组织因子在肿瘤侵袭中的作用和实验性靶向治疗进展

组织因子(TF)是生理性凝血过程中最重要的启动因子.TF除了参与凝血过程外,还可与凝血凼子Ⅶ结合通过多种信号传导,在肿瘤生长、血管生成及侵袭、转移过程中发挥重要作用.近年来,针对TF的靶向治疗取得了令人瞩目的进展,显示出对肿瘤组织及转移灶的明显抑制作用.     

腹腔镜小儿疝自体组织修补术的临床观察(附190例报告)

目的 探讨腹腔镜自体组织修补术治疗小儿腹股沟斜疝的临床应用价值.方法 回顾分析近5年行腹腔镜疝囊高位结扎术加自体组织修补术治疗190例小儿腹股沟斜疝的临床资料,单侧斜疝153例,双侧斜疝(包括对侧隐性疝)37例;其中平诊斜疝183例(包括复发疝11例),急诊嵌顿性斜疝7例.结果 190例均手术成功.平均手术时间单侧10 min,双侧18 min,术后平均住院为1 d,无术后并发症发生.全组病例术后均获得随访,随访时间为6个月～5年,复发5例.结论 腹腔镜自体组织修补术治疗小儿腹股沟斜疝疗效满意,手术时间短,创伤小,复发率低,并发症少,术后恢复快,同时可用于处理对侧腹股沟隐性疝或者用于双侧腹股沟疝修补术.     

A three-dimensional bioprinting system for use with a hydrogel-based biomaterial and printing parameter characterization

Bioprinting is an emerging technology for constructing tissue or bioartificial organs with complex three-dimensional (3D) structures. It provides high-precision spatial shape forming ability on a larger scale than conventional tissue engineering methods, and simultaneous multiple components composition ability. Bioprinting utilizes a computer-controlled 3D printer mechanism for 3D biological structure construction. To implement minimal pattern width in a hydrogel-based bioprinting system, a study on printing characteristics was performed by varying printer control parameters. The experimental results showed that printing pattern width depends on associated printer control parameters such as printing flow rate, nozzle diameter, and nozzle velocity. The system under development showed acceptable feasibility of potential use for accurate printing pattern implementation in tissue engineering applications and is another example of novel techniques for regenerative medicine based on computer-aided biofabrication system.     

不同受者同期分别接受同一供者的心、肺移植六例

目的为提高供者器官的利用率，探讨将同一供者的心、肺同期移植给不同受者的可行性及手术方法。方法采用原位灌洗、整块切取的方法获得3例供者的心脏和双肺，分别同期移植给3例终末期心脏疾病患者和3例终末期肺脏疾病患者。供者先行机械通气，然后开胸，主动脉及肺动脉分别插入灌注管，经主动脉插管灌注HTK液，经肺动脉插管灌注改良棉子糖低钾右旋糖酐液，对心、肺进行灌洗，然后整块切取心、肺。受者手术前进行供心、肺的分离，然后再次进行心、肺的逆行灌洗（通过上、下肺静脉插管和主动脉根部或者经腔静脉冠状窦逆行插管）。施行单侧肺移植者，再将左、右供肺分离。3例肺移植受者中，1例行左单肺移植，其他2例为非体外循环下序贯式双肺移植；3例心脏移植者均采用双腔静脉吻合法施行原位心脏移植。结果1例左单肺移植受者术后恢复良好；1例双肺移植受者术后出现右肺上叶静脉栓塞，于术后第9天再次手术，切除右肺上叶，后痊愈出院；另1例双肺移植受者，术后出现支气管吻合口狭窄，并发肺部感染，经对症治疗后好转出院，术后7个月死于重症感染。1例心脏移植受者术后早期出现肾功能衰竭，经血液透析治疗后痊愈出院，3例心脏移植受者术后生活质量良好，心功能恢复到0-I级。结论将同一供者的心、肺分别移植给不同受者，能充分利用供者器官，方法可行，效果良好。     

