Fas/FasL信号通路与帕金森病大鼠多巴胺能神经元的相关性研究

背景免疫炎症可能是导致帕金森病(PD)的因素,而Fas/FasL信号通路诱导的淋巴细胞凋亡与心血管疾病、自身免疫系统疾病的发生及预后均密切相关。目的探讨Fas/FasL信号通路与PD大鼠多巴胺能神经元的相关性。方法2017年10月—2018年1月,从60只雄性SPF级SD大鼠随机选取10只作为对照组,其余大鼠采用脑立体定位技术建立PD大鼠模型,并将建模成功的20只大鼠随机分为模型组与干预组,每组10只。对照组、模型组大鼠给予0.9%氯化钠溶液2 ml灌胃,干预组大鼠则给予美多芭溶液2 ml灌胃,均为1次/d,连续灌胃14 d。比较模型组与干预组大鼠干预后阿扑吗啡(APO)诱导的旋转圈数,并比较三组大鼠脑组织Fas、FasL、酪氨酸氢化酶(TH)蛋白表达水平;TH蛋白表达水平与PD大鼠Fas、FasL蛋白表达水平的相关性采用Pearson相关分析。结果干预组大鼠干预后APO诱导的旋转圈数少于模型组(P<0.05)。对照组与干预组大鼠的Fas、FasL蛋白表达水平低于模型组,TH蛋白表达水平高于模型组(P<0.05);干预组大鼠的Fas、FasL蛋白表达水平高于对照组,TH蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,TH蛋白表达水平与Fas、FasL蛋白表达水平无直线相关性(r值分别为0.053、0.026,P>0.05)。结论PD大鼠Fas、FasL蛋白表达水平较高,Fas/FasL信号通路激活,但多巴胺能神经元数量较少,且Fas/FasL信号通路与PD大鼠多巴胺能神经元无直线相关关系。     

Fas/Fas Ligand Expression and Characteristics of Primed CD45RO+ T Cells in the Inflamed Mucosa of Ulcerative Colitis

Background: Chronic immune activation in the colon is characteristic of ulcerative colitis (UC). Fas/Fas ligand (FasL) system is a mechanism responsible for activation-induced cell death (AICD), which maintains homeostasis within the immune system. Thus, Fas/FasL expression on activated colonic T cells of UC patients, as well as the susceptibility of such T cells to AICD was investigated in order to determine the role of activated colonic T cells in the long lasting inflammation in UC. Methods: Fas, FasL, and CD45RO expression on peripheral blood and colonic T cells of UC patients were assayed by flow cytometry. Apoptosis of colonic T cells induced by anti Fas antibody was assessed using the terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end-labeling (TUNEL) assay. Results: The majority of colonic T cells expressed both CD45RO and Fas in the colonic mucosa, a situation that was quite different from that in the peripheral blood. The number of CD45RO⁺CD8⁺ and Fas⁺CD8⁺ T cells was significantly lower in UC patients than the controls, unlike the number of Fas⁺CD4⁺ T cells. In contrast, the number of both CD45RO⁺CD4⁺ and CD45RO⁺CD8⁺ T cells in UC mucosa expressing FasL was significantly higher than in the controls. While Fas mediated apoptosis of CD45RO⁺CD8⁺ T cells was higher in UC patients than the controls, the number of apoptotic CD45RO⁺CD4⁺ T cells from UC mucosa was not. Conclusions: In UC patients, CD45RO⁺CD4⁺ T cells are less sensitive to apoptotic signals mediated by Fas. These phenomena may contribute to the pathogenesis of UC.     

胎盘bcl-2、Fasl的表达与母血、羊水中EGFET关系的探讨

目的 探讨分娩状态下胎盘滋养层细胞bcl-2、Fasl的蛋白表达变化及其与母血、羊水中表皮生长因子(EGF)、内皮素(ET)的变化之间的关系。方法 应用免疫组化法测定53例足月妊娠产妇胎盘滋养层细胞bcl-2、Fasl的蛋白表达,用放射免疫法测定产妇母血、羊水中EGF、ET的含量。其中临产组28例;未临产组25例。结果 (1)临产组胎盘滋养层细胞bcl-2、Fasl的蛋白表达明显低于未临产组,两组平均灰度及阳性细胞率比较,差异有显著意义(P<0.05)。(2)两组母血、羊水中EGF、ET水平均高于正常值,且临产组高于未临产组,差异有显著意义(P<0.05)。(3)母血、羊水中EGF、ET的变化与bcl-2的蛋白表达呈负相关,而与Fasl的表达不相关。EGF、ET浓度与bcl-2的平均灰度及阳性细胞率均呈负相关,相关系数r检验差异有显著意义(P<0.05)。结论 胎盘凋亡基因bel-2、Fasl介导的滋养层细胞凋亡在启动分娩发动过程中具有重要作用;bcl-2的作用可能受EGF、ET等细胞因子的调控。     

