配伍前后7个主要成分肉桂酸、4-甲氧基肉桂酸、香豆素、栀子苷、京尼平、京尼平苷酸、绿原酸在食蟹猴中的药动学行为进行比较研究。结果与肉桂、栀子单味药组相比,桂栀助眠方组食蟹猴血浆中肉桂酸、香豆素、京尼平苷酸、绿原酸的药时曲线下面积(AUC)、达峰浓度(C_(max))均显著增加;肉桂酸、4-甲氧基肉桂酸、香豆素消除半衰期(t_(1/2))明显降低;4-甲氧基肉桂酸、栀子苷的血药浓度达峰时间(t_(max))延长。结论配伍后桂栀助眠方能够显著改变复方中主要成分的体内暴露状态,7个主要成分可作为桂栀助眠方的Q-markers。     

五仁液有效成分分析

应用GC/MS联用技术研究了五仁液有效成分及其相对含量,发现五仁液中含有丰富的酚类、苯甲酸类、脂肪酸等抗微生物的有效成分。该结果证实了五仁液消毒、杀菌和治疗皮肤病的有效性。     

生脉注射液中皂苷类化学成分的研究

目的:研究生脉注射液中皂苷类化学成分.方法:采用液相色谱-质谱联用技术对8家生产企业的生脉注射液样品及红参中间体进行化学成分指认.结果:生脉注射液主要色谱峰为红参中皂苷类成分,实验证明有20个皂苷类成分为8家生产企业及红参中间体共有成分.结论:建立了生脉注射液中皂苷类成分的检查方法,为研究注射剂物质基础提供实验依据.     

泥附子商品等级划分合理性分析

目的分析泥附子商品等级划分的合理性。方法采用HPLC-MS/MS法同时测定不同等级附子中乌头碱、新乌头碱、印乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、乌头原碱、尼奥林、附子灵、宋果灵、塔拉乌头胺、去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱14种生物碱的含有量,并采用聚类分析初步验证附子分级的科学性;采用冰醋酸扭体法,以小鼠扭体次数和扭体潜伏期为考察指标,研究不同等级附子水提液的镇痛效果;采用大鼠尾静脉推注测定最小致死量,研究不同等级附子70%醇提液的毒性差异。结果 14种生物碱在不同等级附子中含有量存在显著差异。随着附子质量的增大,双酯型生物碱的含有量呈降低趋势,强心成分呈升高趋势,单酯类生物碱变化不明显;各等级镇痛效果无显著性差异,但小鼠扭体潜伏期存在缩短趋势;质量大于40 g的附子毒性明显低于小于40 g附子。结论附子分级在毒性评价上具有显著意义,质量大的附子具有毒性小的特点,而在镇痛疗效上并无明显差异。大个头附子强心成分具有升高趋势,但体内活性还需进一步验证。     

新补骨脂异黄酮在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

新补骨脂异黄酮为中药补骨脂中的黄酮类成分,具有抗菌、抗炎、抗癌、抗骨质疏松等多种药理作用。该文研究了新补骨脂异黄酮在Caco-2细胞模型中的吸收机制。采用Thermo Syncronis C18柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(90∶10),流速0.2 m L·min~(-1),电喷雾电离正离子模式(ESI+),以柳胺酚为内标物质建立新补骨脂异黄酮在Caco-2细胞孵育液中浓度的检测方法,考察时间、浓度、P-gp蛋白抑制剂维拉帕米、MRP-2蛋白抑制剂MK-571和BCRP蛋白抑制剂Ko143对新补骨脂异黄酮吸收的影响。研究结果表明,新补骨脂异黄酮在10~2 000μg·L~(-1)具有良好的线性,且专属性、基质效应、提取回收率、精密度、准确度和稳定性均符合测定要求。新补骨脂异黄酮在Caco-2细胞模型中的转运与时间和浓度呈正相关。15,30,50μmol·~(L-1)的新补骨脂异黄酮ER分别为1.64,1.94,0.99。与对照组相比,盐酸维拉帕米,MK-571,Ko143均可促进新补骨脂异黄酮的转运,其中盐酸维拉帕米和Ko143的作用较为显著。新补骨脂异黄酮在Caco-2细胞模型中的吸收以主动转运为主,同时存在被动转运,可能存在肠道转运蛋白的外排机制。     

Determination of paralytic shellfish poisoning toxins in Norwegian shellfish by liquid chromatography with fluorescence and tandem mass spectrometry detection.

A novel extraction and clean-up method has been developed for the determination of paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins in shellfish samples. Raw shellfish material was extracted with an acidic acetonitrile/water (80:20, v/v) solution, whilst being homogenised. During the homogenisation the sample extraction solution was cooled with ice water. Subsequently, the extract was frozen at -20 degrees C for at least 4h. During freezing, two layers were formed, only the lower predominantly aqueous layer was used for the determination. The final extract solution was cleaned-up using a combination of Oasis HLB and Carbograph activated carbon SPE columns. The developed extraction and clean-up methods combined with gradient elution liquid chromatography (LC)-mass spectrometry/mass spectrometry (MS/MS) has resulted in a method which can determine the analogs GTX 1-5, C1-2, DcGTX 2-3, DcSTX, Neo, STX in a single analysis with an overall detection limit of 313mug STXdiHCL-eq./kg shellfish meat. The use of the developed extraction method with post-column high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection (FLD) method provided an overall limit of detection of 89mug STXdiHCL-eq./kg shellfish meat for the same toxins. Both post-column HPLC-FLD and LC-MS/MS was used to investigate the Norwegian PSP toxin profile. It was found that the PSP toxins could be detected in shellfish samples from the Norwegian coastline for 10 months of the year, from March till December. The toxin profile consisted mainly of the carbamate toxins, GTX 1-4, Neo and STX, in terms of both concentrations and contribution to the overall toxicity. In addition, several of the n-sulfo-carbamoyl toxins were either detected in the samples at relatively low concentrations or their presence in the samples were indicated but could not be confirmed by the post-column HPLC-FLD and LC-MS/MS analyses.