以CpG为佐剂的犬细小病毒基因疫苗的初步研究

目的研制犬细小病毒(CPV)基因疫苗。方法以CPV VP2基因为基因免疫的目的基因,以pcDNA3和pcDNAK质粒为基因免疫的载体,以非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)为核心的免疫刺激序列为免疫佐剂,构建重组质粒并免疫BALB/c小鼠和毕格犬。结果经pcDNA3-VP2C1(含1个拷贝CpG基序)基因免疫的BALB/c小鼠能产生抗CPV血凝抑制抗体;对于经CPV灭活苗初次免疫的毕格犬,用pcDNAK-VP2C2(含2个拷贝CpG基序)质粒免疫产生的再次免疫应答优于pcDNA3-VP2C1。结论VP2基因、pcDNAK和犬源CpG可用于CPV基因疫苗的进一步研究。     

Next-Generation Sequencing Analysis of CpG Methylation of a Tumor Suppressor Gene SHP-1 Promoter in Stable Cell Lines and HCV-Positive Patients

Hepatitis C virus (HCV) is the major causative pathogen associated with hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis. The main virion component, the Core (C) protein, is involved in multiple aspects of HCV pathology including oncogenesis and immune evasion. In this study, we established a next-generation bisulfite sequencing (NGS-BS) protocol to analyze the CpG methylation profile at the tumor suppressor gene SHP-1 P2 promoter as a model system. Our data show that HCV C protein expression in the immortalized T cells correlated with a specific CpG methylation profile at the SHP-1 P2. The NGS-BS on HCV-positive (HCV⁺) patient-derived PBMCs revealed a considerably different CpG methylation profile compared to the HCV C protein immortalized T cells. Notably, the CpG methylation profile was very similar in healthy and HCV⁺ PBMCs, suggesting that the SHP-1 P2 CpG methylation profile is not altered in the HCV⁺ individuals. Collectively, the NGS-BS is a highly sensitive method that can be used to quantitatively characterize the CpG methylation status at the level of individual CpG position and also allows the characterization of cis-acting effects on epigenetic regulation.     

改良外踝上动脉岛状皮瓣在足部皮肤缺损中的应用

目的了解应用改良外踝上动脉岛状皮瓣修复足踝部软组织缺损的临床效果。方法应用上述方法修复各种原因所致的足踝部软组织缺损共28例。结果27例皮瓣全部成活,1例远端皮肤1～2cm皮肤坏死,皮瓣最大面积16×9cm,最小6×4cm,随访6m～2y年,效果满意。结论应用此种皮瓣手术简便,不损伤小腿主要血管,是修复足踝、足背部软组织缺损理想方法。     

菩提岛野生药用植物资源调查

目的:为唐山市菩提岛药用植物资源的合理利用与开发提供科学依据。方法:通过野外考察、标本采集、资料查阅整理及标本鉴定的方法对菩提岛药用植物资源的种类组成及药用价值进行深入的研究。结果:菩提岛药用植物共有51科96属108种。其中优势科为菊科、百合科、唇形科、萝藦科、蔷薇科、禾本科、豆科、十字花科,占菩提岛野生药用植物总资源的47.23%。对菩提岛药用植物的药用部位、功效进行了统计分析,对菩提岛极具开发价值的野生药用植物进行简要介绍。结论:菩提岛药用植物资源丰富,有很大的开发利用价值。     

颏下动脉岛状皮瓣在下咽、颈段食管缺损修复中的应用

目的:探讨颏下动脉岛状皮瓣在下咽、颈段食管缺损修复中的应用价值。方法:回顾性描述性研究。纳入2018年1月—2021年6月蚌埠医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科应用颏下动脉岛状皮瓣修复下咽肿瘤术后缺损的6例患者临床资料。患者均为男性,年龄54～76岁;国际抗癌联盟(UICC)临床分期：T2N1M0 1例、T2N2M0 ...     