临产前后胎盘组织bcl-2、Fasl的表达与母血、羊水EGF变化的关系

目的探讨临产前后bc l-2、Fasl在胎盘滋养层细胞的蛋白表达变化及其与母血、羊水中表皮生长因子(EGF)的浓度之间的关系。方法53例足月妊娠妇女分成两组,其中临产组28例,未临产组25例。用免疫组化法测定胎盘滋养层细胞bc l-2、Fasl的蛋白表达,用放射免疫法测定孕妇母血、羊水中EGF的浓度。结果(1)临产组bc l-2、Fasl的表达明显低于未临产组(P<0.05)。(2)临产组母血、羊水EGF水平高于未临产组(P<0.05)。(3)母血、羊水中EGF的变化与bc l-2的表达呈负相关,而与Fasl的表达不相关。结论bc l-2、Fasl介导的胎盘滋养层细胞凋亡在启动分娩发动过程中具有重要作用;EGF可能对bc l-2的表达存在下调作用。     

凋亡及凋亡相关因子在胎儿生长受限胎盘滋养细胞中的表达

目的　研究胎儿生长受限（fetal growth restriction,FGR）胎盘滋养细胞的凋亡及凋亡相关因子Fas、Fasl的表达及意义。方法　收集2014年3月至2017年3月大连市妇女儿童医疗中心剖宫产分娩的胎盘,正常妊娠晚期（对照组）、FGR（实验组）,各50例。采用TUNEL法检测两组胎盘滋养细胞的凋亡,计算凋亡指数。采用免疫组化S-P法检测凋亡相关因子Fas、Fasl的表达。结果　对照组、实验组均可见胎盘滋养细胞的凋亡,凋亡指数AI分别为（17.64±6.97）%及（56.48±7.98）%,差异有显著性意义（P<0.05）。实验组Fas表达高于对照组,实验组Fasl表达低于对照组,差异均有显著性意义（P<0.05）。实验组AI与Fas表达呈正相关（r=0.634,P=0.000）,与Fasl呈负相关（r=-0.940,P=0.000）。结论　凋亡相关因子Fas、Fasl可能共同通过诱导胎盘滋养细胞的凋亡参与FGR的发病。     

丹皮酚对大肠癌HT-29细胞的增殖抑制作用及其机制的探讨

目的采用定量和定性相结合的方法观察丹皮酚对HT-29细胞的增殖抑制作用并对其可能的作用机制进行探讨。方法用MTT法和流式细胞仪定量测定丹皮酚对HT-29细胞的抑制率及细胞凋亡率,选用TUNEL法及细胞免疫组化从形态学方面探寻丹皮酚对HT-29细胞作用的可能机制。结果丹皮酚在0.024~1.504 mol.L-1剂量下对体外培养的大肠癌HT-29细胞的增殖均有抑制作用,呈现明显的浓度效应关系;在此浓度(0.024~1.504 mol.L-1),分别作用24,48,72和96 h,抑制率随之增加,呈明显的时间效应关系;经1.504 mol.L-1的丹皮酚处理的HT-29细胞,细胞凋亡率明显增加与阴性对照有明显差异;流式细胞仪检测在G1期前出现sub-G1峰,S期细胞增多,G1、G2期细胞减少,随着丹皮酚浓度的增加,HT-29细胞的凋亡率逐渐增加,每个实验组的凋亡率与对照组相比差异有显著性(P<0.05);丹皮酚作用HT-29细胞可使Fas/FasL表达增加。结论丹皮酚可能通过上调大肠癌HT-29细胞Fas/FasL蛋白的表达而诱导细胞凋亡是其抑制大肠癌细胞增殖的机制之一。     

红景天对小鼠脾Fas配体及穿孔素蛋白表达的影响

目的：实验拟研究红景天对小鼠脾Fas配体及穿孔素蛋白表达的影响,为进一步探讨红景天的免疫药理机制,为研制开发免疫新药提供理论依据。方法：本研究以红景天为试验药物,以小鼠为试验动物,通过灌胃法连续给药,采用RT-PCR技术,观察了红景天对小鼠脾组织免疫分子Fas配体及穿孔素等水平的影响。结果：实验结果显示试验组小鼠脾脏免疫分子Fas配体及穿孔素为阳性表达,实验组与对照组比较差异显著（P〈0.01）,提示红景天能使淋巴细胞活性增强。结论：红景天能够有效的促进小鼠的免疫功能,增强小鼠脾组织免疫分子Fas配体及穿孔素的表达水平,此研究结果为中药免疫机理的研究提供了新的材料。