肢体移植排斥反应中细胞凋亡及致死基因表达

目的探讨同种异体肢体移植急性排斥反应时细胞凋亡及致死基因Fas、Fas配体(FasL)表达的作用及其意义。方法建立近交系SD大鼠与wistar大鼠间原位异体肢体移植模型。实验观察组为异基因组，SD大鼠为供体，Wistar大鼠为受体；对照组为同基因移植组，在Wistar大鼠之间移植。分别进行左腿原位移植术。术后第1，3，5，7d分别取移植肢体组织进行病理学检查及电镜扫描，采用原位末端标记法(TUNEL)检测移植肢体中的凋亡细胞，免疫组化方法检测移植肢体中Fas、FasL表达的变化。结果实验组大鼠在术后发生由轻到重的急性排斥反应，对照组无明显排斥现象。实验组的移植物细胞凋亡数均明显高于对照组，凋亡细胞主要分布在血管内皮细胞及皮肤基底层细胞；术后第7d因严重排斥使小血管广泛栓塞。异基因肢体移植组的移植物中Fas／FasL表达增高，并与病理学检查及细胞凋亡程度一致。结论Fas、FasL介导的血管内皮细胞凋亡在大鼠异基因肢体移植急性排斥反应中发挥重要作用，可作为判断移植肢体预后及监测排斥反应的重要指标。     

膀胱移行细胞癌组织Fas/Fasl和c-myc表达与肿瘤免疫逃逸相关性研究

目的:探讨膀胱移行细胞癌Fas/Fasl和c-myc表达与淋巴细胞凋亡及肿瘤免疫逃逸的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测50例膀胱癌和15例正常膀胱组织Fas/Fasl和c-myc表达;应用原位末端标记法检测膀胱肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)及正常膀胱黏膜浸润淋巴细胞凋亡;分析TIL凋亡率与Fas/Fasl和c-myc的相关性.结果:1)膀胱癌及正常膀胱组织中Fasl光密度值分别为174.54±13.0和143.23±3.88(t=9.287,P＜0.01),Fas在膀胱癌组织及正常膀胱黏膜中表达的光密度值分别为126.82±10.09和134.74±4.76, t=3.589,P＜0.01.c-myc在膀胱癌组织中表达率为(68.96±16.22)%,在正常膀胱黏膜中不表达.2)TIL凋亡率为(31.47±17.99)%,高于正常膀胱黏膜浸润淋巴细胞的(4.37±1.50)%差异有统计学意义,t=5.795,P＜0.01.3)Fasl与TIL凋亡率呈正相关(r=0.85, P＜0.01),Fas与TIL凋亡率呈负相关(r=-0.67,P＜0.01),c-myc与TIL凋亡率呈正相关,r=0.50,P＜0.01.结论:膀胱移行细胞癌Fasl高表达及Fas低表达诱导TIL凋亡,c-myc对该途径起增敏作用,这可能是膀胱肿瘤免疫逃逸的主要机制之一.     

FAS系统和p27蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨FAS/FASL系统及p27蛋白与膀胱移行细胞癌分级分期,复发多发的关系.方法:采用SP免疫组织化学染色方法检测50例膀胱移行细胞癌,以及15例正常膀胱黏膜组织病理切片FAS,FASL,p27的表达.结果:FAS/FASL和p27在膀胱癌中表达与正常膀胱黏膜表达有差异性.FAS,p27的表达在高分级膀胱癌中降低明显,FAS的表达在高分期肿瘤中降低明显.结论:FAS/FASL介导的细胞凋亡在膀胱癌中受到抑制,p27限制性调节细胞周期进程的作用在膀胱癌中受到破坏.FAS,p27可作为评价膀胱癌恶性程度的参考指标.FAS表达还与膀胱癌侵袭性相关.     

Fas和Fas配体在角膜移植免疫排斥反应中的表达

目的 了解Fas和Fas配体(FasL)在发生免疫排斥的角膜植片中的表达情况，探讨其在角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法 角膜移植术后排斥反应的患者42例，于再次行穿通性角膜移植术时取其排斥的移植片；正常角膜6例。进行免疫组织化学染色，观察正常角膜和移植片中上皮、基质和内皮层的Fas及：Fas配体的表达。结果 在6例正常角膜中，角膜上皮、内皮Fas和FasL．为阳性表达。42例移植片中，角膜上皮．Fas和FasL均有表达。有新生血管形成及免疫细胞浸润的角膜基质中，血管内皮细胞、基质细胞FasL为阳性表达，Fas在部分浸润的免疫细胞中有表达；移植片内皮细胞层广泛破坏。结论 Fas、FasL在角膜移植片中的表达，可能与角膜移植免疫排斥反应有关。     

甲基强的松龙对特发性血小板减少性紫癜外周血淋巴细胞凋亡及FasFasl的影响

研究甲基强的松龙对小儿特发性血小板减少性紫癜 (ITP)外周血淋巴细胞凋亡及Fas(CD95 )、Fas配体 (Fasl)表达的影响及其临床意义。用流式细胞仪检测 2 5例ITP患儿治疗前后外周血淋巴细胞凋亡率及Fas、Fasl蛋白表达。结果 ,治疗前淋巴细胞凋亡率及Fas、Fasl蛋白表达与正常对照组相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。治疗后血小板增加时淋巴细胞凋亡率增加 ,Fas、Fasl蛋白表达上调 ,与治疗前相比差异有显著性意义 (P <0 0 1)。结果表明 :甲基强的松龙可显著促进ITP患者外周血淋巴细胞凋亡的发生 ,上调淋巴细胞Fas、Fasl的表达 ,有助于清除激活的淋巴细胞。     