指背逆行岛状皮瓣修复指端缺损的治疗体会

目的探讨Ⅰ期指背逆行岛状皮瓣修复指端缺损的疗效及治疗体会。方法自2000年2月至2009年2月,对46例(52指)手指皮肤缺损的患者,采用指背逆行筋膜岛状皮瓣旋转180°转移修复。结果除2例皮瓣远端部分坏死外,余均成活,经6个月~5年随访,功能及外观良好。按TAM法评定,优36例,良7例,可3例,优良率达93%。结论该术式操作简单、疗程短、成功率高,对手指功能影响小,皮瓣血运良好,指端外形感觉效果好,是理想的修复方法。     

以CpG ODN为靶点应用生物传感器技术筛选抗炎中药

目的:筛选具有拮抗CpGODN作用的抗炎中药。方法:将CpGODN包被于生物传感器的生物素化样品池上,测定78种中药水煎液与CpGODN的亲和力;选择具有较高亲和力的中药水煎液,与CpGODN(33μg·ml-1)37℃孵育30min后,再次测定与CpGODN的亲和力。结果:78种中药中,地榆、大黄、藏青果等14种中药含有结合CpGODN的活性成分;鸦胆子、赤芍、地榆等9种中药活性成分含量较高。结论:筛选得到9种活性含量较高的中药,为下一步分离提纯有效成分单体提供了实验依据。     

肺癌患者PTEN基因启动子高甲基化的检测

目的 探讨肺癌患者组织、外周血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)启动子异常基因化状况及其在肺癌诊断中的价值.方法 用甲基化特异性PCR方法检测组织、血浆及BALF中的PTEN基因启动子区CpG岛甲基化.结果 45例肺癌患者中,PTEN基因启动子异常甲基化率组织为26.67%(12/45)、血浆为15.56%(7/45),BALF为22.22%(10/45);而非肺癌组织、正常对照血浆、非肺癌患者BALF中未检出甲基化;血浆、BALF中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.01).结论 血浆、BALF中PTEN基因异常甲基化改变的检测在肺癌的早期特异诊断等方面有一定的价值.     

浙江省舟山海岛地区出生缺陷监测研究

目的　了解浙江省舟山海岛地区出生缺陷的变化趋势,为寻找降低该地区出生缺陷患病率水平的防治措施提供线索。方法　选择2000-2006年舟山海岛地区以人群为基础的出生缺陷监测数据进行回顾性分析。结果　舟山市2000-2006年,共监测围产儿41 396例,其中出生缺陷儿498例,出生缺陷年平均患病率为120.30/万,各年出生缺陷患病率呈上升趋势。舟山市常见的出生缺陷分别是先天性心脏病（33.58/万）、外耳其他畸形（16.19/万）、多指（趾）畸形（15.46/万）、唇裂有/无腭裂（11.60/万）、先天性脑积水（10.39/万）。先天性心脏病构成以单纯性室间隔缺损、动脉导管未闭、房间隔缺损为主。结论　先天性心脏病是舟山海岛地区高发的出生缺陷,需要采取干预措施。     

硫喷妥钠对CpG DNA诱导人外周血单个核细胞NF-κB表达和TNF-α、IL-6释放的影响

目的 探讨硫喷妥钠对CpG DNA诱导人外周血单个核细胞(hPBMC)核因子-κB(NF-κB)表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)释放的影响.方法 采集健康志愿者外周血,使用淋巴细胞分离液(Ficoll-Hypaque)密度梯度离心分离hPBMC.分别加入不同浓度的硫喷妥钠后(0.2～1.0 mg/ml),ELISA测定hPBMC培养上清中TNF-α和IL-6浓度,确定硫喷妥钠对CpG DNA刺激细胞分泌TNF-α及IL-6的抑制作用及其剂量-效应关系和时间-效应关系;免疫蛋白印迹法(Western blotting)分析hPBMC胞核NF-κB表达.结果 不同浓度的硫喷妥钠(0.2～1.0mg/ml)显著抑制CpG DNA诱导hPBMC NF-κB P65表达和TNF-α、IL-6释放(P<0.05或P<0.01).提前1～4 h给予硫喷妥钠或同时给予硫喷妥钠和CpG DNA(0 h),其拮抗CpG DNA诱导细胞因子释放的作用非常显著(P<0.01),且硫喷妥钠在刺激物CpG DNA给予后1 h再加入,也能观察到显著拮抗作用(P<0.05).结论 硫喷妥钠可通过下调CpG DNA诱导hPBMC NF-κB P65表达,从而降低促炎细胞因子TNF-α和IL-6的释放.