经胸骨正中手术切口感染创面的修复

目的对比观察不同方法修复经胸骨正中手术切口感染创面的治疗效果。方法1997年12月～2006年12月,分别用胸大肌内侧头肌瓣、胸大肌瓣、上蒂腹直肌瓣及大网膜移位修复经胸骨手术切口感染创面13例。男8例,女5例;年龄28～72岁,平均52岁。合并糖尿病8例,肺炎及心力衰竭4例,脓胸3例,慢性肺功能不全4例,恶性肿瘤1例,严重肥胖6例。11例为较新鲜裂开创面,2例为慢性创面。创面范围10cm×5cm～22cm×10cm。结果3例分别于术后3d因血管吻合处破裂大出血、肺炎及癌转移死亡。其余10例伤口期愈合6例,随访6个月～5年,均无复发;2例切口皮肤拉拢缝合处部分皮肤坏死,经再次手术扩创植皮后愈合;2例创口引流处感染,经换药愈合。结论创面较小且位于手术切口上端者适合用胸大肌内侧头肌瓣修复;创面较大且位于切口上端者适合用全胸大肌瓣修复;创面较小且位于切口下端的适合用上蒂腹直肌瓣修复;创面较长可联合应用胸大肌瓣、上蒂腹直肌瓣修复创面;创面巨大合并重要脏器外露时,可用大网膜移位修复创面。残余创面可经植皮及换药愈合。     

血管铸型方法检测组织工程骨修复羊胫骨缺损的远期血管化

目的采用血管铸型方法对组织工程技术修复中国青山羊胫骨大段骨缺损的远期血管化情况进行检测。方法中国青山羊3只，制备单侧胫骨20mm的骨与骨膜缺损，缺损部位内植入组织工程骨-珊瑚羟基磷灰石／骨髓基质干细胞（coral hydroxyapatite／bone marrow stem cells，CHAP／BMSCs）。术后3年分别行双侧后肢股动脉甲基丙烯酸甲酯血管铸型灌注，灌注后采用大体解剖、未脱钙骨片、扫描电镜等方法检测组织工程骨的远期血管化，并与健侧相同部位正常骨对照，观察其血管化效果。结果血管灌注后大体解剖观察示组织工程骨血管来源于周围软组织、髓腔血管及两端正常骨皮质。灌注后未脱钙骨磨片显示组织工程骨内微血管沿哈弗管和伏克曼管分布交织形成网状。采用图像分析仪比较组织工程骨与正常骨横切面磨片上血管相对面积，分别为（763．89±47．38）U／10万U与（788．00±65．83）U／10万U，差异无统计学意义（t=0．390，P〉0．05）。结论采用CHAP／BMSCs修复山羊胫骨大段骨缺损远期观察结果表明，新生骨远期血管化效果与正常骨无异，为组织工程骨下一步的临床应用提供可靠的依据。     

复方壳多糖组织工程皮肤的组织学特性

目的评价制备的复方壳多糖组织工程皮肤在组织学方面的特性，为其修复皮肤缺损创面提供实验依据。方法通过苏木精-伊红（HE）染色、高碘酸-希夫（PAS）染色、免疫组织化学染色及电镜，观察组织工程皮肤的组织学特征，包括表皮、真皮及两者的连接结构基底膜。结果制备的复方壳多糖组织工程皮肤表皮细胞增殖活跃，分层分化良好，厚约150μm，真皮层细胞生长正常，排列有序。PAS染色示真表皮间有均匀红染的条带出现，免疫组织化学染色结果显示Ⅳ型胶原、Ⅶ型胶原、层黏蛋白反应阳性，在电镜下可见角质形成细胞间大量桥粒，基底层内侧较多半桥粒，与机体皮肤结构相似。结论复方壳多糖组织工程皮肤组织结构良好，符合新型皮肤替代物在治疗皮肤缺损时的组织学要求。     