依托咪酯后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤脑细胞凋亡及Fas/Fasl蛋白表达的影响

目的探讨依托咪酯后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤脑细胞凋亡及fas/fasl蛋白表达的影响。方法健康Wistar大鼠40只,体重200-250g,随机分为假手术组（SH组）、缺血再灌注组（I/R组）、依托咪酯后处理组（E1、E2、E3组）五组。I/R组和E1、E2、E3组夹闭双侧颈总动脉制备脑缺血模型,SH组只暴露双侧颈总动脉。E1、E2、E3组分别于缺血20min、再灌注前3min经股静脉给予依托咪酯0.3mg、0.9mg、2.7mg/kg,I/R组和SH组给予等量生理盐水。五组均于再灌注24h处死,断头取脑组织切片,HE染色法光镜下观察脑组织形态学变化,TUNEL法检测脑细胞凋亡,免疫组化法测定fas/fasl蛋白表达。结果与SH组比较I/R组和E1、E2、E3组脑细胞凋亡指数（AI）升高,Fas/Fasl蛋白表达上调（P均〈0.01）。与I/R组比较E1、E2、E3组AI降低,Fas/Fasl蛋白表达下调（P均〈0.01）。E1、E2与E3组比较,AI降低,Fas/Fasl蛋白表达下调（P均〈0.01）结论依托咪酯后处理可以降低脑缺血再灌注损伤脑细胞凋亡以及fas/fasl蛋白表达,其作用以中、小剂量较为显著。     

凋亡基因Bax,Bcl-2,Fasl在成年猫脊髓中的表达

采用免疫组织化ＡＢＣ法，观察凋亡基因Ｂａｘ，Ｂｃｌ－２，Ｆａｓｌ在成年猫脊髓的分布。结果：在脊髓腹角、中间带及后角深部均见Ｂａｘ，Ｂｃｌ－２，Ｆａｓｌ阳性神经元。反应物定位于细胞浆，相对之，后角浅层除Ｂｃｌ－２阳性神经元尚多多，Ｂａｘ，Ｆａｓｌ阳性神经元较少。     

罗格列酮对实验性1型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响

目的:观察罗格列酮(Rosiglitazone natrium,RSG)对实验性1型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响.方法:6周龄SD大鼠随机分成3组,正常对照(Control,Con)组24只,糖尿病(Diabetic mellitus,DM)组24只,罗格列酮干预(Rosiglitazone,RSG)组24只.以链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)溶液单次腹腔注射,72 h后测空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)≥16.7 mmol/L为造模成功.应用罗格列酮后5个时间段(2、5、7、10、13周),分别用TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)方法检测胰岛β细胞的凋亡,用免疫组化法检测胰岛中胰岛素(Insulin,Ins)及Fasl的表达.结果:与DM组相比,RSG组胰岛表达胰岛素水平提高,β细胞相对凋亡指数及Fasl表达水平均下降(P均＜0.05).结论:罗格列酮能抑制或延缓β细胞凋亡,其机制可能与抑制Fas/Fasl细胞凋亡通路有关.     

疏肝健脾方对乳腺增生大鼠sFas及Fas/FasL表达的干预作用

目的观察疏肝健脾方对乳腺增生大鼠血清sFas、乳腺组织Fas、FasL的影响。方法 60只大鼠随机分为空白对照组、疾病模型组、三苯氧胺组、疏肝健脾方小剂量组、疏肝健脾方大剂量组5组,每组12只,采用苯甲酸雌二醇和黄体酮肌注造模的同时,分别以蒸馏水、三苯氧胺、疏肝健脾方灌胃干预治疗30天后,观察乳腺增生大鼠血清sFas浓度和乳腺组织Fas、FasL的表达。结果 Fas在乳腺增生病模型大鼠中表达较低,FasL表达较高,经药物干预后,均能够增加Fas在乳腺组织中的表达(P<0.01),降低FasL中的表达(P<0.01),接近空白对照组,各组药物之间无显著性差异(P>0.05)。sFas在大鼠乳腺增生病模型血清中的浓度增高,经药物干预后能够降低sFas在大鼠血清中的浓度(P<0.01或0.05),各药物组之间无显著性差异(P>0.05)。结论疏肝健脾方对大鼠乳腺增生组织Fas/FasL系统有显著的干预作用,通过提高Fas降低FasL蛋白的表达,降低sFas在大鼠血清中的浓度,从而抑制/逆转乳腺增生,降低增生程度。     

马鞭草C部位诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡分子机制研究

目的:探讨马鞭草C部位诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡的分子机制.方法:流式细胞仪检测细胞周期;Western-blot及RT-PCR检测Fas/Fasl蛋白及基因的表达.结果:药物作用后细胞被不同程度阻滞于G2/M期,并伴有G0/G1期比例下降;Fasl蛋白表达降低,Fas在C部位作用前后均无表达;Fasl mRNA转录呈下降趋势.结论:马鞭草C部位将人绒毛膜癌JAR细胞阻滞在G2/M期,并诱导其凋亡,其作用机制可能与Fasl的表达下调有关.