组织工程血管管状支架的制备与动态培养在血管组织工程中的应用

目的探索体外构建组织工程血管及细胞种植的方法。方法(1)制备管状支架模具,采用模具成形,冷冻干燥等技术,应用胶原和透明质酸复合体外预构管状支架;(2)分动态种植和静态培养两组进行细胞分层种植,每组12个,应用水溶性磺酸四唑(WST-1)测定,扫描电镜观察,5-溴2-脱氧嘧啶核苷(BrdU)细胞标记鉴定比较两种方法的细胞生长情况。结果(1)成功制备了管状支架,在培养液中约3周可保持管腔形态不变形,不塌陷;2.WST-1测定值在培养6、14、20 d分别为:动态组0.842±0.110、1.124±0.102、1.132±0.112,静态组0.386±0.121、0.489±0.245、0.499±0.265,两组比较差异有统计学意义,电镜和BrdU标记表明动态组细胞排列整齐有序。结论应用模具成形,冷冻干燥技术预构管状支架的方法切实可行,动态培养有助于细胞种植,本研究为组织工程血管的构建方法提供了思路。     

内皮祖细胞和去细胞猪主动脉瓣构建组织工程瓣膜的研究

目的将内皮祖细胞(EPCs)诱导分化为内皮细胞后种植在去细胞猪主动脉瓣膜(APV)上,以期为组织工程瓣膜(TEHV)的研制提供一个新的思路。方法采用去垢剂联合胰蛋白酶法去除猪主动脉瓣膜细胞。采用密度梯度离心法从羊骨髓中分离出EPCs,并诱导分化后,免疫组织化学染色鉴定。将诱导分化得到内皮细胞种植到APV上。采用光镜和电镜检测猪主动脉瓣膜的去细胞效果。对内皮细胞在APV上的生长效果进行观察。结果猪主动脉瓣内的细胞完全去除。EPCs经定向诱导后,具有表达CD-31,CD-34,von Willebrand因子等内皮细胞特征。诱导分化后的EPCs可以在APV表面黏附生长,并且表达CD-31和yon Willebrand因子。结论EPCs可以定向诱导分化为内皮细胞并可以在APV上种植生长。     

脂肪干细胞/Ⅰ型胶原凝胶复合体的构建及其体内外成骨分化研究

目的探讨利用脂肪干细胞与Ⅰ型胶原凝胶复合构建新型骨组织工程复合体的可行性并对其体内外成骨分化情况进行分析。方法取3月龄日本大耳白兔肩胛部皮下脂肪，Ⅰ型胶原酶消化获得细胞，于体外依次进行骨、软骨、脂肪多向诱导分化鉴定；取第3代细胞与Ⅰ型胶原凝胶复合，于成骨诱导条件下体外培养，相差显微镜、扫描电镜观察复合情况并对其碱性磷酸酶、细胞外基质矿化程度进行检测，同时设立单层贴壁培养细胞作为对照（n=4）；两周后移植于裸鼠皮下，12周后处死动物，依次行放射学、组织学检测观察成骨情况（n=3）。结果（1）所获细胞具备骨、软骨、脂肪多向分化潜能，为多能干细胞。（2）形态学观察显示脂肪干细胞呈三维立体生长状态，均匀、高密度悬浮于Ⅰ型胶原凝胶中。在体外成骨诱导条件下，其碱性磷酸酶活性以及外基质矿化程度均显著高于单层贴壁培养细胞（P〈0．01，n=4）。（3）于裸鼠皮下移植12周后，放射学、组织学检测显示脂肪干细胞．Ⅰ型胶原凝胶复合体成骨明显（n=3）。结论（1）IⅠ型胶原凝胶可显著促进脂肪干细胞的成骨分化。（2）作为一种新型的骨组织工程复合物，脂肪干细胞-Ⅰ型胶原凝胶复合体可应用于骨组织工程，特别是腔隙性骨缺损的修复过程。